Biología celular

@incollection{crossref1951v,
    title = "V. BIOLOGÍA CELULAR",
    year = "1951",
    booktitle = "Un libro de fuentes en Biología Animal",
    url = "https://doi.org/10.4159/harvard.9780674592698.c6",
    doi = "10.4159/harvard.9780674592698.c6",
    pages = "429-470"
}

@article{bullough1958cellular,
    author = "BULLOUGH, W. S.",
    title = "Biología celular",
    year = "1958",
    journal = "Nature",
    url = "https://doi.org/10.1038/182551a0",
    doi = "10.1038/182551a0",
    number = "4635",
    pages = "551-551",
    volume = "182"
}

@article{howard1965cellular,
    author = "Howard, Alma",
    title = "Cellular Radiation Biology",
    year = "1965",
    journal = "International Journal of Radiation Biology and Related Studies in Physics, Chemistry and Medicine",
    url = "https://doi.org/10.1080/09553006514550691",
    doi = "10.1080/09553006514550691",
    number = "6",
    pages = "611-611",
    volume = "9"
}

@article{na1965cellular,
    author = "\\&NA;",
    title = "BIOLOGÍA DE LA RADIACIÓN CELULAR",
    year = "1965",
    journal = "The American Journal of the Medical Sciences",
    url = "https://doi.org/10.1097/00000441-196509000-00017",
    doi = "10.1097/00000441-196509000-00017",
    number = "3",
    pages = "365",
    volume = "250"
}

@article{scott1965cellular,
    author = "Scott, Robert B.",
    title = "Biología de la radiación celular.",
    year = "1965",
    journal = "Archives of Internal Medicine",
    url = "https://doi.org/10.1001/archinte.1965.03870040147047",
    doi = "10.1001/archinte.1965.03870040147047",
    number = "4",
    pages = "633",
    volume = "116"
}

@misc{ambrose1970cell1,
    author = "Ambrose, E. J. y Easty, D. M",
    title = "Biología celular",
    year = "1970",
    howpublished = "Reading, Mass., Addison- Wesley",
    note = "talkorigins_source = {true}; raw_reference = {Ambrose, E. J., y Easty, D. M., 1970, Biología celular: Reading, Mass., Addison- Wesley.}"
}

@misc{dowben1971cell2,
    author = "Dowben, R. M",
    title = "Biología celular",
    year = "1971",
    howpublished = "New York, Harper \& Row",
    note = "talkorigins\_source = {true}; raw\_reference = {Dowben, R. M., 1971, Biología celular: New York, Harper \& Row.}"
}

Se han determinado varias propiedades de los células dendríticas linfoides in situ y se han contrastado con la información previamente establecida para linfocitos y fagocitos mononucleares. Las células dendríticas no se encuentran en ratones recién nacidos, y su concentración tanto en bazo como en ganglio linfático mesentérico no alcanza los niveles adultos hasta las 3–4 semanas de edad. Las células dendríticas desaparecen en gran medida de las poblaciones adherentes tras la administración de esteroides (2,5 mg de acetato de hidrocortisona s.c.) y radiación ionizante (Do de 100 rads para Co60). Las células dendríticas esplénicas pueden originarse a partir de precursores ubicados tanto en la médula ósea como en el bazo mismo, probablemente en la pulpa roja. La población esplénica madura no se divide activamente (índice de marcado por pulso con [3H]timidina de 1,5–2,5%), pero sí tiene un recambio a una tasa sustancial, 10+% del total por día. El influxo de nuevas células parece derivarse de un compartimento de precursores proliferantes, pero el mecanismo de effluxo o recambio no se conoce. Las células dendríticas en bazo y ganglio experimentan poco o un aumento moderado en su número durante el desarrollo de una respuesta inmune primaria. Estas características in vivo, tomadas en conjunto, distinguen aún más a las células dendríticas como un tipo celular novedoso, distinto de los fagocitos mononucleares y los linfocitos.

@article{doi101084jem13961431,
    author = "Steinman, Ralph M. y Lustig, Dinah S. y Cohn, Zanvil A.",
    title = "IDENTIFICATION OF A NOVEL CELL TYPE IN PERIPHERAL LYMPHOID ORGANS OF MICE",
    year = "1974",
    journal = "The Journal of Experimental Medicine",
    abstract = "Se han determinado varias propiedades de los células dendríticas linfoides in situ y se han contrastado con la información previamente establecida para linfocitos y fagocitos mononucleares. Las células dendríticas no se encuentran en ratones recién nacidos, y su concentración tanto en bazo como en ganglio linfático mesentérico no alcanza los niveles adultos hasta las 3–4 semanas de edad. Las células dendríticas desaparecen en gran medida de las poblaciones adherentes tras la administración de esteroides (2,5 mg de acetato de hidrocortisona s.c.) y radiación ionizante (Do de 100 rads para Co60). Las células dendríticas esplénicas pueden originarse a partir de precursores ubicados tanto en la médula ósea como en el bazo mismo, probablemente en la pulpa roja. La población esplénica madura no se divide activamente (índice de marcado por pulso con [3H]timidina de 1,5–2,5\%), pero sí tiene un recambio a una tasa sustancial, 10+\% del total por día. El influxo de nuevas células parece derivarse de un compartimento de precursores proliferantes, pero el mecanismo de effluxo o recambio no se conoce. Las células dendríticas en bazo y ganglio experimentan poco o un aumento moderado en su número durante el desarrollo de una respuesta inmune primaria. Estas características in vivo, tomadas en conjunto, distinguen aún más a las células dendríticas como un tipo celular novedoso, distinto de los fagocitos mononucleares y los linfocitos.",
    url = "https://doi.org/10.1084/jem.139.6.1431",
    doi = "10.1084/jem.139.6.1431",
    openalex = "W3098989474",
    references = "doi101001jama195302940280072039"
}

La capacidad de resorber hueso y cartílago calcificado se restauró permanentemente en ratones con osteopetrosis hereditaria mediante la administración intravenosa de suspensiones celulares preparadas a partir del bazo y la médula ósea de hermanos normales. Comenzando cerca de las placas de crecimiento activas tan pronto como 2 semanas después del trasplante, el reemplazo de la esponjosa anómala continuó hasta que las cavidades medulares se expandieron completamente.

@article{doi101126science1105786,
    author = "Walker, Donald G.",
    title = "Restauración de la resorción ósea en ratones osteopetróticos mediante trasplantes de médula ósea y células de bazo normales",
    year = "1975",
    journal = "Science",
    abstract = "La capacidad de resorber hueso y cartílago calcificado se restauró permanentemente en ratones con osteopetrosis hereditaria mediante la administración intravenosa de suspensiones celulares preparadas a partir del bazo y la médula ósea de hermanos normales. Comenzando cerca de las placas de crecimiento activas tan pronto como 2 semanas después del trasplante, el reemplazo de la esponjosa anómala continuó hasta que las cavidades medulares se expandieron completamente.",
    url = "https://doi.org/10.1126/science.1105786",
    doi = "10.1126/science.1105786",
    openalex = "W2076263545"
}

Las hormonas y los nucleósidos y nucleótidos de purina indujeron a las células óseas cultivadas a transformarse transitoriamente de una forma esférica a una forma estrellada. La citocalasina B también indujo la transformación. El cambio fue bloqueado por la colchicina y la vinblastina, pero no por la lumicolchicina o la cicloheximida. Esta transformación morfológica puede proporcionar un modelo dinámico de la acción hormonal y la modulación de las células óseas in vitro.

@article{doi101126science1273593,
    author = "Miller, Sam S. y Wolf, Alice M. y Arnaud, Claude D.",
    title = "Células óseas en cultivo: Transformación morfológica por hormonas",
    year = "1976",
    journal = "Science",
    abstract = "Las hormonas y los nucleósidos y nucleótidos de purina indujeron a las células óseas cultivadas a transformarse transitoriamente de una forma esférica a una forma estrellada. La citocalasina B también indujo la transformación. El cambio fue bloqueado por la colchicina y la vinblastina, pero no por la lumicolchicina o la cicloheximida. Esta transformación morfológica puede proporcionar un modelo dinámico de la acción hormonal y la modulación de las células óseas in vitro.",
    url = "https://doi.org/10.1126/science.1273593",
    doi = "10.1126/science.1273593",
    openalex = "W2048169623"
}

Se aislaron dos tipos de poblaciones de células óseas metabólicamente distintas de la calvaria de ratón mediante un procedimiento digestivo repetitivo con una mezcla de colagenasa y tripsina. Las células liberadas al principio de la digestión mostraron un aumento aproximado de dos veces en cAMP cuando se trataron con paratormona o calcitonina. Estas poblaciones se denominaron tipo CT. Las células que aparecieron más tarde mostraron aumentos mayores en cAMP inducidos por paratormona, pero no respondieron a la calcitonina. Estas poblaciones se denominaron tipo PT. Se midieron seis actividades metabólicas y enzimáticas en los dos tipos de poblaciones: fosfatasa ácida y alcalina, síntesis de hialuronato, descarboxilación de citrato, prolil hidroxilasa y síntesis general de proteínas. Aunque cada una de estas actividades estaba presente en ambos tipos celulares, los niveles basales de fosfatasa ácida y síntesis de hialuronato fueron más altos en las células CT, mientras que la fosfatasa alcalina, la descarboxilación de citrato y la prolil hidroxilasa fueron más altas en las células PT. La paratormona estimuló la fosfatasa ácida y la síntesis de hialuronato en un 100–200% solo en las células CT; inhibió la fosfatasa alcalina, la descarboxilación de citrato y la prolil hidroxilasa en un 75–90% solo en las células PT. La calcitonina por sí sola no tuvo efecto en ninguna de estas actividades excepto en la producción de cAMP, pero inhibió la acción de la paratormona en las células CT. Las sensibilidades, los cursos temporales de desarrollo y las magnitudes de estos efectos hormonales fueron similares a los observados previamente en calvarias intactas, lo que indica que el sistema de células aisladas es un modelo confiable para el estudio del metabolismo óseo. Basándonos en las respuestas metabólicas de las células, postulamos que el tipo CT de poblaciones está enriquecido en osteoclastos y, posiblemente, en osteocitos, y que el tipo PT de población está enriquecido en osteoblastos. (Endocrinología 99: 526, 1976)

@article{doi101210endo992526,
    author = "LUBEN, RICHARD A. y Wong, Glenda L. y Cohn, David V.",
    title = "Caracterización bioquímica con paratormona y calcitonina de células óseas aisladas: Identificación provisional de osteoclastos y osteoblastos",
    year = "1976",
    journal = "Endocrinología",
    abstract = "Se aislaron dos tipos de poblaciones de células óseas metabólicamente distintas de la calvaria de ratón mediante un procedimiento digestivo repetitivo con una mezcla de colagenasa y tripsina. Las células liberadas al principio de la digestión mostraron un aumento aproximado de dos veces en cAMP cuando se trataron con paratormona o calcitonina. Estas poblaciones se denominaron tipo CT. Las células que aparecieron más tarde mostraron aumentos mayores en cAMP inducidos por paratormona, pero no respondieron a la calcitonina. Estas poblaciones se denominaron tipo PT. Se midieron seis actividades metabólicas y enzimáticas en los dos tipos de poblaciones: fosfatasa ácida y alcalina, síntesis de hialuronato, descarboxilación de citrato, prolil hidroxilasa y síntesis general de proteínas. Aunque cada una de estas actividades estaba presente en ambos tipos celulares, los niveles basales de fosfatasa ácida y síntesis de hialuronato fueron más altos en las células CT, mientras que la fosfatasa alcalina, la descarboxilación de citrato y la prolil hidroxilasa fueron más altas en las células PT. La paratormona estimuló la fosfatasa ácida y la síntesis de hialuronato en un 100–200% solo en las células CT; inhibió la fosfatasa alcalina, la descarboxilación de citrato y la prolil hidroxilasa en un 75–90% solo en las células PT. La calcitonina por sí sola no tuvo efecto en ninguna de estas actividades excepto en la producción de cAMP, pero inhibió la acción de la paratormona en las células CT. Las sensibilidades, los cursos temporales de desarrollo y las magnitudes de estos efectos hormonales fueron similares a los observados previamente en calvarias intactas, lo que indica que el sistema de células aisladas es un modelo confiable para el estudio del metabolismo óseo. Basándonos en las respuestas metabólicas de las células, postulamos que el tipo CT de poblaciones está enriquecido en osteoclastos y, posiblemente, en osteocitos, y que el tipo PT de población está enriquecido en osteoblastos. (Endocrinología 99: 526, 1976)",
    url = "https://doi.org/10.1210/endo-99-2-526",
    doi = "10.1210/endo-99-2-526",
    openalex = "W2050942360"
}

Se describe un sistema de cultivo líquido mediante el cual se puede mantener la proliferación de células madre hemopoyéticas (CFU-S), la producción de células precursoras de granulocitos (CFU-C) y una granulopoyesis extensa en vitro durante varios meses. Tales cultivos consisten en poblaciones de células adherentes y no adherentes. La población adherente contiene células mononucleares fagocíticas, células "epiteliales" y células de "grasa gigante". Estas últimas parecen ser particularmente importantes para el mantenimiento de las células madre y, además, existe una fuerte tendencia de los granulocitos maduros a agruparse selectivamente dentro y alrededor de las áreas de agregación de células de "grasa gigante". Al "alimentar" los cultivos a intervalos semanales, ocurre regularmente entre 10 y 15 "duplicaciones de población" de CFU-S funcionalmente normales. Se pueden obtener "duplicaciones de población" aumentadas alimentando dos veces por semana. Los cultivos muestran inicialmente una granulopoyesis extensa seguida, en la mayoría de los casos, por una acumulación de células blast. Eventualmente, tanto las células blast como los granulocitos disminuyen y los cultivos contienen predominantemente células mononucleares fagocíticas. El cultivo a 33 grados C conduce al desarrollo de un crecimiento más profuso de células adherentes y estos cultivos muestran un mejor mantenimiento de las células madre y una mayor densidad celular. Cuando se probaron por actividad estimulante de colonias (CSA), los cultivos fueron uniformemente negativos. La adición de CSA exógena causó una rápida disminución de las células madre, una reducción de la granulopoyesis y una acumulación de células mononucleares fagocíticas.

@article{doi101002jcp1040910303,
    author = "Dexter, T. M. y Allen, Terence y Lajtha, L. G.",
    title = "Condiciones que controlan la proliferación de células madre hemopoyéticas in vitro",
    year = "1977",
    journal = "Journal of Cellular Physiology",
    abstract = {Se describe un sistema de cultivo líquido mediante el cual se puede mantener la proliferación de células madre hemopoyéticas (CFU-S), la producción de células precursoras de granulocitos (CFU-C) y una granulopoyesis extensa en vitro durante varios meses. Tales cultivos consisten en poblaciones de células adherentes y no adherentes. La población adherente contiene células mononucleares fagocíticas, células "epiteliales" y células de "grasa gigante". Estas últimas parecen ser particularmente importantes para el mantenimiento de las células madre y, además, existe una fuerte tendencia de los granulocitos maduros a agruparse selectivamente dentro y alrededor de las áreas de agregación de células de "grasa gigante". Al "alimentar" los cultivos a intervalos semanales, ocurre regularmente entre 10 y 15 "duplicaciones de población" de CFU-S funcionalmente normales. Se pueden obtener "duplicaciones de población" aumentadas alimentando dos veces por semana. Los cultivos muestran inicialmente una granulopoyesis extensa seguida, en la mayoría de los casos, por una acumulación de células blast. Eventualmente, tanto las células blast como los granulocitos disminuyen y los cultivos contienen predominantemente células mononucleares fagocíticas. El cultivo a 33 grados C conduce al desarrollo de un crecimiento más profuso de células adherentes y estos cultivos muestran un mejor mantenimiento de las células madre y una mayor densidad celular. Cuando se probaron por actividad estimulante de colonias (CSA), los cultivos fueron uniformemente negativos. La adición de CSA exógena causó una rápida disminución de las células madre, una reducción de la granulopoyesis y una acumulación de células mononucleares fagocíticas.},
    url = "https://doi.org/10.1002/jcp.1040910303",
    doi = "10.1002/jcp.1040910303",
    openalex = "W2086793358"
}

@article{doi1010160008874977902635,
    author = "Lachman, Lawrence B. y Hacker, Miles P. y Blyden, Gershwin T. y Handschumacher, Robert E.",
    title = "Preparación del factor activador de linfocitos a partir de líneas celulares de macrófagos murinos continuos",
    year = "1977",
    journal = "Inmunología Celular",
    url = "https://doi.org/10.1016/0008-8749(77)90263-5",
    doi = "10.1016/0008-8749(77)90263-5",
    openalex = "W1984359046"
}

@article{doi1010160092867479903179,
    author = "Taylor, Shirley M. y Jones, Peter A.",
    title = "Múltiples nuevos fenotipos inducidos en células 3T3 tratadas con 5-azacitidina",
    year = "1979",
    journal = "Cell",
    url = "https://doi.org/10.1016/0092-8674(79)90317-9",
    doi = "10.1016/0092-8674(79)90317-9",
    openalex = "W1865658459"
}

@article{doi1010160092867480902378,
    author = "Jones, Peter A. y Taylor, Shirley M.",
    title = "Diferenciación celular, análogos de citidina y metilación del ADN",
    year = "1980",
    journal = "Cell",
    url = "https://doi.org/10.1016/0092-8674(80)90237-8",
    doi = "10.1016/0092-8674(80)90237-8",
    openalex = "W2145750252"
}

El forbol-12-miristato-13-acetato estimula una sublínea de células de timoma EL-4 de ratón para producir, in vitro, en muy alto título, el factor de crecimiento de células T (Interleucina 2, IL 2). La IL 2 derivada de EL-4 tiene el mismo peso molecular (30.000) y heterogeneidad de punto isoeléctrico (pI 3.8-4.4) que la IL 2 producida por células de bazo estimuladas con Con A. Además, la IL 2 derivada de timoma exhibe el mismo espectro de actividades biológicas que se ha reportado para la IL 2 derivada de células de bazo.

@article{doi104049jimmunol12562555,
    author = "Farrar, Jeremy y Fuller-Farrar, J y Simon, P L y Hilfiker, Mary y Stadler, B. M. y Farrar, William L.",
    title = "Producción de timoma del factor de crecimiento de células T (Interleucina 2).",
    year = "1980",
    journal = "The Journal of Immunology",
    abstract = "El forbol-12-miristato-13-acetato estimula una sublínea de células de timoma EL-4 de ratón para producir, in vitro, en muy alto título, el factor de crecimiento de células T (Interleucina 2, IL 2). La IL 2 derivada de EL-4 tiene el mismo peso molecular (30.000) y heterogeneidad de punto isoeléctrico (pI 3.8-4.4) que la IL 2 producida por células de bazo estimuladas con Con A. Además, la IL 2 derivada de timoma exhibe el mismo espectro de actividades biológicas que se ha reportado para la IL 2 derivada de células de bazo.",
    url = "https://doi.org/10.4049/jimmunol.125.6.2555",
    doi = "10.4049/jimmunol.125.6.2555",
    openalex = "W1576863849"
}

La estructura ordenada del borde de avance (lamelipodio) de fibroblastos cultivados se revela fácilmente en células extraídas brevemente en mezclas de Triton X-100-glutaraldehído, fijadas posteriormente con glutaraldehído y luego teñidas negativamente para microscopía electrónica. Mediante este procedimiento, las regiones del borde de avance muestran una red altamente organizada de filamentos de actina en tres dimensiones, junto con un número variable de haces de filamentos de actina radiantes o microspikes. El uso de Faloidina después de la fijación con glutaraldehído resultó en una mejora marginal en el orden de los filamentos. El procesamiento de los citoesqueletos a través de los pasos adicionales generalmente empleados para la microscopía electrónica convencional resultó en una deterioración notable o una interrupción completa del orden de las redes de filamentos de actina. En contraste, los filamentos de actina de los haces de fibras de tensión fueron esencialmente sin afectar. Así, la postfixación en óxido de osmio (1% durante 7 minutos a temperatura ambiente) transformó las redes en un retículo de fibras enroscadas, similares a las producidas por la exposición de F-actina muscular a OsO4 in vitro (P. Maupin-Szamier y T. D. Pollard. 1978. J. Cell Biol. 77:837--852). Si bien la exposición limitada a OsO4 (0.2+ durante 20 minutos a 0 grados C) evitó esta destrucción, la deshidratación en acetona o etanol, con o sin post-osmicación, causó un desorden y agregación adicionales e inevitables de los filamentos de la red. Las regiones de la red del borde de avance mostraron entonces una semejanza striking con las redes descritas hasta ahora en preparaciones secadas en punto crítico de células cultivadas. Concluyo que gran parte de la "red microtrabecular" descrita por Wolosewick y Porter (1979. J. Cell Biol. 82:114--139) en dichas preparaciones constituye redes de actina y arreglos de filamentos de actina, con sus componentes asociados, que han sido distorsionados y agregados por los procedimientos preparativos empleados.

@article{doi101083jcb913695,
    author = "Small, J. Victor",
    title = "Organization of actin in the leading edge of cultured cells: influence of osmium tetroxide and dehydration on the ultrastructure of actin meshworks.",
    year = "1981",
    journal = "The Journal of Cell Biology",
    abstract = {The ordered structure of the leading edge (lamellipodium) of cultured fibroblasts is readily revealed in cells extracted briefly in Triton X-100-glutaraldehyde mixtures, fixed further in glutaraldehyde, and then negatively stained for electron microscopy. By this procedure, the leading edge regions show a highly organised, three-dimensional network of actin filaments together with variable numbers of radiating actin filament bundles or microspikes. The use of Phalloidin after glutaraldehyde fixation resulted in a marginal improvement in filament order. Processing of the cytoskeletons though the additional steps generally employed for conventional electron microscopy resulted in a marked deterioration or complete disruption of the order of the actin filament networks. In contrast, the actin filaments of the stress fiber bundles were essentially unaffected. Thus, postfixation in osmium tetroxide (1\% for 7 min at room temperature) transformed the networks to a reticulum of kinked fibers, resembling those produced by the exposure of muscle F-actin to OsO4 in vitro (P. Maupin-Szamier and T. D. Pollard. 1978. J. Cell Biol. 77:837--852). While limited exposure to OsO4 (0.2+ for 20 min at 0 degrees C) obviated this destruction, dehydration in acetone or ethanol, with or without post-osmication, caused a further and unavoidable disordering and aggregation of the meshwork filaments. The meshwork regions of the leading edge then showed a striking resemblance to the networks hitherto described in critical point-dried preparations of cultured cells. I conclude that much of the "microtrabecular lattice" described by Wolosewick and Porter (1979. J. Cell Biol. 82:114--139) in the latter preparations constitutes actin meshworks and actin filament arrays, with their associated components, that have been distorted and aggregated by the preparative procedures employed.},
    url = "https://doi.org/10.1083/jcb.91.3.695",
    doi = "10.1083/jcb.91.3.695",
    openalex = "W2153062931"
}

Desarrollamos un método para la producción de híbridos de células T específicos de antígeno y restringidos por H-2. El compañero de célula tumoral en las fusiones era en sí mismo un híbrido de células T, FS6-14.13.AG2 (o sus derivados), que podía inducirse a producir el factor de crecimiento, interleucina-2 (IL-2), en respuesta a un desafío con canavalina A, pero no tenía ninguna especificidad de antígeno conocida. El compañero de célula T normal en las fusiones era una población de blastos de células T de ganglios linfáticos que habían sido altamente enriquecidos en células T específicas de antígeno y restringidas por H-2 mediante inmunización in vivo, seguida de desafío in vitro con antígeno y expansión clonal en medio que contenía IL-2. Estas fusiones produjeron híbridos que crecieron constitutivamente en cultivo. Una proporción considerable de los híbridos demostró la capacidad de producir IL-2 en respuesta a un desafío con antígeno específico presentado por células de bazo irradiadas del tipo H-2 apropiado. Se produjeron cuatro líneas de híbridos clonados específicos de antígeno/H-2. AO-40.10 respondió a la ovalbúmina de pollo (OVA) cuando fue presentada por células portadoras de I-A(k). DC1.18.3 respondió a la forma apo de la citocromo c de res cuando fue presentada con I-A(d). AODK-10.4 respondió a la hemocianina de caracol perforador (KLH) presentada con I-A (d). AODK-1.16 también respondió a KLH presentada por un producto de la región I de H-2(d), pero los datos eran consistentes con un producto de la región I-J-I-E(d) o una molécula combinacional con elementos tanto de I-A(d) como de I-E(d)/I-C(d). Coincidentemente, se demostró que AO-40.10 tenía una alorreactividad inesperada con un producto de H-2(b) que mapea a la región K-I-A. Estos híbridos deberían resultar invaluables como fuentes de material monoclonal para el estudio de los receptores en células T con especificidades de antígeno restringidas por H-2. También generamos híbridos de células T con dos especificidades de antígeno/H-2 mediante la fusión de un clon resistente a azaguanina de AO-40.10 con células T normales con una diferente especificidad de antígeno/H-2. Muchos de los híbridos conservaron la reactividad a OVA más H-2(a) y a la segunda combinación de antígeno/H-2. Ninguno reaccionó a OVA más el segundo tipo H-2 o al segundo antígeno más H-2(a). Uno de estos híbridos fue exitosamente clonado para producir la línea AOFK- 11.11.1. Conservó la capacidad de reconocer OVA más I-A(k) heredada de un progenitor, y KLH más IA(f) heredada del otro. No reconoció OVA más IA(f) ni KLH más I-A(k). Estos resultados tienen alguna implicación para los modelos que describen la naturaleza de los receptores de células T para antígenos reconocidos en asociación con productos H-2. No apoyan los modelos en los que el antígeno y H-2 son reconocidos por separado por dos receptores de células T independientes.

@article{doi101084jem15351198,
    author = "Kappler, JW and Skidmore, Barry J. and White, John H. and Marrack, Philippa",
    title = "Híbridos de células T productores de interleucina-2 inducibles por antígeno y restringidos por H-2. Falta de reconocimiento independiente de antígeno y H-2",
    year = "1981",
    journal = "The Journal of Experimental Medicine",
    abstract = "Desarrollamos un método para la producción de híbridos de células T específicos de antígeno y restringidos por H-2. El compañero de célula tumoral en las fusiones era en sí mismo un híbrido de células T, FS6-14.13.AG2 (o sus derivados), que podía inducirse a producir el factor de crecimiento, interleucina-2 (IL-2), en respuesta a un desafío con canavalina A, pero no tenía ninguna especificidad de antígeno conocida. El compañero de célula T normal en las fusiones era una población de blastos de células T de ganglios linfáticos que habían sido altamente enriquecidos en células T específicas de antígeno y restringidas por H-2 mediante inmunización in vivo, seguida de desafío in vitro con antígeno y expansión clonal en medio que contenía IL-2. Estas fusiones produjeron híbridos que crecieron constitutivamente en cultivo. Una proporción considerable de los híbridos demostró la capacidad de producir IL-2 en respuesta a un desafío con antígeno específico presentado por células de bazo irradiadas del tipo H-2 apropiado. Se produjeron cuatro líneas de híbridos clonados específicos de antígeno/H-2. AO-40.10 respondió a la ovalbúmina de pollo (OVA) cuando fue presentada por células portadoras de I-A(k). DC1.18.3 respondió a la forma apo de la citocromo c de res cuando fue presentada con I-A(d). AODK-10.4 respondió a la hemocianina de caracol perforador (KLH) presentada con I-A (d). AODK-1.16 también respondió a KLH presentada por un producto de la región I de H-2(d), pero los datos eran consistentes con un producto de la región I-J-I-E(d) o una molécula combinacional con elementos tanto de I-A(d) como de I-E(d)/I-C(d). Coincidentemente, se demostró que AO-40.10 tenía una alorreactividad inesperada con un producto de H-2(b) que mapea a la región K-I-A. Estos híbridos deberían resultar invaluables como fuentes de material monoclonal para el estudio de los receptores en células T con especificidades de antígeno restringidas por H-2. También generamos híbridos de células T con dos especificidades de antígeno/H-2 mediante la fusión de un clon resistente a azaguanina de AO-40.10 con células T normales con una diferente especificidad de antígeno/H-2. Muchos de los híbridos conservaron la reactividad a OVA más H-2(a) y a la segunda combinación de antígeno/H-2. Ninguno reaccionó a OVA más el segundo tipo H-2 o al segundo antígeno más H-2(a). Uno de estos híbridos fue exitosamente clonado para producir la línea AOFK- 11.11.1. Conservó la capacidad de reconocer OVA más I-A(k) heredada de un progenitor, y KLH más IA(f) heredada del otro. No reconoció OVA más IA(f) ni KLH más I-A(k). Estos resultados tienen alguna implicación para los modelos que describen la naturaleza de los receptores de células T para antígenos reconocidos en asociación con productos H-2. No apoyan los modelos en los que el antígeno y H-2 son reconocidos por separado por dos receptores de células T independientes.",
    url = "https://doi.org/10.1084/jem.153.5.1198",
    doi = "10.1084/jem.153.5.1198",
    openalex = "W2140985128"
}

Se utilizó el método de trasplante de tejido embrionario para confirmar el doble origen de los ganglios sensoriales craneales de aves, para mapear las ubicaciones precisas de los anlagen de estos neuronas sensoriales y para identificar neuronas derivadas de la placoda y de la cresta neural dentro de los ganglios. Se excisaron segmentos de cresta neural o tiras de ectodermo presumiblemente placodal de embriones de pollo y se reemplazaron con tejidos homólogos de embriones de codorniz, cuyas células contienen un marcador de heterocromatina. Las neuronas derivadas de la placoda asociadas con los nervios craneales V, VII, IX y X se encuentran distales a las neuronas derivadas de la cresta. Las neuronas placodales embrionarias, generalmente más grandes, se encuentran en las porciones distales de ambos lóbulos del ganglio trigémino y en los ganglios geniculado, petroso y nodoso. Las neuronas derivadas de la cresta se encuentran en el ganglio trigémino proximal y en el ganglio proximal combinado de los nervios craneales IX y X. Las neuronas en los ganglios vestibular y acústico del nervio craneal VIII derivan de ectodermo placodal, con la excepción de algunas neuronas derivadas de la cresta neural localizadas en regiones dentro del ganglio vestibular. Las células de vaina de Schwann y las células satélite asociadas a todos estos ganglios se originan a partir de la cresta neural. Los anlagen ganglionares están dispuestos en secuencia craneocaudal desde el nivel del mesencéfalo hasta el tercer somito. El ectodermo presumiblemente placodal para los ganglios VIII, V, VII, IX y X se encuentra en una disposición medial a lateral durante las etapas tempranas del desarrollo, reflejando respectivamente las posiciones dorsolateral, intermedia y epibrancial de estas placodas neurogénicas.

@article{doi101002aja1001660406,
    author = "D'amico‐Martel, Adele y Noden, Drew M.",
    title = "Contribuciones de las células placodales y de la cresta neural a los ganglios periféricos craneales de aves",
    year = "1983",
    journal = "American Journal of Anatomy",
    abstract = "Se utilizó el método de trasplante de tejido embrionario para confirmar el doble origen de los ganglios sensoriales craneales de aves, para mapear las ubicaciones precisas de los anlagen de estas neuronas sensoriales y para identificar neuronas derivadas de la placoda y de la cresta neural dentro de los ganglios. Se excisaron segmentos de cresta neural o tiras de ectodermo presumiblemente placodal de embriones de pollo y se reemplazaron con tejidos homólogos de embriones de codorniz, cuyas células contienen un marcador de heterocromatina. Las neuronas derivadas de la placoda asociadas con los nervios craneales V, VII, IX y X se encuentran distales a las neuronas derivadas de la cresta. Las neuronas placodales embrionarias, generalmente más grandes, se encuentran en las porciones distales de ambos lóbulos del ganglio trigémino y en los ganglios geniculado, petroso y nodoso. Las neuronas derivadas de la cresta se encuentran en el ganglio trigémino proximal y en el ganglio proximal combinado de los nervios craneales IX y X. Las neuronas en los ganglios vestibular y acústico del nervio craneal VIII derivan de ectodermo placodal, con la excepción de algunas neuronas derivadas de la cresta neural localizadas en regiones dentro del ganglio vestibular. Las células de vaina de Schwann y las células satélite asociadas a todos estos ganglios se originan a partir de la cresta neural. Los anlagen ganglionares están dispuestos en secuencia craneocaudal desde el nivel del mesencéfalo hasta el tercer somito. El ectodermo presumiblemente placodal para los ganglios VIII, V, VII, IX y X se encuentra en una disposición medial a lateral durante las etapas tempranas del desarrollo, reflejando respectivamente las posiciones dorsolateral, intermedia y epibrancial de estas placodas neurogénicas.",
    url = "https://doi.org/10.1002/aja.1001660406",
    doi = "10.1002/aja.1001660406",
    openalex = "W2145454156",
    references = "doi101002cne920200404, doi1010160002941683903329, doi1010970000505319361200000041"
}

La proteína morfogenética ósea y los factores de crecimiento derivados del hueso son herramientas bioquímicas para la investigación sobre la diferenciación celular inducida y los mecanismos locales que controlan la proliferación celular. La proteína morfogenética ósea induce irreversiblemente la diferenciación de células de tipo mesenquimal perivascular en células osteoprogenitoras. Los factores de crecimiento derivados del hueso son secretados por y para las células osteoprogenitoras y estimulan la síntesis de ADN. La generación y regeneración ósea se atribuyen a la co-eficiencia de la proteína morfogenética ósea y los factores de crecimiento derivados del hueso.

@article{doi101126science6403986,
    author = "Urist, Marshall R. y DeLange, Robert J. y Finerman, Gerald A. M.",
    title = "Diferenciación de células óseas y factores de crecimiento",
    year = "1983",
    journal = "Science",
    abstract = "La proteína morfogenética ósea y los factores de crecimiento derivados del hueso son herramientas bioquímicas para la investigación sobre la diferenciación celular inducida y los mecanismos locales que controlan la proliferación celular. La proteína morfogenética ósea induce irreversiblemente la diferenciación de células de tipo mesenquimal perivascular en células osteoprogenitoras. Los factores de crecimiento derivados del hueso son secretados por y para las células osteoprogenitoras y estimulan la síntesis de ADN. La generación y regeneración ósea se atribuyen a la co-eficiencia de la proteína morfogenética ósea y los factores de crecimiento derivados del hueso.",
    url = "https://doi.org/10.1126/science.6403986",
    doi = "10.1126/science.6403986",
    openalex = "W2005097199",
    references = "doi1010160002941683903329, doi1010160092867479903179, doi1010160092867480902378, doi1010160092867481900374, doi101038225420a0, doi101056nejm198010093031511, doi101073pnas72103925, doi101073pnas7351447, doi101073pnas78127599, doi1010970000308619670700000026, doi101126science1503698893"
}

@article{doi101007bf02406132,
    author = "Parfitt, A. M.",
    title = "La base celular de la remodelación ósea: El concepto cuántico reexaminado a la luz de los avances recientes en la biología celular del hueso",
    year = "1984",
    journal = "Calcified Tissue International",
    url = "https://doi.org/10.1007/bf02406132",
    doi = "10.1007/bf02406132",
    openalex = "W2114157286",
    references = "doi101007bf02406145, doi101007bf02409454, doi1010160002941683903329, doi1010160021929082902469, doi1010160221874782900029, doi101056nejm198307073090107, doi101126science6403986, doi101172jci111096, doi107326000348199522482, openalexw1585377912"
}

Resumen La mayor parte de nuestro conocimiento actual sobre la ultraestructura celular se deriva de estudios de preparaciones fijadas químicamente y crioprotegidas químicamente. En la primera parte de esta revisión, documentamos los muchos artefactos asociados con las técnicas químicas que las hacen inadecuadas para una mayor refinación de nuestra comprensión de la ultraestructura celular. El mejor método actualmente disponible para la preservación de la ultraestructura celular es el congelamiento ultrarrápido. La segunda parte de esta revisión es una consideración de la física de la formación de cristales de hielo en sistemas biológicos, lo que sugiere que los cristales de hielo estarán presentes en cualquier espécimen congelado no crioprotegido. Definimos una preparación congelada ultrarrápidamente como aquella en la que los cristales de hielo son tan pequeños que son invisibles a nivel microscópico electrónico. Las mejoras en la facilidad de aplicación y la fiabilidad de las técnicas de congelamiento ultrarrápido han llegado al punto en que estas técnicas pueden ser utilizadas por cualquiera que requiera la mejor preservación lográble de la ultraestructura celular. En la tercera parte de esta revisión, describimos y criticamos los cinco métodos de congelamiento ultrarrápido en uso actual.

@article{doi101002jemt1060030206,
    author = "Gilkey, John C. y Staehelin, L. Andrew",
    title = "Avances en el congelamiento ultrarrápido para la preservación de la ultraestructura celular",
    year = "1986",
    journal = "Journal of Electron Microscopy Technique",
    abstract = "Resumen La mayor parte de nuestro conocimiento actual sobre la ultraestructura celular se deriva de estudios de preparaciones fijadas químicamente y crioprotegidas químicamente. En la primera parte de esta revisión, documentamos los muchos artefactos asociados con las técnicas químicas que las hacen inadecuadas para una mayor refinación de nuestra comprensión de la ultraestructura celular. El mejor método actualmente disponible para la preservación de la ultraestructura celular es el congelamiento ultrarrápido. La segunda parte de esta revisión es una consideración de la física de la formación de cristales de hielo en sistemas biológicos, lo que sugiere que los cristales de hielo estarán presentes en cualquier espécimen congelado no crioprotegido. Definimos una preparación congelada ultrarrápidamente como aquella en la que los cristales de hielo son tan pequeños que son invisibles a nivel microscópico electrónico. Las mejoras en la facilidad de aplicación y la fiabilidad de las técnicas de congelamiento ultrarrápido han llegado al punto en que estas técnicas pueden ser utilizadas por cualquiera que requiera la mejor preservación lográble de la ultraestructura celular. En la tercera parte de esta revisión, describimos y criticamos los cinco métodos de congelamiento ultrarrápido en uso actual.",
    url = "https://doi.org/10.1002/jemt.1060030206",
    doi = "10.1002/jemt.1060030206",
    openalex = "W2105773551",
    references = "doi101083jcb173609"
}

Aunque se ha prestado mucha atención a la eliminación de hormonas de los sueros y al desarrollo de medios libres de suero para estudios sobre células sensibles a hormonas en cultivo, se ha prestado poca consideración a la posibilidad de que los componentes del medio en sí mismos puedan tener actividad hormonal. Hemos encontrado que el rojo fenólico, que presenta una similitud estructural con algunos estrógenos no esteroideos y que se utiliza universalmente como indicador de pH en los medios de cultivo tisular, tiene una significativa actividad estrogénica a las concentraciones (15-45 microM) en las que se encuentra en los medios de cultivo tisular. El rojo fenólico se une al receptor de estrógeno de las células de cáncer de mama humano MCF-7 con una afinidad 0,001% que la del estradiol (Kd = 2 X 10(-5) M). Estimula la proliferación de células de cáncer de mama MCF-7 positivas para el receptor de estrógeno de manera dependiente de la dosis, pero no tiene efecto sobre el crecimiento de células de cáncer de mama MDA-MB-231 negativas para el receptor de estrógeno. A las concentraciones presentes en los medios de cultivo tisular, el rojo fenólico causa una estimulación estrogénica parcial, aumentando el número de células al 200% y el contenido de receptores de progesterona al 300% de lo encontrado para células cultivadas en medios libres de rojo fenólico, reduciendo así el grado en que el estrógeno exógeno es capaz de estimular respuestas. Los antiestrogénicos tamoxifeno e hidroxitamoxifeno inhiben la proliferación celular por debajo del nivel de control solo cuando las células se cultivan en presencia de rojo fenólico; en ausencia de rojo fenólico, los antiestrogénicos no suprimen el crecimiento. La actividad estrogénica del rojo fenólico debe ser considerada en cualquier estudio que utilice células sensibles a estrógenos en cultivo.

@article{doi101073pnas8382496,
    author = "Berthois, Yolande y Katzenellenbogen, John A. y Katzenellenbogen, Benita S.",
    title = "El rojo fenólico en los medios de cultivo tisular es un estrógeno débil: implicaciones concernientes al estudio de células sensibles a estrógenos en cultivo.",
    year = "1986",
    journal = "Proceedings of the National Academy of Sciences",
    abstract = "Aunque se ha prestado mucha atención a la eliminación de hormonas de los sueros y al desarrollo de medios libres de suero para estudios sobre células sensibles a hormonas en cultivo, se ha prestado poca consideración a la posibilidad de que los componentes del medio en sí mismos puedan tener actividad hormonal. Hemos encontrado que el rojo fenólico, que presenta una similitud estructural con algunos estrógenos no esteroideos y que se utiliza universalmente como indicador de pH en los medios de cultivo tisular, tiene una significativa actividad estrogénica a las concentraciones (15-45 microM) en las que se encuentra en los medios de cultivo tisular. El rojo fenólico se une al receptor de estrógeno de las células de cáncer de mama humano MCF-7 con una afinidad 0,001% que la del estradiol (Kd = 2 X 10(-5) M). Estimula la proliferación de células de cáncer de mama MCF-7 positivas para el receptor de estrógeno de manera dependiente de la dosis, pero no tiene efecto sobre el crecimiento de células de cáncer de mama MDA-MB-231 negativas para el receptor de estrógeno. A las concentraciones presentes en los medios de cultivo tisular, el rojo fenólico causa una estimulación estrogénica parcial, aumentando el número de células al 200% y el contenido de receptores de progesterona al 300% de lo encontrado para células cultivadas en medios libres de rojo fenólico, reduciendo así el grado en que el estrógeno exógeno es capaz de estimular respuestas. Los antiestrogénicos tamoxifeno e hidroxitamoxifeno inhiben la proliferación celular por debajo del nivel de control solo cuando las células se cultivan en presencia de rojo fenólico; en ausencia de rojo fenólico, los antiestrogénicos no suprimen el crecimiento. La actividad estrogénica del rojo fenólico debe ser considerada en cualquier estudio que utilice células sensibles a estrógenos en cultivo.",
    url = "https://doi.org/10.1073/pnas.83.8.2496",
    doi = "10.1073/pnas.83.8.2496",
    openalex = "W2059153388"
}

@incollection{holahan1987cellular,
    author = "HOLAHAN, EUGENE V.",
    title = "Biología de la radiación celular",
    year = "1987",
    booktitle = "Radiobiología militar",
    url = "https://doi.org/10.1016/b978-0-12-184050-1.50007-8",
    doi = "10.1016/b978-0-12-184050-1.50007-8",
    pages = "87-110"
}

Las células óseas componen una población de células de origen heterogéneo pero con función restringida en cuanto a la formación de matriz, mineralización y reabsorción. El origen local y mesenquimal de las células que forman el esqueleto contrasta con sus parientes extrasequelares y hemopoyéticos bajo los cuales tiene lugar la reabsorción ósea. Sin embargo, las funciones de estas dos poblaciones diversas están notablemente relacionadas e interdependientes. La regulación de las células óseas, actualmente en sus etapas iniciales, es una cascada complicada que involucra una gran variedad de factores locales y sistémicos, incluidos algunos componentes de las matrices esqueléticas y otros sistemas orgánicos. Por lo tanto, cualquier comprensión de la regulación de las células óseas es un ingrediente clave para comprender no solo el desarrollo, mantenimiento y reparación del esqueleto, sino también la prevención y tratamiento de los trastornos esqueléticos.

@article{doi101002aja1001830102,
    author = "Marks, Sandy C. y Popoff, Steven N.",
    title = "Biología de las células óseas: La regulación del desarrollo, estructura y función en el esqueleto",
    year = "1988",
    journal = "American Journal of Anatomy",
    abstract = "Las células óseas componen una población de células de origen heterogéneo pero con función restringida en cuanto a la formación de matriz, mineralización y reabsorción. El origen local y mesenquimal de las células que forman el esqueleto contrasta con sus parientes extrasequelares y hemopoyéticos bajo los cuales tiene lugar la reabsorción ósea. Sin embargo, las funciones de estas dos poblaciones diversas están notablemente relacionadas e interdependientes. La regulación de las células óseas, actualmente en sus etapas iniciales, es una cascada complicada que involucra una gran variedad de factores locales y sistémicos, incluidos algunos componentes de las matrices esqueléticas y otros sistemas orgánicos. Por lo tanto, cualquier comprensión de la regulación de las células óseas es un ingrediente clave para comprender no solo el desarrollo, mantenimiento y reparación del esqueleto, sino también la prevención y tratamiento de los trastornos esqueléticos.",
    url = "https://doi.org/10.1002/aja.1001830102",
    doi = "10.1002/aja.1001830102",
    openalex = "W2162552372",
    references = "doi1010160002941683903329"
}

@article{doi101007bf00225804,
    author = "Maniatopoulos, C. y Sodek, Jaro y Melcher, A. H.",
    title = "Formación ósea in vitro por células estromales obtenidas de la médula ósea de ratas adultas jóvenes",
    year = "1988",
    journal = "Cell and Tissue Research",
    url = "https://doi.org/10.1007/bf00225804",
    doi = "10.1007/bf00225804",
    openalex = "W1986276800",
    references = "doi101001jama195302940280072039"
}

Se utilizó estradiol de alta actividad específica marcado con yodo-125 para detectar aproximadamente 200 sitios de unión nuclear saturables de alta afinidad (constante de disociación ≅ 1.0 n M) en células osteosarcoma osteoblastoide clonales de rata (ROS 17/2.8) y humano (HOS TE85). De los esteroides probados, solo la testosterona mostró reactividad cruzada significativa con la unión de estrógeno. El análisis de blot de ARN con una sonda de ADN complementario al receptor de estrógeno humano reveló transcritos de receptor putativos de 6 a 6.2 kilobases tanto en células osteosarcoma de rata como humanas. Los niveles de ARNm de procólágeno tipo I y factor de crecimiento transformante-β se incrementaron en células osteoblastoide humanas cultivadas tratadas con 1 n M de estradiol. Por lo tanto, el estrógeno puede actuar directamente sobre los osteoblastos mediante un mecanismo mediado por receptor y, en consecuencia, modular la matriz extracelular y otras proteínas involucradas en el mantenimiento de la mineralización y remodelación ósea.

@article{doi101126science3164526,
    author = "Komm, Barry S. y Terpening, Christopher y Benz, D. y Graeme, Kimberlie A. y Gallegos, Alfred y Korc, Murray y Greene, Geoffrey L. y O’Malley, Bert W. y Haussler, Mark R.",
    title = "Unión de estrógeno, ARNm de receptor y respuesta biológica en células osteosarcoma osteoblastoide",
    year = "1988",
    journal = "Science",
    abstract = "Se utilizó estradiol de alta actividad específica marcado con yodo-125 para detectar aproximadamente 200 sitios de unión nuclear saturables de alta afinidad (constante de disociación ≅ 1.0 n M) en células osteosarcoma osteoblastoide clonales de rata (ROS 17/2.8) y humano (HOS TE85). De los esteroides probados, solo la testosterona mostró reactividad cruzada significativa con la unión de estrógeno. El análisis de blot de ARN con una sonda de ADN complementario al receptor de estrógeno humano reveló transcritos de receptor putativos de 6 a 6.2 kilobases tanto en células osteosarcoma de rata como humanas. Los niveles de ARNm de procólágeno tipo I y factor de crecimiento transformante-β se incrementaron en células osteoblastoide humanas cultivadas tratadas con 1 n M de estradiol. Por lo tanto, el estrógeno puede actuar directamente sobre los osteoblastos mediante un mecanismo mediado por receptor y, en consecuencia, modular la matriz extracelular y otras proteínas involucradas en el mantenimiento de la mineralización y remodelación ósea.",
    url = "https://doi.org/10.1126/science.3164526",
    doi = "10.1126/science.3164526",
    openalex = "W2140086733",
    references = "doi101007bf02406132, doi101016s0021925818482580, doi101016s0021925819435370, doi101038316701a0, doi101073pnas8382496, doi101126science1824108126, doi101126science3029866, doi101126science3388021, doi101126science3753802, doi101126science6403986"
}

En siete cepas de células osteoblastoide normales humanas cultivadas, se pudo unir un promedio de 1615 moléculas de 17 beta-estradiol marcado con tritio por núcleo celular a sitios nucleares específicos. La unión nuclear del esteroide marcado dependía de la temperatura, era específica del esteroide, saturable y específica del tipo celular. Estas son características de receptores de estrógeno biológicamente activos. El pretratamiento con 10 nanomolares de estradiol in vitro aumentó la unión nuclear específica de progesterona en cuatro de seis cepas celulares, indicando una inducción de receptores funcionales de progesterona. El análisis de blot de ARN demostró la presencia de ARN mensajero para el receptor de estrógeno humano. Los datos sugieren que el estrógeno actúa directamente sobre las células óseas humanas a través de un mecanismo mediado por receptores de estrógeno clásico.

@article{doi101126science3388021,
    author = "Eriksen, Erik Fink y Colvard, Douglas S. y Berg, Nicholas J. y Graham, Mark L. y Mann, Kenneth G. y Spelsberg, Thomas C. y Riggs, B. Lawrence",
    title = "Evidencia de receptores de estrógeno en células osteoblastoide normales humanas",
    year = "1988",
    journal = "Science",
    abstract = "En siete cepas de células osteoblastoide normales humanas cultivadas, se pudo unir un promedio de 1615 moléculas de 17 beta-estradiol marcado con tritio por núcleo celular a sitios nucleares específicos. La unión nuclear del esteroide marcado dependía de la temperatura, era específica del esteroide, saturable y específica del tipo celular. Estas son características de receptores de estrógeno biológicamente activos. El pretratamiento con 10 nanomolares de estradiol in vitro aumentó la unión nuclear específica de progesterona en cuatro de seis cepas celulares, indicando una inducción de receptores funcionales de progesterona. El análisis de blot de ARN demostró la presencia de ARN mensajero para el receptor de estrógeno humano. Los datos sugieren que el estrógeno actúa directamente sobre las células óseas humanas a través de un mecanismo mediado por receptores de estrógeno clásico.",
    url = "https://doi.org/10.1126/science.3388021",
    doi = "10.1126/science.3388021",
    openalex = "W2062729355"
}

Se revisa la evidencia que respalda la hipótesis de que existen células madre estromales presentes en los tejidos conectivos blandos asociados con la médula ósea y las superficies óseas, capaces de dar origen a varias líneas celulares diferentes. Estas líneas se designan actualmente como fibroblásticas, reticulares, adipocíticas y osteogénicas. Las colonias fibroblásticas, cada una derivada de una unidad formadora de colonias fibroblástica única (CFU-F), se forman cuando las células de la médula ósea se cultivan in vitro. Los ensayos in vivo de tejidos formados por CFU-F en trasplantes abiertos o en cámaras de difusión han demostrado que algunas CFU-F tienen una alta capacidad de renovación y pluripotencialidad, mientras que otras tienen un potencial más limitado. Las investigaciones preliminares in vitro también apoyan la hipótesis y han mostrado que las CFU-F son una población heterogénea de células madre y progenitoras, y que su diferenciación in vitro puede modificarse a nivel de colonia. Las células estromales que sobreviven y proliferan in vitro dependen altamente de las condiciones de cultivo. El número y la jerarquía de las líneas celulares que pertenecen al sistema fibroblástico estromal aún no se han elucidado completamente, y se requieren marcadores más específicos y mejores ensayos para los diferentes fenotipos antes de poder lograr una mayor comprensión. Se propone la posibilidad de que el sistema estromal de la médula ósea sea parte de un sistema estromal más amplio del cuerpo.

@article{doi101242jcs1988supplement105,
    author = "Owen, Maureen",
    title = "Células madre estromales de la médula ósea",
    year = "1988",
    journal = "Journal of Cell Science",
    abstract = "Se revisa la evidencia que respalda la hipótesis de que existen células madre estromales presentes en los tejidos conectivos blandos asociados con la médula ósea y las superficies óseas, capaces de dar origen a varias líneas celulares diferentes. Estas líneas se designan actualmente como fibroblásticas, reticulares, adipocíticas y osteogénicas. Las colonias fibroblásticas, cada una derivada de una unidad formadora de colonias fibroblástica única (CFU-F), se forman cuando las células de la médula ósea se cultivan in vitro. Los ensayos in vivo de tejidos formados por CFU-F en trasplantes abiertos o en cámaras de difusión han demostrado que algunas CFU-F tienen una alta capacidad de renovación y pluripotencialidad, mientras que otras tienen un potencial más limitado. Las investigaciones preliminares in vitro también apoyan la hipótesis y han mostrado que las CFU-F son una población heterogénea de células madre y progenitoras, y que su diferenciación in vitro puede modificarse a nivel de colonia. Las células estromales que sobreviven y proliferan in vitro dependen altamente de las condiciones de cultivo. El número y la jerarquía de las líneas celulares que pertenecen al sistema fibroblástico estromal aún no se han elucidado completamente, y se requieren marcadores más específicos y mejores ensayos para los diferentes fenotipos antes de poder lograr una mayor comprensión. Se propone la posibilidad de que el sistema estromal de la médula ósea sea parte de un sistema estromal más amplio del cuerpo.",
    url = "https://doi.org/10.1242/jcs.1988.supplement_10.5",
    doi = "10.1242/jcs.1988.supplement_10.5",
    openalex = "W2019480285",
    references = "doi101126science6403986"
}

En los últimos 30 años, las estrategias para el descubrimiento y desarrollo preclínico de agentes antitumorales potenciales se han basado en gran medida en la prueba de agentes en ratones portadores de leucemias y tumores sólidos transplantables derivados de un número limitado de fuentes murinas y humanas. Se está investigando la viabilidad de implementar un enfoque alternativo, a saber, el cribado combinado in vitro/in vivo para la citotoxicidad selectiva entre paneles de líneas celulares de tumores humanos derivados de un amplio espectro de tumores sólidos humanos. Un grupo de 30 líneas celulares adquiridas de diversas fuentes y que representan 8 patologías de cáncer de pulmón, así como 76 líneas celulares que representan 10 otras categorías de cáncer humano (carcinomas de colon, mama, riñón, próstata, ovario, cabeza y cuello; glioma; leucemia; melanoma; y sarcoma), han exhibido características de crecimiento aceptables y perfiles colorimétricos adecuados en un medio de cultivo único y estándar. Las mediciones del crecimiento in vitro en pocillos de microcultura mediante la reducción de tetrazolio mediada por células mostraron una excelente correlación (0,89 < r2 < 0,98) con las mediciones de proteína celular en cultivos de líneas celulares adherentes, así como con el recuento de células viables en cultivos de líneas celulares en suspensión (0,94 < r2 < 0,99). Dado que el ensayo de tetrazolio de microcultura proporciona índices sensibles y reproducibles del crecimiento y la sensibilidad a los fármacos en líneas celulares individuales a lo largo de múltiples pasajes y varios meses de cultivo, parece adecuado para el cribado inicial de fármacos in vitro.

@article{openalexw2120064876,
    author = "Alley, Michael C. and Scudiero, Dominic A. and Monks, Anne and Hursey, Miriam L. and Czerwiński, Maciej and Fine, Donald L. and Abbott, Betty J. and Mayo, Joseph G. and Shoemaker, Robert H. and Boyd, Michael R.",
    title = "Feasibility of drug screening with panels of human tumor cell lines using a microculture tetrazolium assay.",
    year = "1988",
    journal = "PubMed",
    abstract = "En los últimos 30 años, las estrategias para el descubrimiento y desarrollo preclínico de agentes antitumorales potenciales se han basado en gran medida en la prueba de agentes en ratones portadores de leucemias y tumores sólidos transplantables derivados de un número limitado de fuentes murinas y humanas. Se está investigando la viabilidad de implementar un enfoque alternativo, a saber, el cribado combinado in vitro/in vivo para la citotoxicidad selectiva entre paneles de líneas celulares de tumores humanos derivados de un amplio espectro de tumores sólidos humanos. Un grupo de 30 líneas celulares adquiridas de diversas fuentes y que representan 8 patologías de cáncer de pulmón, así como 76 líneas celulares que representan 10 otras categorías de cáncer humano (carcinomas de colon, mama, riñón, próstata, ovario, cabeza y cuello; glioma; leucemia; melanoma; y sarcoma), han exhibido características de crecimiento aceptables y perfiles colorimétricos adecuados en un medio de cultivo único y estándar. Las mediciones del crecimiento in vitro en pocillos de microcultura mediante la reducción de tetrazolio mediada por células mostraron una excelente correlación (0,89 < r2 < 0,98) con las mediciones de proteína celular en cultivos de líneas celulares adherentes, así como con el recuento de células viables en cultivos de líneas celulares en suspensión (0,94 < r2 < 0,99). Dado que el ensayo de tetrazolio de microcultura proporciona índices sensibles y reproducibles del crecimiento y la sensibilidad a los fármacos en líneas celulares individuales a lo largo de múltiples pasajes y varios meses de cultivo, parece adecuado para el cribado inicial de fármacos in vitro.",
    openalex = "W2120064876"
}

Anteriormente hemos descrito la aplicación de un ensayo automatizado de tetrazolio en microcultura (MTA) que implica la solubilización con dimetilsulfóxido del 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio bromuro (MTT)-formazan generado por células, para la evaluación in vitro de los efectos de los fármacos sobre el crecimiento celular (M.C. Alley et al., Proc. Am. Assoc. Cancer Res., 27:389, 1986; M.C. Alley et al., Cancer Res. 48:589-601, 1988). Existen varias desventajas inherentes a este ensayo, incluyendo el peligro de seguridad por la exposición del personal a grandes cantidades de dimetilsulfóxido, los efectos nocivos de este disolvente sobre el equipo de laboratorio y el metabolismo ineficiente del MTT por algunas líneas celulares humanas. El reconocimiento de estas limitaciones motivó el desarrollo de posibles MTA alternativos que utilicen un reactivo de tetrazolio diferente, 2,3-bis(2-metoxi-4-nitro-5-sulfofenil)-5-[(fenilamino)carbonyl]-2H-tetrazolio hidróxido (XTT), que se reduce metabólicamente en células viables a un producto de formazan soluble en agua. Este reactivo permite lecturas directas de absorbancia, eliminando así un paso de solubilización y acortando el procedimiento del ensayo de crecimiento en microcultura. La mayoría de las líneas celulares tumorales humanas examinadas metabolizaron el XTT con menor eficiencia que el MTT; sin embargo, la adición de metilsulfato de fenazina (PMS) mejoró notablemente la reducción celular del XTT. En presencia de PMS, el reactivo XTT proporcionó valores de absorbancia utilizables para evaluaciones de crecimiento y sensibilidad a fármacos con una variedad de líneas celulares. Dependiendo de la capacidad reductora metabólica de una línea celular dada, las condiciones óptimas para un ensayo de incubación de XTT de 4 horas fueron 50 microgramos de XTT y 0,15 a 0,4 microgramos de PMS por pozo. Los perfiles de fármacos obtenidos con líneas celulares tumorales humanas representativas para varios compuestos estándar utilizando la metodología XTT-PMS fueron similares a los perfiles obtenidos con MTT. La adición de PMS pareció tener poco efecto sobre el metabolismo del MTT. El nuevo reactivo XTT proporciona así un ensayo simplificado de crecimiento celular in vitro con posible aplicabilidad a una variedad de problemas en farmacología y biología celular. Sin embargo, el MTA que utiliza el reactivo XTT aún comparte muchas de las limitaciones y posibles trampas del MTT u otros ensayos basados en tetrazolios.

@article{openalexw2143811153,
    author = "Scudiero, Dominic A. y Shoemaker, Robert H. y Paull, Kenneth D. y Monks, Anne y Tierney, Sean y Nofziger, T H y Currens, Michael J. y Seniff, D A y Boyd, Michael R.",
    title = "Evaluación de un ensayo soluble de tetrazolio/formazan para el crecimiento celular y la sensibilidad a fármacos en cultivo utilizando líneas celulares tumorales humanas y otras.",
    year = "1988",
    journal = "PubMed",
    abstract = "Anteriormente hemos descrito la aplicación de un ensayo automatizado de tetrazolio en microcultura (MTA) que implica la solubilización con dimetilsulfóxido del 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio bromuro (MTT)-formazan generado por células, para la evaluación in vitro de los efectos de los fármacos sobre el crecimiento celular (M.C. Alley et al., Proc. Am. Assoc. Cancer Res., 27:389, 1986; M.C. Alley et al., Cancer Res. 48:589-601, 1988). Existen varias desventajas inherentes a este ensayo, incluyendo el peligro de seguridad por la exposición del personal a grandes cantidades de dimetilsulfóxido, los efectos nocivos de este disolvente sobre el equipo de laboratorio y el metabolismo ineficiente del MTT por algunas líneas celulares humanas. El reconocimiento de estas limitaciones motivó el desarrollo de posibles MTA alternativos que utilicen un reactivo de tetrazolio diferente, 2,3-bis(2-metoxi-4-nitro-5-sulfofenil)-5-[(fenilamino)carbonyl]-2H-tetrazolio hidróxido (XTT), que se reduce metabólicamente en células viables a un producto de formazan soluble en agua. Este reactivo permite lecturas directas de absorbancia, eliminando así un paso de solubilización y acortando el procedimiento del ensayo de crecimiento en microcultura. La mayoría de las líneas celulares tumorales humanas examinadas metabolizaron el XTT con menor eficiencia que el MTT; sin embargo, la adición de metilsulfato de fenazina (PMS) mejoró notablemente la reducción celular del XTT. En presencia de PMS, el reactivo XTT proporcionó valores de absorbancia utilizables para evaluaciones de crecimiento y sensibilidad a fármacos con una variedad de líneas celulares. Dependiendo de la capacidad reductora metabólica de una línea celular dada, las condiciones óptimas para un ensayo de incubación de XTT de 4 horas fueron 50 microgramos de XTT y 0,15 a 0,4 microgramos de PMS por pozo. Los perfiles de fármacos obtenidos con líneas celulares tumorales humanas representativas para varios compuestos estándar utilizando la metodología XTT-PMS fueron similares a los perfiles obtenidos con MTT. La adición de PMS pareció tener poco efecto sobre el metabolismo del MTT. El nuevo reactivo XTT proporciona así un ensayo simplificado de crecimiento celular in vitro con posible aplicabilidad a una variedad de problemas en farmacología y biología celular. Sin embargo, el MTA que utiliza el reactivo XTT aún comparte muchas de las limitaciones y posibles trampas del MTT u otros ensayos basados en tetrazolios.",
    openalex = "W2143811153",
    references = "doi101002jhet5570250340, doi101007bf00256695, doi1010160022175983903034, doi1010160277537986901628, doi101016s0079633676800150, doi101016s0304383575975060, doi101038bjc198435, doi101093ajcp233218, openalexw2120064876, openalexw2140927361"
}

El Instituto Nacional del Cáncer (NCI) está implementando un programa a gran escala de cribado de fármacos in vitro que requiere un ensayo automatizado muy eficiente de los efectos de los fármacos sobre la viabilidad o el crecimiento de las células tumorales. Muchos laboratorios de todo el mundo han adoptado un ensayo de microcultivo basado en la reducción metabólica de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio bromuro (MTT). Sin embargo, debido a ciertas ventajas técnicas del uso del tinte de unión a proteínas sulforodamina B (SRB) en una aplicación de cribado a gran escala, se realizó una comparación detallada de los datos generados por cada tipo de ensayo. Los ensayos MTT y SRB se utilizaron para probar 197 compuestos, en días simultáneos, contra hasta 38 líneas celulares tumorales humanas que representan siete categorías principales de tumores. En días posteriores, 38 compuestos se reprobó con el ensayo SRB y 25 compuestos se reprobó con el ensayo MTT. Para cada una de estas tres comparaciones, tabulamos las diferencias entre los dos ensayos en las relaciones de los valores del grupo de prueba a los valores de control (T/C) para la supervivencia celular; calculamos coeficientes de correlación para varias relaciones T/C; y estimamos la distribución bivariada de los valores para IC50 (concentración de fármaco que resulta en valores T/C del 50%, o inhibición del crecimiento del 50%) para los dos ensayos. Los resultados indican que bajo las condiciones experimentales utilizadas y dentro de los límites de los análisis de datos, los ensayos funcionan de manera similar. Sin embargo, debido a las ventajas prácticas del ensayo SRB para el cribado a gran escala, se ha adoptado para su uso rutinario en la pantalla antitumoral in vitro del NCI.

@article{doi101093jnci82131113,
    author = "Rubinstein, Larry y Shoemaker, Robert H. y Paull, Kenneth D. y Simon, Richard y Tosini, S. y Skehan, Philip y Scudiero, Dominic A. y Monks, Anne y Boyd, M.R.",
    title = "Comparación de los datos de cribado de fármacos anticancerígenos in vitro generados con un ensayo de tetrazolio frente a un ensayo de proteínas contra un panel diverso de líneas celulares tumorales humanas",
    year = "1990",
    journal = "JNCI Journal of the National Cancer Institute",
    abstract = "El Instituto Nacional del Cáncer (NCI) está implementando un programa a gran escala de cribado de fármacos in vitro que requiere un ensayo automatizado muy eficiente de los efectos de los fármacos sobre la viabilidad o el crecimiento de las células tumorales. Muchos laboratorios de todo el mundo han adoptado un ensayo de microcultivo basado en la reducción metabólica de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio bromuro (MTT). Sin embargo, debido a ciertas ventajas técnicas del uso del tinte de unión a proteínas sulforodamina B (SRB) en una aplicación de cribado a gran escala, se realizó una comparación detallada de los datos generados por cada tipo de ensayo. Los ensayos MTT y SRB se utilizaron para probar 197 compuestos, en días simultáneos, contra hasta 38 líneas celulares tumorales humanas que representan siete categorías principales de tumores. En días posteriores, 38 compuestos se reprobó con el ensayo SRB y 25 compuestos se reprobó con el ensayo MTT. Para cada una de estas tres comparaciones, tabulamos las diferencias entre los dos ensayos en las relaciones de los valores del grupo de prueba a los valores de control (T/C) para la supervivencia celular; calculamos coeficientes de correlación para varias relaciones T/C; y estimamos la distribución bivariada de los valores para IC50 (concentración de fármaco que resulta en valores T/C del 50%, o inhibición del crecimiento del 50%) para los dos ensayos. Los resultados indican que bajo las condiciones experimentales utilizadas y dentro de los límites de los análisis de datos, los ensayos funcionan de manera similar. Sin embargo, debido a las ventajas prácticas del ensayo SRB para el cribado a gran escala, se ha adoptado para su uso rutinario en la pantalla antitumoral in vitro del NCI.",
    url = "https://doi.org/10.1093/jnci/82.13.1113",
    doi = "10.1093/jnci/82.13.1113",
    openalex = "W1993570389"
}

La formación de hueso y cartílago en el embrión y la reparación y renovación en el adulto involucran a la descendencia de un pequeño número de células llamadas células madre mesenquimales. Estas células se dividen y su descendencia se compromete a una vía fenotípica específica y distintiva, una línea con pasos discretos y, finalmente, células de etapa final involucradas en la fabricación de un tipo de tejido único, por ejemplo, cartílago o hueso. La señalización local (factores extrínsecos) y el potencial genómico (factores intrínsecos) interactúan en cada paso de la línea para controlar la tasa y el fenotipo característico de las células en el tejido emergente. El estudio de estas células madre mesenquimales, ya sea aisladas de embriones o adultos, proporciona la base para el surgimiento de una nueva tecnología terapéutica de reparación celular propia. El aislamiento, la expansión mitótica y la entrega dirigida a un sitio de células madre autólogas pueden gobernar la reparación rápida y específica de los tejidos esqueléticos.

@article{doi101002jor1100090504,
    author = "Caplan, Arnold I.",
    title = "Células madre mesenquimales",
    year = "1991",
    journal = "Journal of Orthopaedic Research®",
    abstract = "La formación de hueso y cartílago en el embrión y la reparación y renovación en el adulto involucran a la descendencia de un pequeño número de células llamadas células madre mesenquimales. Estas células se dividen y su descendencia se compromete a una vía fenotípica específica y distintiva, una línea con pasos discretos y, finalmente, células de etapa final involucradas en la fabricación de un tipo de tejido único, por ejemplo, cartílago o hueso. La señalización local (factores extrínsecos) y el potencial genómico (factores intrínsecos) interactúan en cada paso de la línea para controlar la tasa y el fenotipo característico de las células en el tejido emergente. El estudio de estas células madre mesenquimales, ya sea aisladas de embriones o adultos, proporciona la base para el surgimiento de una nueva tecnología terapéutica de reparación celular propia. El aislamiento, la expansión mitótica y la entrega dirigida a un sitio de células madre autólogas pueden gobernar la reparación rápida y específica de los tejidos esqueléticos.",
    url = "https://doi.org/10.1002/jor.1100090504",
    doi = "10.1002/jor.1100090504",
    openalex = "W2144268541",
    references = "doi101126science6403986"
}

Describimos aquí el desarrollo e implementación de una pantalla piloto a escala, in vitro, de fármacos anticancerosos que utiliza un panel de 60 líneas de células tumorales humanas organizadas en subpaneles que representan leucemia, melanoma y cánceres de pulmón, colon, riñón, ovario y sistema nervioso central. El objetivo final de esta pantalla orientada a la enfermedad es facilitar el descubrimiento de nuevos compuestos con potencial actividad antitumoral específica de la línea celular y/o específica del subpanel. En el protocolo de pantalla actual, cada línea celular se inocula en placas de microtitulación, luego se preincuba durante 24-28 horas. Posteriormente, se añaden los agentes de prueba en cinco diluciones de 10 veces y la cultura se incuba durante 48 horas adicionales. Para cada agente de prueba, se genera un perfil de respuesta a la dosis. Las determinaciones de punto final de la viabilidad celular o el crecimiento celular se realizan mediante fijación in situ de las células, seguida de tinción con un tinte que se une a proteínas, sulforodamina B (SRB). La SRB se une a los aminoácidos básicos de las macromoléculas celulares; la tinción solubilizada se mide espectrofotométricamente para determinar el crecimiento celular relativo o la viabilidad en células tratadas y no tratadas. Tras los estudios piloto de pantalla, se ha logrado consistentemente una tasa de pantalla de 400 compuestos por semana.

@article{doi101093jnci8311757,
    author = "Monks, Anne y Scudiero, Dominic A. y Skehan, Philip y Shoemaker, Robert H. y Paull, Kenneth D. y Vistica, David T. y Hose, Curtis y Langley, James W. y Cronise, P. y Vaigro-Wolff, Anne y Gray-Goodrich, M. y Campbell, H. y Mayo, J. y Boyd, Marie",
    title = "Viabilidad de una pantalla de fármacos anticancerosos de alto flujo utilizando un panel diverso de líneas de células tumorales humanas cultivadas",
    year = "1991",
    journal = "JNCI Journal of the National Cancer Institute",
    abstract = "Describimos aquí el desarrollo e implementación de una pantalla piloto a escala, in vitro, de fármacos anticancerosos que utiliza un panel de 60 líneas de células tumorales humanas organizadas en subpaneles que representan leucemia, melanoma y cánceres de pulmón, colon, riñón, ovario y sistema nervioso central. El objetivo final de esta pantalla orientada a la enfermedad es facilitar el descubrimiento de nuevos compuestos con potencial actividad antitumoral específica de la línea celular y/o específica del subpanel. En el protocolo de pantalla actual, cada línea celular se inocula en placas de microtitulación, luego se preincuba durante 24-28 horas. Posteriormente, se añaden los agentes de prueba en cinco diluciones de 10 veces y la cultura se incuba durante 48 horas adicionales. Para cada agente de prueba, se genera un perfil de respuesta a la dosis. Las determinaciones de punto final de la viabilidad celular o el crecimiento celular se realizan mediante fijación in situ de las células, seguida de tinción con un tinte que se une a proteínas, sulforodamina B (SRB). La SRB se une a los aminoácidos básicos de las macromoléculas celulares; la tinción solubilizada se mide espectrofotométricamente para determinar el crecimiento celular relativo o la viabilidad en células tratadas y no tratadas. Tras los estudios piloto de pantalla, se ha logrado consistentemente una tasa de pantalla de 400 compuestos por semana.",
    url = "https://doi.org/10.1093/jnci/83.11.757",
    doi = "10.1093/jnci/83.11.757",
    openalex = "W2155208683",
    references = "doi101093jnci82131113, openalexw2143811153"
}

Se evaluó un nuevo análogo de tetrazolio de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio bromuro (MTT) como sustituto del MTT en el ensayo de cribado en microcultivo para el crecimiento celular in vitro. Este nuevo compuesto de tetrazolio, 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3-carboximetoxifenil)-2-(4-sulfofenil)-2H-tetrazolio, sal interna (MTS), en presencia de fenazina metosulfato (PMS), dio lugar a un producto formazano soluble en agua que tenía un máximo de absorbancia a 490-500 nm en solución salina tamponada con fosfato. La cantidad de producto coloreado formado fue proporcional al número de células y al tiempo de incubación de las células con MTS/PMS. El MTS/PMS fue reactivo en todas las líneas celulares probadas, que incluían células de leucemia de ratón L1210, células de tumor de Ehrlich de ratón, fibroblastos 3T3 de ratón y células de tumor de colon humano (HT-29). Las células HT-29 y los fibroblastos 3T3 redujeron el MTS/PMS de manera más eficiente que la reducción del MTT. Comparable a la cantidad de producto formado a partir del MTT, el MTS/PMS dio lugar a una excelente formación de producto. El valor de IC50 para la pirazoloimidazol obtenido utilizando MTS/PMS fue de 200 microM; para la 5-fluoro-2'-desoxiuridina, el valor de IC50 fue de 0,9 nM. Estos valores se compararon muy favorablemente con los valores de IC50 obtenidos mediante recuentos directos de células. Además, se obtuvieron los mismos valores de IC50 cuando se determinaron las absorbancias del producto formazano en las placas de 96 pocillos después de diferentes tiempos de incubación.

@article{doi103727095535491820873191,
    author = "Cory, Ann H. y Owen, Terence C. y Barltrop, J. A. y Cory, Joseph G.",
    title = "Uso de un ensayo de tetrazolio/formazano soluble en agua para ensayos de crecimiento celular en cultivo",
    year = "1991",
    journal = "Cancer Communications",
    abstract = "Se evaluó un nuevo análogo de tetrazolio de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio bromuro (MTT) como sustituto del MTT en el ensayo de cribado en microcultivo para el crecimiento celular in vitro. Este nuevo compuesto de tetrazolio, 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3-carboximetoxifenil)-2-(4-sulfofenil)-2H-tetrazolio, sal interna (MTS), en presencia de fenazina metosulfato (PMS), dio lugar a un producto formazano soluble en agua que tenía un máximo de absorbancia a 490-500 nm en solución salina tamponada con fosfato. La cantidad de producto coloreado formado fue proporcional al número de células y al tiempo de incubación de las células con MTS/PMS. El MTS/PMS fue reactivo en todas las líneas celulares probadas, que incluían células de leucemia de ratón L1210, células de tumor de Ehrlich de ratón, fibroblastos 3T3 de ratón y células de tumor de colon humano (HT-29). Las células HT-29 y los fibroblastos 3T3 redujeron el MTS/PMS de manera más eficiente que la reducción del MTT. Comparable a la cantidad de producto formado a partir del MTT, el MTS/PMS dio lugar a una excelente formación de producto. El valor de IC50 para la pirazoloimidazol obtenido utilizando MTS/PMS fue de 200 microM; para la 5-fluoro-2'-desoxiuridina, el valor de IC50 fue de 0,9 nM. Estos valores se compararon muy favorablemente con los valores de IC50 obtenidos mediante recuentos directos de células. Además, se obtuvieron los mismos valores de IC50 cuando se determinaron las absorbancias del producto formazano en las placas de 96 pocillos después de diferentes tiempos de incubación.",
    url = "https://doi.org/10.3727/095535491820873191",
    doi = "10.3727/095535491820873191",
    openalex = "W2274550965"
}

Pocos se conocen los células no fagocíticas que generan intermediarios de oxígeno reactivos. Basándose en la oxidación dependiente de peroxidasa de rábano picante e inhibible por catalasa de la escopoletina fluorescente, siete líneas de células tumorales humanas elaboraron constitutivamente H2O2 a tasas (hasta 0.5 nmol/10(4) células/h) lo suficientemente grandes que las cantidades acumuladas a las 4 h fueron comparables a la cantidad de H2O2 producida por neutrófilos activados por ésteres de forbol. La reducción de ferricito cromo c inhibible por dismutasa de superóxido fue detectable a tasas mucho más bajas. La producción de H2O2 fue inhibida por diphenyleneiodonium, un ligando de flavoproteína (concentración que produce inhibición del 50%, 0.3 microM), y diethyldithiocarbamato, un quelante de cationes divalentes (concentración que produce inhibición del 50%, 3 microM), pero no por cianuro o azida, inhibidores de la cadena de transporte de electrones, ni por agentes que inhiben la xantina oxidasa, la poliamina oxidasa o el citocromo P450. El citocromo b559, presente en fagocitos y linfocitos humanos, fue indetectable en estas células tumorales mediante un método espectrofotométrico sensible. Los fibroblastos de ratón transfectados con ADN complementario de tirosinasa humana produjeron melanina, pero no H2O2. La generación constitutiva de grandes cantidades de intermediarios de oxígeno reactivos, si ocurre in vivo, podría contribuir a la capacidad de algunos tumores de mutar, inhibir antiproteasas, dañar tejidos locales y, por lo tanto, promover la heterogeneidad tumoral, la invasión y la metástasis.

@article{openalexw1809723326,
    author = "Szatrowski, Ted P. y Nathan, Carl",
    title = "Producción de grandes cantidades de peróxido de hidrógeno por células tumorales humanas.",
    year = "1991",
    journal = "PubMed",
    abstract = "Pocos se conocen los células no fagocíticas que generan intermediarios de oxígeno reactivos. Basándose en la oxidación dependiente de peroxidasa de rábano picante e inhibible por catalasa de la escopoletina fluorescente, siete líneas de células tumorales humanas elaboraron constitutivamente H2O2 a tasas (hasta 0.5 nmol/10(4) células/h) lo suficientemente grandes que las cantidades acumuladas a las 4 h fueron comparables a la cantidad de H2O2 producida por neutrófilos activados por ésteres de forbol. La reducción de ferricito cromo c inhibible por dismutasa de superóxido fue detectable a tasas mucho más bajas. La producción de H2O2 fue inhibida por diphenyleneiodonium, un ligando de flavoproteína (concentración que produce inhibición del 50%, 0.3 microM), y diethyldithiocarbamato, un quelante de cationes divalentes (concentración que produce inhibición del 50%, 3 microM), pero no por cianuro o azida, inhibidores de la cadena de transporte de electrones, ni por agentes que inhiben la xantina oxidasa, la poliamina oxidasa o el citocromo P450. El citocromo b559, presente en fagocitos y linfocitos humanos, fue indetectable en estas células tumorales mediante un método espectrofotométrico sensible. Los fibroblastos de ratón transfectados con ADN complementario de tirosinasa humana produjeron melanina, pero no H2O2. La generación constitutiva de grandes cantidades de intermediarios de oxígeno reactivos, si ocurre in vivo, podría contribuir a la capacidad de algunos tumores de mutar, inhibir antiproteasas, dañar tejidos locales y, por lo tanto, promover la heterogeneidad tumoral, la invasión y la metástasis.",
    openalex = "W1809723326"
}

El aceptor de hidrógeno 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5 difeniltetrazolio bromuro (MTT) se utiliza comúnmente para estimar la viabilidad celular en protocolos de cribado de fármacos. La presente investigación fue motivada, en parte, por observaciones de que la reducción de MTT a su producto de reacción coloreado, formazano de MTT, variaba entre líneas celulares y con la edad del cultivo. Se estableció una correlación entre la concentración de D-glucosa del medio de cultivo en el momento del ensayo y la producción de formazano de MTT para líneas celulares que representan siete histologías tumorales. Una disminución en la concentración de D-glucosa del medio de cultivo estuvo acompañada de una disminución en la actividad específica de MTT (formazano de MTT/microgramo de proteína celular) para un número de líneas celulares. Las células que metabolizan extensamente la D-glucosa exhibieron la mayor reducción en la actividad específica de MTT. Evidencia adicional de que la concentración de D-glucosa del medio de cultivo desempeñó un papel importante en la reducción de MTT fue proporcionada por experimentos que demostraron que la transferencia de células a un medio libre de glucosa (L-15) estuvo acompañada de una disminución inmediata en la reducción de MTT que fue independiente del pH. Estos estudios sugirieron que el transporte celular y el metabolismo constante de glucosa eran necesarios para la reducción máxima de MTT. Las disminuciones en la concentración celular de los nucleótidos de piridina reducidos NADH y NADPH estuvieron acompañadas de disminuciones concomitantes en la producción de formazano de MTT. El formazano de MTT varió significativamente entre líneas celulares tanto en la cinética de su formación como en el grado de saturabilidad exhibido. Los valores aparentes de IC50 para Adriamicina variaron, de manera específica de la línea celular, con el tiempo de exposición a MTT. Estos resultados indican que la actividad específica de MTT está significativamente influenciada por una serie de parámetros y sugieren que deben establecerse condiciones de ensayo que minimicen sus efectos.

@article{openalexw1819048918,
    author = "Vistica, David T. y Skehan, Philip y Scudiero, Dominic A. y Monks, Anne y Pittman, A F y Boyd, Michael R.",
    title = "Ensayos basados en tetrazolio para la viabilidad celular: un examen crítico de los parámetros seleccionados que afectan la producción de formazano.",
    year = "1991",
    journal = "PubMed",
    abstract = "El aceptor de hidrógeno 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5 difeniltetrazolio bromuro (MTT) se utiliza comúnmente para estimar la viabilidad celular en protocolos de cribado de fármacos. La presente investigación fue motivada, en parte, por observaciones de que la reducción de MTT a su producto de reacción coloreado, formazano de MTT, variaba entre líneas celulares y con la edad del cultivo. Se estableció una correlación entre la concentración de D-glucosa del medio de cultivo en el momento del ensayo y la producción de formazano de MTT para líneas celulares que representan siete histologías tumorales. Una disminución en la concentración de D-glucosa del medio de cultivo estuvo acompañada de una disminución en la actividad específica de MTT (formazano de MTT/microgramo de proteína celular) para un número de líneas celulares. Las células que metabolizan extensamente la D-glucosa exhibieron la mayor reducción en la actividad específica de MTT. Evidencia adicional de que la concentración de D-glucosa del medio de cultivo desempeñó un papel importante en la reducción de MTT fue proporcionada por experimentos que demostraron que la transferencia de células a un medio libre de glucosa (L-15) estuvo acompañada de una disminución inmediata en la reducción de MTT que fue independiente del pH. Estos estudios sugirieron que el transporte celular y el metabolismo constante de glucosa eran necesarios para la reducción máxima de MTT. Las disminuciones en la concentración celular de los nucleótidos de piridina reducidos NADH y NADPH estuvieron acompañadas de disminuciones concomitantes en la producción de formazano de MTT. El formazano de MTT varió significativamente entre líneas celulares tanto en la cinética de su formación como en el grado de saturabilidad exhibido. Los valores aparentes de IC50 para Adriamicina variaron, de manera específica de la línea celular, con el tiempo de exposición a MTT. Estos resultados indican que la actividad específica de MTT está significativamente influenciada por una serie de parámetros y sugieren que deben establecerse condiciones de ensayo que minimicen sus efectos.",
    openalex = "W1819048918",
    references = "doi101093jnci82131113, openalexw2143811153"
}

@article{doi101016009286749290115s,
    author = "Hynes, Richard O.",
    title = "Integrinas: Versatilidad, modulación y señalización en la adhesión celular",
    year = "1992",
    journal = "Cell",
    url = "https://doi.org/10.1016/0092-8674(92)90115-s",
    doi = "10.1016/0092-8674(92)90115-s",
    openalex = "W2029231027"
}

Las vías de señalización involucradas en los efectos metabólicos a largo plazo de la angiotensina II (Ang II) en células musculares lisas vasculares no se comprenden completamente, pero incluyen la generación de moléculas que probablemente afecten la actividad oxidasa. Examinamos la capacidad de la Ang II para estimular la formación de aniones superóxido e investigamos la identidad de las oxidasas responsables de su producción. El tratamiento de células musculares lisas vasculares con Ang II durante 4 a 6 horas causó un aumento de 2,7 +/- 0,4 veces en la formación intracelular de aniones superóxido, detectado mediante ensayo de lucigenina. Este superóxido pareció resultar de la activación tanto de la oxidasa de NADPH como de la de NADH. La actividad de la oxidasa de NADPH aumentó de 3,23 +/- 0,61 a 11,80 +/- 1,72 nmol O2-/min por miligramo de proteína después de 4 horas de Ang II, mientras que la actividad de la oxidasa de NADH aumentó de 16,76 +/- 2,13 a 45,00 +/- 4,57 nmol O2-/min por miligramo de proteína. La actividad de la oxidasa de NADPH fue estimulada por ácidos fosfatídicos y araquidónicos exógenos y fue parcialmente inhibida por el inhibidor específico diphenylene iodinium. La actividad de la oxidasa de NADH aumentó por los ácidos araquidónico y linoleico, fue insensible al ácido fosfatídico exógeno y fue inhibida por altas concentraciones de quinacrina. Ambas oxidasas parecen residir en la membrana plasmática, basándose en la migración de la actividad tras la fraccionación celular y su aparente insensibilidad al veneno mitocondrial KCN. Estas observaciones sugieren que la Ang II activa específicamente sistemas enzimáticos que promueven la generación de superóxido y plantean la posibilidad de que estas vías funcionen como segundos mensajeros para respuestas a largo plazo, como la hipertrofia o la hiperplasia.

@article{doi10116101res7461141,
    author = "Griendling, Kathy K. y Minieri, C A y Ollerenshaw, Jeremy D. y Alexander, R. Wayne",
    title = "La angiotensina II estimula la actividad de las oxidasas de NADH y NADPH en células musculares lisas vasculares cultivadas.",
    year = "1994",
    journal = "Circulation Research",
    abstract = "Las vías de señalización involucradas en los efectos metabólicos a largo plazo de la angiotensina II (Ang II) en células musculares lisas vasculares no se comprenden completamente, pero incluyen la generación de moléculas que probablemente afecten la actividad oxidasa. Examinamos la capacidad de la Ang II para estimular la formación de aniones superóxido e investigamos la identidad de las oxidasas responsables de su producción. El tratamiento de células musculares lisas vasculares con Ang II durante 4 a 6 horas causó un aumento de 2,7 +/- 0,4 veces en la formación intracelular de aniones superóxido, detectado mediante ensayo de lucigenina. Este superóxido pareció resultar de la activación tanto de la oxidasa de NADPH como de la de NADH. La actividad de la oxidasa de NADPH aumentó de 3,23 +/- 0,61 a 11,80 +/- 1,72 nmol O2-/min por miligramo de proteína después de 4 horas de Ang II, mientras que la actividad de la oxidasa de NADH aumentó de 16,76 +/- 2,13 a 45,00 +/- 4,57 nmol O2-/min por miligramo de proteína. La actividad de la oxidasa de NADPH fue estimulada por ácidos fosfatídicos y araquidónicos exógenos y fue parcialmente inhibida por el inhibidor específico diphenylene iodinium. La actividad de la oxidasa de NADH aumentó por los ácidos araquidónico y linoleico, fue insensible al ácido fosfatídico exógeno y fue inhibida por altas concentraciones de quinacrina. Ambas oxidasas parecen residir en la membrana plasmática, basándose en la migración de la actividad tras la fraccionación celular y su aparente insensibilidad al veneno mitocondrial KCN. Estas observaciones sugieren que la Ang II activa específicamente sistemas enzimáticos que promueven la generación de superóxido y plantean la posibilidad de que estas vías funcionen como segundos mensajeros para respuestas a largo plazo, como la hipertrofia o la hiperplasia.",
    url = "https://doi.org/10.1161/01.res.74.6.1141",
    doi = "10.1161/01.res.74.6.1141",
    openalex = "W2110182057"
}

UNLABELLED: Se utilizaron células progenitoras osteocondrales para reparar defectos grandes y de espesor completo del cartílago articular que se habían creado en las rodillas de conejos. Células adherentes de la médula ósea, o células del periostio que habían sido liberadas del tejido conectivo mediante digestión con colagenasa, se cultivaron, se dispersaron en un gel de colágeno de tipo I y se transplantaron en un defecto grande (tres por seis milímetros) y de espesor completo (tres milímetros) en la superficie de carga del cóndilo femoral medial. La rodilla contralateral sirvió como control: o el defecto en esa rodilla se dejó vacío o se implantó un gel de colágeno libre de células. Las células del periostio y las células derivadas de la médula ósea mostraron patrones similares de diferenciación en cartílago articular y hueso subcondral. Las muestras de tejido reparador se analizaron utilizando un sistema de clasificación histológica semicuantitativa y mediante pruebas mecánicas empleando un indentador poroso para medir la complianza del tejido a intervalos hasta veinticuatro semanas después de la operación. No hubo diferencia aparente entre los resultados obtenidos con las células de la médula ósea y las del periostio. Tan pronto como dos semanas después del trasplante, las células progenitoras osteocondrales autólogas se habían diferenciado uniformemente en condrocitos en todo el defecto. Este cartílago reparador fue posteriormente reemplazado por hueso en una dirección proximal a distal, hasta que, a las veinticuatro semanas después del trasplante, el hueso subcondral estaba completamente reparado, sin pérdida del cartílago articular superpuesto. Los datos de las pruebas mecánicas fueron un índice útil de la calidad de la reparación a largo plazo. Veinticuatro semanas después del trasplante, el tejido reparador tanto de las células de la médula ósea como del periostio era más rígido y menos complaciente que el tejido derivado de los defectos vacíos, pero menos rígido y más complaciente que el cartílago normal. RELEVANCIA CLÍNICA: Las modalidades actuales para la reparación de defectos del cartílago articular tienen muchas desventajas. El trasplante de células progenitoras que formarán cartílago y hueso ofrece una posible alternativa a estos métodos. Como se demuestra en este informe, las células progenitoras osteocondrales autólogas derivadas de la médula ósea pueden aislarse y cultivarse in vitro sin perder su capacidad de diferenciarse en cartílago o hueso. Se pueden generar suficientes células autólogas para iniciar la reparación del cartílago articular y la reformatación del hueso subcondral. Los tejidos reparadores parecen experimentar las mismas transiciones de desarrollo que originalmente condujeron a la formación del tejido articular en el embrión. (RESUMEN TRUNCADO A LAS 400 PALABRAS)

@article{doi1021060000462319940400000013,
    author = "Wakitani, Shigeyuki and Goto, Tatsuhiko and Pineda, S J and Young, Randell G. and Mansour, Joseph M. and Caplan, Arnold I. and Goldberg, V M",
    title = "Reparación basada en células mesenquimales de defectos grandes y de espesor completo del cartílago articular.",
    year = "1994",
    journal = "Journal of Bone and Joint Surgery",
    abstract = "UNLABELLED: Se utilizaron células progenitoras osteocondrales para reparar defectos grandes y de espesor completo del cartílago articular que se habían creado en las rodillas de conejos. Células adherentes de la médula ósea, o células del periostio que habían sido liberadas del tejido conectivo por digestión con colagenasa, se cultivaron, se dispersaron en un gel de colágeno de tipo I y se transplantaron en un defecto grande (tres por seis milímetros), de espesor completo (tres milímetros), en la superficie de carga del cóndilo femoral medial. La rodilla contralateral sirvió como control: o el defecto en esa rodilla se dejó vacío o se implantó un gel de colágeno libre de células. Las células del periostio y las células derivadas de la médula ósea mostraron patrones similares de diferenciación en cartílago articular y hueso subcondral. Las muestras de tejido reparador se analizaron utilizando un sistema de clasificación histológica semicuantitativa y mediante pruebas mecánicas empleando un indentador poroso para medir la compliancia del tejido a intervalos hasta veinticuatro semanas después de la operación. No hubo diferencia aparente entre los resultados obtenidos con las células de la médula ósea y las del periostio. Tan pronto como dos semanas después del trasplante, las células progenitoras osteocondrales autólogas se habían diferenciado uniformemente en condrocitos en todo el defecto. Este cartílago reparador fue posteriormente reemplazado por hueso en una dirección proximal a distal, hasta que, a las veinticuatro semanas después del trasplante, el hueso subcondral se había reparado completamente, sin pérdida del cartílago articular superpuesto. Los datos de las pruebas mecánicas fueron un índice útil de la calidad de la reparación a largo plazo. Veinticuatro semanas después del trasplante, el tejido reparador tanto de las células de la médula ósea como del periostio fue más rígido y menos complaciente que el tejido derivado de los defectos vacíos, pero menos rígido y más complaciente que el cartílago normal. RELEVANCIA CLÍNICA: Las modalidades actuales para la reparación de defectos del cartílago articular tienen muchas desventajas. El trasplante de células progenitoras que formarán cartílago y hueso ofrece una posible alternativa a estos métodos. Como se demostró en este informe, las células progenitoras osteocondrales autólogas derivadas de la médula ósea pueden aislarse y cultivarse in vitro sin perder su capacidad de diferenciarse en cartílago o hueso. Se pueden generar suficientes células autólogas para iniciar la reparación del cartílago articular y la reformatación del hueso subcondral. Los tejidos reparadores parecen experimentar las mismas transiciones de desarrollo que originalmente condujeron a la formación del tejido articular en el embrión.(RESUMEN TRUNCADO EN 400 PALABRAS)",
    url = "https://doi.org/10.2106/00004623-199404000-00013",
    doi = "10.2106/00004623-199404000-00013",
    openalex = "W1522229466",
    references = "doi101126science6403986"
}

@article{doi101016089158499400198s,
    author = "Burdon, Roy H.",
    title = "Superoxido y peróxido de hidrógeno en relación con la proliferación celular mamífera",
    year = "1995",
    journal = "Free Radical Biology and Medicine",
    url = "https://doi.org/10.1016/0891-5849(94)00198-s",
    doi = "10.1016/0891-5849(94)00198-s",
    openalex = "W2058461613"
}

Varios poliacaciones que poseen una capacidad de tamponamiento sustancial por debajo del pH fisiológico, como los lipopoliaminas y los polímeros de poliamidaamina, son agentes de transfección eficientes por sí mismos, es decir, sin la adición de agentes de direccionamiento celular o de ruptura de membrana. Esta observación nos llevó a probar el polímero catiónico polietilimina (PEI) por su potencial de entrega de genes. De hecho, cada tercer átomo del PEI es un átomo de nitrógeno amino protonable, lo que hace que la red polimérica sea una eficaz "esponja de protones" a prácticamente cualquier pH. La transferencia del gen reportero luciferasa con este poliacación en una variedad de líneas celulares y células primarias dio resultados comparables, o incluso mejores, que los lipopoliaminas. La citotoxicidad fue baja y se observó solo a concentraciones muy superiores a las necesarias para una transfección óptima. La entrega de oligonucleótidos en neuronas embrionarias se siguió utilizando una sonda fluorescente. Virtualmente todas las neuronas mostraron etiquetado nuclear, sin efectos tóxicos. El equilibrio óptimo catión/anión del PEI para la transfección in vitro está ligeramente del lado catiónico, lo cual es ventajoso para la entrega in vivo. De hecho, la transferencia intracerebral del gen de la luciferasa en ratones recién nacidos dio resultados comparables (para una cantidad dada de ADN) a la transfección in vitro de células endoteliales primarias del cerebro de rata o neuronas embrionarias de pollo. Juntos, estas propiedades hacen del PEI un vector prometedor para la terapia génica y un núcleo excepcional para el diseño de dispositivos más sofisticados. Nuestra hipótesis es que su eficiencia se basa en un extenso tamponamiento lisosomal que protege el ADN de la degradación por nucleasas, y el consiguiente hinchazón y ruptura lisosomal que proporcionan un mecanismo de escape para las partículas PEI/ADN.

@article{doi101073pnas92167297,
    author = "Boussif, Otmane y Lezoualc'h, Frank y Zanta, Maria Antonietta y Mergny, M D y Scherman, Daniel y Demeneix, Barbara y Behr, Jean‐Paul",
    title = "Un vector versátil para la transferencia de genes y oligonucleótidos en células en cultivo y in vivo: polietilimina.",
    year = "1995",
    journal = "Proceedings of the National Academy of Sciences",
    abstract = {Varios poliacaciones que poseen una capacidad de tamponamiento sustancial por debajo del pH fisiológico, como los lipopoliaminas y los polímeros de poliamidaamina, son agentes de transfección eficientes por sí mismos, es decir, sin la adición de agentes de direccionamiento celular o de ruptura de membrana. Esta observación nos llevó a probar el polímero catiónico polietilimina (PEI) por su potencial de entrega de genes. De hecho, cada tercer átomo del PEI es un átomo de nitrógeno amino protonable, lo que hace que la red polimérica sea una eficaz "esponja de protones" a prácticamente cualquier pH. La transferencia del gen reportero luciferasa con este poliacación en una variedad de líneas celulares y células primarias dio resultados comparables, o incluso mejores, que los lipopoliaminas. La citotoxicidad fue baja y se observó solo a concentraciones muy superiores a las necesarias para una transfección óptima. La entrega de oligonucleótidos en neuronas embrionarias se siguió utilizando una sonda fluorescente. Virtualmente todas las neuronas mostraron etiquetado nuclear, sin efectos tóxicos. El equilibrio óptimo catión/anión del PEI para la transfección in vitro está ligeramente del lado catiónico, lo cual es ventajoso para la entrega in vivo. De hecho, la transferencia intracerebral del gen de la luciferasa en ratones recién nacidos dio resultados comparables (para una cantidad dada de ADN) a la transfección in vitro de células endoteliales primarias del cerebro de rata o neuronas embrionarias de pollo. Juntos, estas propiedades hacen del PEI un vector prometedor para la terapia génica y un núcleo excepcional para el diseño de dispositivos más sofisticados. Nuestra hipótesis es que su eficiencia se basa en un extenso tamponamiento lisosomal que protege el ADN de la degradación por nucleasas, y el consiguiente hinchazón y ruptura lisosomal que proporcionan un mecanismo de escape para las partículas PEI/ADN.},
    url = "https://doi.org/10.1073/pnas.92.16.7297",
    doi = "10.1073/pnas.92.16.7297",
    openalex = "W2010655741",
    references = "doi1010160022175983903034"
}

@article{doi101016s0092867400800859,
    author = "Liu, Xuesong y Kim, Caryn Naekyung y Yang, Jie y Jemmerson, Ronald y Wang, Xiaodong",
    title = "Inducción del Programa Apoptótico en Extractos Sin Células: Requisito para dATP y Citocromo c",
    year = "1996",
    journal = "Cell",
    url = "https://doi.org/10.1016/s0092-8674(00)80085-9",
    doi = "10.1016/s0092-8674(00)80085-9",
    openalex = "W2149967205"
}

Resumen La prueba de exclusión de tinte se utiliza para determinar el número de células viables presentes en una suspensión celular. Se basa en el principio de que las células vivas poseen membranas celulares intactas que excluyen ciertos tintes, como el azul de tripano, la eosina o el propidio, mientras que las células muertas no. En esta prueba, una suspensión celular se mezcla simplemente con el tinte y luego se examina visualmente para determinar si las células absorben o excluyen el tinte. En el protocolo presentado aquí, una célula viable tendrá un citoplasma claro, mientras que una célula no viable tendrá un citoplasma azul.

@article{doi1010020471142735ima03bs21,
    author = "Strober, Warren",
    title = "Prueba de exclusión de azul de tripano de la viabilidad celular",
    year = "1997",
    journal = "Protocolos actuales en inmunología",
    abstract = "Resumen La prueba de exclusión de tinte se utiliza para determinar el número de células viables presentes en una suspensión celular. Se basa en el principio de que las células vivas poseen membranas celulares intactas que excluyen ciertos tintes, como el azul de tripano, la eosina o el propidio, mientras que las células muertas no. En esta prueba, una suspensión celular se mezcla simplemente con el tinte y luego se examina visualmente para determinar si las células absorben o excluyen el tinte. En el protocolo presentado aquí, una célula viable tendrá un citoplasma claro, mientras que una célula no viable tendrá un citoplasma azul.",
    url = "https://doi.org/10.1002/0471142735.ima03bs21",
    doi = "10.1002/0471142735.ima03bs21",
    openalex = "W4230982340"
}

La reducción de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio bromuro (MTT) es uno de los métodos más utilizados para medir la proliferación celular y la citotoxicidad neural. Se asume ampliamente que el MTT es reducido por mitocondrias activas en células vivas. Mediante el uso de mitocondrias aisladas de cerebro de rata y células B12, encontramos efectivamente que el malato, el glutamato y el succinato apoyan la reducción de MTT por mitocondrias aisladas. Sin embargo, los datos presentados en este estudio no apoyan el papel exclusivo de las mitocondrias en la reducción de MTT por células intactas. Utilizando una variedad de enfoques, encontramos que la reducción de MTT por células B12 se limita a vesículas intracelulares que posteriormente dan lugar a la forma aguja de formazano de MTT en la superficie celular. Algunas de estas vesículas fueron identificadas como endosomas o lisosomas. Además, se encontró que el MTT es impermeable a la membrana. Estos y otros resultados sugieren que el MTT es absorbido por las células a través de endocitosis y que el formazano reducido de MTT se acumula en el compartimento endosomal/lisosomal y luego se transporta a la superficie celular a través de exocitosis.

@article{doi101046j14714159199769020581x,
    author = "Liu, Yuanbin y Peterson, Daniel A. y Kimura, Hideo y Schubert, David",
    title = "Mecanismo de reducción de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio bromuro (MTT)",
    year = "1997",
    journal = "Journal of Neurochemistry",
    abstract = "La reducción de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio bromuro (MTT) es uno de los métodos más utilizados para medir la proliferación celular y la citotoxicidad neural. Se asume ampliamente que el MTT es reducido por mitocondrias activas en células vivas. Mediante el uso de mitocondrias aisladas de cerebro de rata y células B12, encontramos efectivamente que el malato, el glutamato y el succinato apoyan la reducción de MTT por mitocondrias aisladas. Sin embargo, los datos presentados en este estudio no apoyan el papel exclusivo de las mitocondrias en la reducción de MTT por células intactas. Utilizando una variedad de enfoques, encontramos que la reducción de MTT por células B12 se limita a vesículas intracelulares que posteriormente dan lugar a la forma aguja de formazano de MTT en la superficie celular. Algunas de estas vesículas fueron identificadas como endosomas o lisosomas. Además, se encontró que el MTT es impermeable a la membrana. Estos y otros resultados sugieren que el MTT es absorbido por las células a través de endocitosis y que el formazano reducido de MTT se acumula en el compartimento endosomal/lisosomal y luego se transporta a la superficie celular a través de exocitosis.",
    url = "https://doi.org/10.1046/j.1471-4159.1997.69020581.x",
    doi = "10.1046/j.1471-4159.1997.69020581.x",
    openalex = "W1993943341"
}

@article{doi101006excr19973858,
    author = "Johnstone, Brian y Hering, Thomas M. y Caplan, Arnold I. y Goldberg, Victor M. y Yoo, Jung U.",
    title = "Condrogenesis in Vitro de Células Progenitoras Mesenquimales Derivadas de la Médula Ósea",
    year = "1998",
    journal = "Experimental Cell Research",
    url = "https://doi.org/10.1006/excr.1997.3858",
    doi = "10.1006/excr.1997.3858",
    openalex = "W1544751778"
}

La estimulación de diversas células con factores de crecimiento resulta en un aumento transitorio de la concentración intracelular de H2O2 que es necesario para la fosforilación de tirosina de proteínas inducida por factores de crecimiento. Se investigó el efecto del H2O2 producido en respuesta al factor de crecimiento epidérmico (EGF) sobre la actividad de la protein-tirosina fosfatasa 1B (PTP1B) en células de carcinoma epidermoide humano A431. El H2O2 inactivó la PTP1B recombinante in vitro oxidando su cisteína del sitio catalítico, probablemente a ácido sulfénico. La enzima oxidada fue reactivada más eficazmente por tioredoxina que por glutaredoxina o glutatión a sus concentraciones fisiológicas. La oxidación por H2O2 previno la modificación de la cisteína catalítica de la PTP1B por ácido iodoacético, sugiriendo que debería ser posible monitorear el estado de oxidación de la PTP1B en células midiendo la incorporación de radioactividad en la enzima después de lisar las células en presencia de ácido iodoacético radiomarcado. La cantidad de tal radioactividad asociada con la PTP1B inmunoprecipitada de células A431 que habían sido estimuladas con EGF durante 10 minutos fue un 27% menor que la asociada con la PTP1B de células no estimuladas. La cantidad de radioactividad derivada de ácido iodoacético asociada con la PTP1B alcanzó un mínimo 10 minutos después de la estimulación de células con EGF y regresó a los valores de línea base a los 40 minutos, sugiriendo que la oxidación de la PTP1B es reversible en células. Estos resultados indican que la activación de una tirosina quinasa receptora por unión del correspondiente factor de crecimiento puede no ser suficiente para aumentar el nivel de estado estacionario de fosforilación de tirosina de proteínas en células y que la inhibición concurrente de protein-tirosina fosfatasas por H2O2 también podría ser necesaria.

@article{doi101074jbc2732515366,
    author = "Lee, Seung-Rock y Kwon, Ki‐Sun y Kim, Seung-Ryul y Rhee, Sue Goo",
    title = "Inactivación reversible de la protein-tirosina fosfatasa 1B en células A431 estimuladas con factor de crecimiento epidérmico",
    year = "1998",
    journal = "Journal of Biological Chemistry",
    abstract = "La estimulación de diversas células con factores de crecimiento resulta en un aumento transitorio de la concentración intracelular de H2O2 que es necesario para la fosforilación de tirosina de proteínas inducida por factores de crecimiento. Se investigó el efecto del H2O2 producido en respuesta al factor de crecimiento epidérmico (EGF) sobre la actividad de la protein-tirosina fosfatasa 1B (PTP1B) en células de carcinoma epidermoide humano A431. El H2O2 inactivó la PTP1B recombinante in vitro oxidando su cisteína del sitio catalítico, probablemente a ácido sulfénico. La enzima oxidada fue reactivada más eficazmente por tioredoxina que por glutaredoxina o glutatión a sus concentraciones fisiológicas. La oxidación por H2O2 previno la modificación de la cisteína catalítica de la PTP1B por ácido iodoacético, sugiriendo que debería ser posible monitorear el estado de oxidación de la PTP1B en células midiendo la incorporación de radioactividad en la enzima después de lisar las células en presencia de ácido iodoacético radiomarcado. La cantidad de tal radioactividad asociada con la PTP1B inmunoprecipitada de células A431 que habían sido estimuladas con EGF durante 10 minutos fue un 27% menor que la asociada con la PTP1B de células no estimuladas. La cantidad de radioactividad derivada de ácido iodoacético asociada con la PTP1B alcanzó un mínimo 10 minutos después de la estimulación de células con EGF y regresó a los valores de línea base a los 40 minutos, sugiriendo que la oxidación de la PTP1B es reversible en células. Estos resultados indican que la activación de una tirosina quinasa receptora por unión del correspondiente factor de crecimiento puede no ser suficiente para aumentar el nivel de estado estacionario de fosforilación de tirosina de proteínas en células y que la inhibición concurrente de protein-tirosina fosfatasas por H2O2 también podría ser necesaria.",
    url = "https://doi.org/10.1074/jbc.273.25.15366",
    doi = "10.1074/jbc.273.25.15366",
    openalex = "W2136573391"
}

Se cree que las células madre mesenquimales humanas son células multipotentes, presentes en la médula ósea adulta, que pueden replicarse como células indiferenciadas y tienen el potencial de diferenciarse en linajes de tejidos mesenquimales, incluidos hueso, cartílago, grasa, tendón, músculo y estroma de médula. Se aislaron células que tienen las características de células madre mesenquimales humanas de aspirados de médula de donantes voluntarios. Estas células mostraron un fenotipo estable y permanecieron como una monocapa in vitro. Estas células madre adultas podían inducirse a diferenciarse exclusivamente en linajes adipocíticos, condrocíticos u osteocíticos. Se identificaron células madre individuales que, al expandirse en colonias, conservaron su potencial multilineal.

@article{doi101126science2845411143,
    author = "Pittenger, Mark F. y Mackay, Alastair M. y Beck, Stephen C. y Jaiswal, Rama K. y Douglas, R. Gordon y Mosca, Joseph D. y Moorman, Mark A. y Simonetti, Donald W. y Craig, Stewart y Marshak, Daniel R.",
    title = "Potencial Multilineal de Células Madre Mesenquimales Adultas Humanas",
    year = "1999",
    journal = "Science",
    abstract = "Se cree que las células madre mesenquimales humanas son células multipotentes, presentes en la médula ósea adulta, que pueden replicarse como células indiferenciadas y tienen el potencial de diferenciarse en linajes de tejidos mesenquimales, incluidos hueso, cartílago, grasa, tendón, músculo y estroma de médula. Se aislaron células que tienen las características de células madre mesenquimales humanas de aspirados de médula de donantes voluntarios. Estas células mostraron un fenotipo estable y permanecieron como una monocapa in vitro. Estas células madre adultas podían inducirse a diferenciarse exclusivamente en linajes adipocíticos, condrocíticos u osteocíticos. Se identificaron células madre individuales que, al expandirse en colonias, conservaron su potencial multilineal.",
    url = "https://doi.org/10.1126/science.284.5411.143",
    doi = "10.1126/science.284.5411.143",
    openalex = "W2159999899"
}

La médula ósea adulta contiene células progenitoras mesenquimales (MPCs) que tienen múltiples potenciales de diferenciación. Se ha identificado un clon de MPC condicionalmente inmortalizado, BMC9, que exhibe cuatro fenotipos celulares mesenquimales: condrocito, adipocito, estromal (apoya la formación de osteoclastos) y osteoblasto. El clon BMC9, fibroblastos cerebrales de control y otro clon derivado de médula ósea, BMC10, fueron aislados de un ratón transgénico (H-2Kb-tsA58) que contiene un gen para inmortalidad condicional. Para probar el potencial condrogénico, las células se cultivaron en medio definido que contenía 10 ng/ml de factor de crecimiento transformante beta y 10-7 M de dexametasona en tubos de polipropileno de 15 ml ("cultivos en agregados"). El potencial adipogénico se cuantificó mediante citometría de flujo de células teñidas con Nile Red cultivadas durante 1 y 2 semanas en medio que contenía isobutil metilxantina, indometacina, insulina y dexametasona. El apoyo a la formación de osteoclastos se midió mediante la cuantificación de células multinucleadas positivas para ácido fosfatasa resistente a tartrato en cocultivos de células de bazo de clones de prueba (clones immortomouse y células de control positivo ST2) cultivadas en presencia de 10-7 M de vitamina D3 y 150 mM de ascorbato-2-fosfato. El potencial osteogénico in vivo se ensayó mediante examen histológico de la formación ósea en implantes subcutáneos, en huéspedes de ratones atímicos, de un compuesto de células combinadas con cerámicas de fosfato de calcio porosas. El clon derivado de médula ósea BMC9 tiene el potencial de expresar cada una de las cuatro características mesenquimales probadas, mientras que los fibroblastos cerebrales, probados bajo condiciones idénticas, no exhibieron ninguna de estas cuatro características mesenquimales. Las células BMC10 exhibieron fenotipos osteogénicos y condrogénicos, pero mostraron solo una expresión mínima de fenotipos adipocíticos o de apoyo a osteoclastos. El clon BMC9 es, al menos, una MPC cuadripotencial aislada de la médula ósea de un ratón adulto que puede diferenciarse en cartílago y tejido adiposo, apoyar la formación de osteoclastos y formar hueso. El clon BMC9 es un ejemplo de una célula progenitora multipotencial derivada de adulto que se sitúa temprano en la línea mesenquimal.

@article{doi101359jbmr1999145700,
    author = "Dennis, James E. y Merriam, Anita P. y Awadallah, Amad y Yoo, Jung U. y Johnstone, Brian y Caplan, Arnold I.",
    title = "Una Célula Progenitora Mesenquimal Cuadripotencial Aislada de la Médula Ósea de un Ratón Adulto",
    year = "1999",
    journal = "Journal of Bone and Mineral Research",
    abstract = {La médula ósea adulta contiene células progenitoras mesenquimales (MPCs) que tienen múltiples potenciales de diferenciación. Se ha identificado un clon de MPC condicionalmente inmortalizado, BMC9, que exhibe cuatro fenotipos celulares mesenquimales: condrocito, adipocito, estromal (apoya la formación de osteoclastos) y osteoblasto. El clon BMC9, fibroblastos cerebrales de control y otro clon derivado de médula ósea, BMC10, fueron aislados de un ratón transgénico (H-2Kb-tsA58) que contiene un gen para inmortalidad condicional. Para probar el potencial condrogénico, las células se cultivaron en medio definido que contenía 10 ng/ml de factor de crecimiento transformante beta y 10-7 M de dexametasona en tubos de polipropileno de 15 ml ("cultivos en agregados"). El potencial adipogénico se cuantificó mediante citometría de flujo de células teñidas con Nile Red cultivadas durante 1 y 2 semanas en medio que contenía isobutil metilxantina, indometacina, insulina y dexametasona. El apoyo a la formación de osteoclastos se midió mediante la cuantificación de células multinucleadas positivas para ácido fosfatasa resistente a tartrato en cocultivos de células de bazo de clones de prueba (clones immortomouse y células de control positivo ST2) cultivadas en presencia de 10-7 M de vitamina D3 y 150 mM de ascorbato-2-fosfato. El potencial osteogénico in vivo se ensayó mediante examen histológico de la formación ósea en implantes subcutáneos, en huéspedes de ratones atímicos, de un compuesto de células combinadas con cerámicas de fosfato de calcio porosas. El clon derivado de médula ósea BMC9 tiene el potencial de expresar cada una de las cuatro características mesenquimales probadas, mientras que los fibroblastos cerebrales, probados bajo condiciones idénticas, no exhibieron ninguna de estas cuatro características mesenquimales. Las células BMC10 exhibieron fenotipos osteogénicos y condrogénicos, pero mostraron solo una expresión mínima de fenotipos adipocíticos o de apoyo a osteoclastos. El clon BMC9 es, al menos, una MPC cuadripotencial aislada de la médula ósea de un ratón adulto que puede diferenciarse en cartílago y tejido adiposo, apoyar la formación de osteoclastos y formar hueso. El clon BMC9 es un ejemplo de una célula progenitora multipotencial derivada de adulto que se sitúa temprano en la línea mesenquimal.},
    url = "https://doi.org/10.1359/jbmr.1999.14.5.700",
    doi = "10.1359/jbmr.1999.14.5.700",
    openalex = "W1986457784"
}

@article{crossref2000announcement,
    title = "ANUNCIO – Fronteras de la Microbiología Celular y Biología Celular",
    year = "2000",
    journal = "Microbial Pathogenesis",
    url = "https://doi.org/10.1006/mpat.2000.0387",
    doi = "10.1006/mpat.2000.0387",
    number = "1",
    openalex = "W4230669699",
    pages = "61",
    volume = "29"
}

Aquí mostramos la identidad del Alamar Blue como resazurina. La 'prueba de reducción de resazurina' se ha utilizado durante aproximadamente 50 años para monitorear la contaminación bacteriana y por levaduras en la leche, y también para evaluar la calidad del semen. La resazurina (azul y no fluorescente) se reduce a resorufina (rosa y altamente fluorescente), la cual se reduce aún más a hidroresorufina (sin color y no fluorescente). Todavía no se sabe cómo ocurre esta reducción, ya sea intracelularmente mediante actividad enzimática o en el medio como una reacción química, aunque se encontró que la forma fluorescente reducida del Alamar Blue se hallaba en el citoplasma y en el núcleo de las células vivas y de las células muertas. Recientemente, el tinte ha ganado popularidad como una forma muy sencilla y versátil de medir la proliferación celular y la citotoxicidad. Este tinte presenta numerosas ventajas sobre otras pruebas de citotoxicidad o proliferación, pero observamos varios inconvenientes en el uso rutinario del Alamar Blue. Pruebas con varios tóxicos en diferentes líneas celulares y hepatocitos primarios de rata han mostrado acumulación del producto fluorescente del Alamar Blue en el medio, lo que podría llevar a una sobreestimación de la población celular. Además, la extensa reducción del Alamar Blue por células metabólicamente activas llevó a un producto final no fluorescente, y por lo tanto a una subestimación de la actividad celular.

@article{doi101046j14321327200001606x,
    author = "O'Brien, John y Wilson, Ian D. y Orton, Terry C. y Pognan, François",
    title = "Investigación del Alamar Blue (resazurina) fluorescente para la evaluación de la citotoxicidad de células mamíferas",
    year = "2000",
    journal = "European Journal of Biochemistry",
    abstract = "Aquí mostramos la identidad del Alamar Blue como resazurina. La 'prueba de reducción de resazurina' se ha utilizado durante aproximadamente 50 años para monitorear la contaminación bacteriana y por levaduras en la leche, y también para evaluar la calidad del semen. La resazurina (azul y no fluorescente) se reduce a resorufina (rosa y altamente fluorescente), la cual se reduce aún más a hidroresorufina (sin color y no fluorescente). Todavía no se sabe cómo ocurre esta reducción, ya sea intracelularmente mediante actividad enzimática o en el medio como una reacción química, aunque se encontró que la forma fluorescente reducida del Alamar Blue se hallaba en el citoplasma y en el núcleo de las células vivas y de las células muertas. Recientemente, el tinte ha ganado popularidad como una forma muy sencilla y versátil de medir la proliferación celular y la citotoxicidad. Este tinte presenta numerosas ventajas sobre otras pruebas de citotoxicidad o proliferación, pero observamos varios inconvenientes en el uso rutinario del Alamar Blue. Pruebas con varios tóxicos en diferentes líneas celulares y hepatocitos primarios de rata han mostrado acumulación del producto fluorescente del Alamar Blue en el medio, lo que podría llevar a una sobreestimación de la población celular. Además, la extensa reducción del Alamar Blue por células metabólicamente activas llevó a un producto final no fluorescente, y por lo tanto a una subestimación de la actividad celular.",
    url = "https://doi.org/10.1046/j.1432-1327.2000.01606.x",
    doi = "10.1046/j.1432-1327.2000.01606.x",
    openalex = "W2154385453"
}

Las células madre neurales existen no solo en el sistema nervioso de mamíferos en desarrollo, sino también en el sistema nervioso adulto de todos los organismos de mamíferos, incluidos los humanos. Las células madre neurales también pueden derivarse de células madre embrionarias más primitivas. La ubicación de las células madre adultas y las regiones cerebrales a las que migran sus descendientes para diferenciarse siguen sin resolverse, aunque el número de ubicaciones viables es limitado en el adulto. Los mecanismos que regulan las células madre endógenas son poco comprendidos. Los usos potenciales de las células madre en la reparación incluyen el trasplante para reparar células faltantes y la activación de células endógenas para proporcionar "autorreparación". Antes de que se pueda realizar el potencial completo de las células madre neurales, necesitamos aprender qué controla su proliferación, así como las diversas vías de diferenciación disponibles para sus células hijas.

@article{doi101126science28754571433,
    author = "Gage, Fred H.",
    title = "Células madre neurales de mamíferos",
    year = "2000",
    journal = "Science",
    abstract = {Las células madre neurales existen no solo en el sistema nervioso de mamíferos en desarrollo, sino también en el sistema nervioso adulto de todos los organismos de mamíferos, incluidos los humanos. Las células madre neurales también pueden derivarse de células madre embrionarias más primitivas. La ubicación de las células madre adultas y las regiones cerebrales a las que migran sus descendientes para diferenciarse siguen sin resolverse, aunque el número de ubicaciones viables es limitado en el adulto. Los mecanismos que regulan las células madre endógenas son poco comprendidos. Los usos potenciales de las células madre en la reparación incluyen el trasplante para reparar células faltantes y la activación de células endógenas para proporcionar "autorreparación". Antes de que se pueda realizar el potencial completo de las células madre neurales, necesitamos aprender qué controla su proliferación, así como las diversas vías de diferenciación disponibles para sus células hijas.},
    url = "https://doi.org/10.1126/science.287.5457.1433",
    doi = "10.1126/science.287.5457.1433",
    openalex = "W2084652820",
    references = "doi101126science2715251978"
}

La deficiencia de estrógeno induce pérdida ósea al aumentar la osteoclastogénesis mediante mecanismos no completamente definidos. Descubrimos que la ovariectomía aumenta la producción de TNF-α por células T, lo cual, actuando a través del receptor p55 de TNF-α, aumenta la osteoclastogénesis inducida por el factor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF) y por RANKL. La ovariectomía no indujo pérdida ósea, estimuló la resorción ósea o aumentó la osteoclastogénesis dependiente de M-CSF y RANKL en ratones deficientes en células T, estableciendo a las células T como mediadores esenciales de los efectos óseos de la deficiencia de estrógeno in vivo. Estos hallazgos demuestran que la capacidad del estrógeno para dirigirse a las células T, suprimiendo su producción de TNF-α, es un mecanismo clave mediante el cual el estrógeno previene la resorción ósea osteoclástica y la pérdida ósea.

@article{doi101172jci11066,
    author = "Cenci, Simone and Weitzmann, M. Neale and Roggia, Cristiana and Namba, Noriyuki and Novack, Deborah V. and Woodring, Jessica and Pacifici, Roberto",
    title = "Estrogen deficiency induces bone loss by enhancing T-cell production of TNF-α",
    year = "2000",
    journal = "Journal of Clinical Investigation",
    abstract = "Estrogen deficiency induces bone loss by upregulating osteoclastogenesis by mechanisms not completely defined. We found that ovariectomy-enhanced T-cell production of TNF-alpha, which, acting through the TNF-alpha receptor p55, augments macrophage colony-stimulating factor-induced (M-CSF-induced) and RANKL-induced osteoclastogenesis. Ovariectomy failed to induce bone loss, stimulate bone resorption, or increase M-CSF- and RANKL-dependent osteoclastogenesis in T-cell deficient mice, establishing T cells as essential mediators of the bone-wasting effects of estrogen deficiency in vivo. These findings demonstrate that the ability of estrogen to target T cells, suppressing their production of TNF-alpha, is a key mechanism by which estrogen prevents osteoclastic bone resorption and bone loss.",
    url = "https://doi.org/10.1172/jci11066",
    doi = "10.1172/jci11066",
    openalex = "W2133281510",
    references = "openalexw1585377912"
}

El esqueleto adulto se regenera mediante estructuras celulares temporales que comprenden equipos de osteoclastos y osteoblastos juxtapuestos y reemplazan periódicamente el hueso viejo con hueso nuevo. Un considerable cuerpo de evidencia acumulado durante la última década ha demostrado que la tasa de génesis de estos dos tipos celulares altamente especializados, así como la prevalencia de su apoptosis, es esencial para el mantenimiento de la homeostasis ósea; y que los trastornos metabólicos óseos comunes, como la osteoporosis, resultan en gran medida de un desorden en el nacimiento o la muerte de estas células. El propósito de este artículo es triple: 1) revisar el papel y el mecanismo molecular de acción de las moléculas reguladoras, como las citoquinas y las hormonas, en el nacimiento y la apoptosis de osteoclastos y osteoblastos; 2) revisar la evidencia sobre la contribución de los cambios en el nacimiento o la muerte de las células óseas a la patogénesis de las formas más comunes de osteoporosis; y 3) destacar las implicaciones del nacimiento y la muerte de las células óseas para una mejor comprensión del mecanismo de acción y la eficacia de los agentes farmacoterapéuticos actuales y futuros para la osteoporosis.

@article{doi101210edrv2120395,
    author = "Manolagas, Stavros C.",
    title = "Nacimiento y muerte de células óseas: mecanismos reguladores básicos e implicaciones para la patogénesis y el tratamiento de la osteoporosis*",
    year = "2000",
    journal = "Endocrine Reviews",
    abstract = "El esqueleto adulto se regenera mediante estructuras celulares temporales que comprenden equipos de osteoclastos y osteoblastos juxtapuestos y reemplazan periódicamente el hueso viejo con hueso nuevo. Un considerable cuerpo de evidencia acumulado durante la última década ha demostrado que la tasa de génesis de estos dos tipos celulares altamente especializados, así como la prevalencia de su apoptosis, es esencial para el mantenimiento de la homeostasis ósea; y que los trastornos metabólicos óseos comunes, como la osteoporosis, resultan en gran medida de un desorden en el nacimiento o la muerte de estas células. El propósito de este artículo es triple: 1) revisar el papel y el mecanismo molecular de acción de las moléculas reguladoras, como las citoquinas y las hormonas, en el nacimiento y la apoptosis de osteoclastos y osteoblastos; 2) revisar la evidencia sobre la contribución de los cambios en el nacimiento o la muerte de las células óseas a la patogénesis de las formas más comunes de osteoporosis; y 3) destacar las implicaciones del nacimiento y la muerte de las células óseas para una mejor comprensión del mecanismo de acción y la eficacia de los agentes farmacoterapéuticos actuales y futuros para la osteoporosis.",
    url = "https://doi.org/10.1210/edrv.21.2.0395",
    doi = "10.1210/edrv.21.2.0395",
    openalex = "W2142820105",
    references = "doi101002jcb240550303"
}

OBJETIVO: Caracterizar células madre mesenquimales (MSCs) de la membrana sinovial (SM) humana. MÉTODOS: Las poblaciones celulares se liberaron enzimáticamente de la SM obtenida de las articulaciones de rodilla de donantes humanos adultos y se expandieron en monocapa con pasajes seriados a confluencia. Los clones celulares se obtuvieron por dilución limitada. En diferentes pasajes, las células derivadas de la SM se sometieron a ensayos in vitro para investigar su potencial multilínea. Tras los tratamientos, los fenotipos de las culturas celulares se analizaron mediante histo- e inmunohistoquímica y mediante reacción en cadena de la polimerasa de transcripción inversa semicuantitativa para la expresión de genes marcadores relacionados con la línea. RESULTADOS: Las células derivadas de la SM pudieron expandirse extensamente en monocapa, con senescencia limitada. Bajo condiciones de cultivo apropiadas, las células derivadas de la SM se indujeron a diferenciarse hacia las líneas condrocito, osteocito y adipocito. También se observó miogénesis esporádica. Cinco clones celulares independientes mostraron potencial multilínea. Curiosamente, solo 1 clon fue miogénico. La edad del donante, el pasaje celular y la criopreservación no afectaron el potencial multilínea de las células derivadas de la SM. En contraste, los fibroblastos dérmicos normales bajo las mismas condiciones de cultivo no mostraron este potencial. CONCLUSIÓN: Nuestro estudio demuestra que las MSCs humanas multipotentes pueden aislarse de la SM de las articulaciones de rodilla. Estas células tienen la capacidad de proliferar extensamente en cultivo y mantienen su potencial de diferenciación multilínea in vitro, estableciendo su naturaleza de célula progenitora. Las MSCs derivadas de la SM pueden desempeñar un papel en la respuesta regenerativa durante enfermedades artríticas y son candidatos prometedores para el desarrollo de nuevos enfoques terapéuticos basados en células para la reparación del tejido esquelético postnatal.

@article{doi101002152901312001084481928aidart33130co2p,
    author = "Bari, Cosimo De y Dell’Accio, Francesco y Tylzanowski, Przemyslaw y Luyten, Frank P.",
    title = "Células madre mesenquimales multipotentes de la membrana sinovial humana adulta",
    year = "2001",
    journal = "Arthritis \& Rheumatism",
    abstract = "OBJETIVO: Caracterizar células madre mesenquimales (MSCs) de la membrana sinovial (SM) humana. MÉTODOS: Las poblaciones celulares se liberaron enzimáticamente de la SM obtenida de las articulaciones de rodilla de donantes humanos adultos y se expandieron en monocapa con pasajes seriados a confluencia. Los clones celulares se obtuvieron por dilución limitada. En diferentes pasajes, las células derivadas de la SM se sometieron a ensayos in vitro para investigar su potencial multilínea. Tras los tratamientos, los fenotipos de las culturas celulares se analizaron mediante histo- e inmunohistoquímica y mediante reacción en cadena de la polimerasa de transcripción inversa semicuantitativa para la expresión de genes marcadores relacionados con la línea. RESULTADOS: Las células derivadas de la SM pudieron expandirse extensamente en monocapa, con senescencia limitada. Bajo condiciones de cultivo apropiadas, las células derivadas de la SM se indujeron a diferenciarse hacia las líneas condrocito, osteocito y adipocito. También se observó miogénesis esporádica. Cinco clones celulares independientes mostraron potencial multilínea. Curiosamente, solo 1 clon fue miogénico. La edad del donante, el pasaje celular y la criopreservación no afectaron el potencial multilínea de las células derivadas de la SM. En contraste, los fibroblastos dérmicos normales bajo las mismas condiciones de cultivo no mostraron este potencial. CONCLUSIÓN: Nuestro estudio demuestra que las MSCs humanas multipotentes pueden aislarse de la SM de las articulaciones de rodilla. Estas células tienen la capacidad de proliferar extensamente en cultivo y mantienen su potencial de diferenciación multilínea in vitro, estableciendo su naturaleza de célula progenitora. Las MSCs derivadas de la SM pueden desempeñar un papel en la respuesta regenerativa durante enfermedades artríticas y son candidatos prometedores para el desarrollo de nuevos enfoques terapéuticos basados en células para la reparación del tejido esquelético postnatal.",
    url = "https://doi.org/10.1002/1529-0131(200108)44:8<1928::aid-art331>3.0.co;2-p",
    doi = "10.1002/1529-0131(200108)44:8<1928::aid-art331>3.0.co;2-p",
    openalex = "W2000097208",
    references = "doi101242jcs11371161"
}

@article{doi101016s0891584900004986,
    author = "Ishige, Kumiko y Schubert, David y Sagara, Yutaka",
    title = "Los flavonoides protegen a las células neuronales del estrés oxidativo mediante tres mecanismos distintos",
    year = "2001",
    journal = "Free Radical Biology and Medicine",
    url = "https://doi.org/10.1016/s0891-5849(00)00498-6",
    doi = "10.1016/s0891-5849(00)00498-6",
    openalex = "W2133971230",
    references = "doi101046j14714159199769020581x"
}

@article{doi101016s0891584901004804,
    author = "Schäfer, Freya y Buettner, Garry R.",
    title = "Entorno redox de la célula visto a través del estado redox del par glutatión disulfuro/glutatión",
    year = "2001",
    journal = "Free Radical Biology and Medicine",
    url = "https://doi.org/10.1016/s0891-5849(01)00480-4",
    doi = "10.1016/s0891-5849(01)00480-4",
    openalex = "W2132878122"
}

Gran parte del trabajo realizado sobre células madre adultas se ha centrado en las células madre mesenquimales (MSC) encontradas dentro del estroma de la médula ósea. El tejido adiposo, al igual que la médula ósea, se deriva del mesénquima embrionario y contiene un estroma que se puede aislar fácilmente. Estudios preliminares han identificado recientemente una población supuesta de células madre dentro del compartimento estromal adiposo. Esta población celular, denominada células de lipoaspirado procesado (PLA), puede aislarse de los lipoaspirados humanos y, al igual que las MSC, diferenciarse hacia las líneas osteogénicas, adipogénicas, miogénicas y condrogénicas. Para confirmar si el tejido adiposo contiene células madre, la población PLA y múltiples aislados clonales se analizaron utilizando varios enfoques moleculares y bioquímicos. Las células PLA expresaron múltiples antígenos marcadores CD similares a los observados en las MSC. La inducción de la línea mesodérmica de células PLA y clones resultó en la expresión de múltiples genes y proteínas específicos de la línea. Además, el análisis bioquímico también confirmó la actividad específica de la línea. Además de la capacidad mesodérmica, las células PLA y clones se diferenciaron en células supuestas neurogénicas, exhibiendo una morfología neuronal y expresando varias proteínas consistentes con el fenotipo neuronal. Finalmente, las células PLA exhibieron características únicas distintas de las observadas en las MSC, incluidas diferencias en el perfil de marcadores CD y la expresión génica.

@article{doi101091mbce02020105,
    author = "Zuk, Patricia A. y Zhu, Min y Ashjian, Peter y Ugarte, Daniel A. De y Huang, Jerry I. y Mizuno, Hiroshi y Alfonso, Zeni C. y Fraser, John K. y Benhaim, Prosper y Hedrick, Marc H.",
    title = "El tejido adiposo humano es una fuente de células madre multipotentes",
    year = "2002",
    journal = "Biología molecular de la célula",
    abstract = "Gran parte del trabajo realizado sobre células madre adultas se ha centrado en las células madre mesenquimales (MSC) encontradas dentro del estroma de la médula ósea. El tejido adiposo, al igual que la médula ósea, se deriva del mesénquima embrionario y contiene un estroma que se puede aislar fácilmente. Estudios preliminares han identificado recientemente una población supuesta de células madre dentro del compartimento estromal adiposo. Esta población celular, denominada células de lipoaspirado procesado (PLA), puede aislarse de los lipoaspirados humanos y, al igual que las MSC, diferenciarse hacia las líneas osteogénicas, adipogénicas, miogénicas y condrogénicas. Para confirmar si el tejido adiposo contiene células madre, la población PLA y múltiples aislados clonales se analizaron utilizando varios enfoques moleculares y bioquímicos. Las células PLA expresaron múltiples antígenos marcadores CD similares a los observados en las MSC. La inducción de la línea mesodérmica de células PLA y clones resultó en la expresión de múltiples genes y proteínas específicos de la línea. Además, el análisis bioquímico también confirmó la actividad específica de la línea. Además de la capacidad mesodérmica, las células PLA y clones se diferenciaron en células supuestas neurogénicas, exhibiendo una morfología neuronal y expresando varias proteínas consistentes con el fenotipo neuronal. Finalmente, las células PLA exhibieron características únicas distintas de las observadas en las MSC, incluidas diferencias en el perfil de marcadores CD y la expresión génica.",
    url = "https://doi.org/10.1091/mbc.e02-02-0105",
    doi = "10.1091/mbc.e02-02-0105",
    openalex = "W2107503723",
    references = "doi101159000452856, doi101242jcs11371161"
}

En concentraciones altas, los radicales libres y las especies reactivas no radicales derivadas de radicales son peligrosas para los organismos vivos y dañan todos los constituyentes celulares principales. Sin embargo, en concentraciones moderadas, el óxido nítrico (NO), el anión superóxido y las especies reactivas de oxígeno (ROS) relacionadas desempeñan un papel importante como mediadores reguladores en los procesos de señalización. Muchas de las respuestas mediadas por ROS protegen en realidad a las células contra el estrés oxidativo y restablecen la "homeostasis redox". Los organismos superiores, sin embargo, han evolucionado el uso de NO y ROS también como moléculas de señalización para otras funciones fisiológicas. Estas incluyen la regulación del tono vascular, el monitoreo de la tensión de oxígeno en el control de la ventilación y la producción de eritropoyetina, y la transducción de señales desde receptores de membrana en diversos procesos fisiológicos. El NO y las ROS se generan típicamente en estos casos por enzimas estrictamente reguladas como la óxido nítrico sintasa (NOS) y las isoformas de la NAD(P)H oxidasa, respectivamente. En una proteína de señalización dada, el ataque oxidativo induce tanto una pérdida de función, un aumento de función, como un cambio a una función diferente. Cantidades excesivas de ROS pueden surgir tanto por una estimulación excesiva de las NAD(P)H oxidasas como de fuentes menos bien reguladas, como la cadena de transporte de electrones mitocondrial. En las mitocondrias, las ROS se generan como subproductos no deseados del metabolismo energético oxidativo. Un aumento excesivo y/o sostenido en la producción de ROS ha sido implicado en la patogénesis del cáncer, la diabetes mellitus, la aterosclerosis, las enfermedades neurodegenerativas, la artritis reumatoide, la isquemia/reperfusión, la apnea obstructiva del sueño y otras enfermedades. Además, los radicales libres han sido implicados en el mecanismo de la senescencia. Que el proceso de envejecimiento pueda resultar, al menos en parte, del daño oxidativo mediado por radicales fue propuesto hace más de 40 años por Harman (J Gerontol 11: 298-300, 1956). Hay evidencia creciente de que el envejecimiento implica, además, cambios progresivos en los procesos reguladores mediados por radicales libres que resultan en una expresión génica alterada.

@article{doi101152physrev000182001,
    author = "Dröge, Wulf",
    title = "Free Radicals in the Physiological Control of Cell Function",
    year = "2002",
    journal = "Physiological Reviews",
    abstract = {At high concentrations, free radicals and radical-derived, nonradical reactive species are hazardous for living organisms and damage all major cellular constituents. At moderate concentrations, however, nitric oxide (NO), superoxide anion, and related reactive oxygen species (ROS) play an important role as regulatory mediators in signaling processes. Many of the ROS-mediated responses actually protect the cells against oxidative stress and reestablish "redox homeostasis." Higher organisms, however, have evolved the use of NO and ROS also as signaling molecules for other physiological functions. These include regulation of vascular tone, monitoring of oxygen tension in the control of ventilation and erythropoietin production, and signal transduction from membrane receptors in various physiological processes. NO and ROS are typically generated in these cases by tightly regulated enzymes such as NO synthase (NOS) and NAD(P)H oxidase isoforms, respectively. In a given signaling protein, oxidative attack induces either a loss of function, a gain of function, or a switch to a different function. Excessive amounts of ROS may arise either from excessive stimulation of NAD(P)H oxidases or from less well-regulated sources such as the mitochondrial electron-transport chain. In mitochondria, ROS are generated as undesirable side products of the oxidative energy metabolism. An excessive and/or sustained increase in ROS production has been implicated in the pathogenesis of cancer, diabetes mellitus, atherosclerosis, neurodegenerative diseases, rheumatoid arthritis, ischemia/reperfusion injury, obstructive sleep apnea, and other diseases. In addition, free radicals have been implicated in the mechanism of senescence. That the process of aging may result, at least in part, from radical-mediated oxidative damage was proposed more than 40 years ago by Harman (J Gerontol 11: 298-300, 1956). There is growing evidence that aging involves, in addition, progressive changes in free radical-mediated regulatory processes that result in altered gene expression.},
    url = "https://doi.org/10.1152/physrev.00018.2001",
    doi = "10.1152/physrev.00018.2001",
    openalex = "W2147993424",
    references = "doi101016030636239190478o, doi10103835021000, doi101093emboj1851321"
}

@article{doi101016jbiocel200311001,
    author = "Barry, Frank y Murphy, Mary",
    title = "Células madre mesenquimales: aplicaciones clínicas y caracterización biológica",
    year = "2004",
    journal = "The International Journal of Biochemistry \& Cell Biology",
    url = "https://doi.org/10.1016/j.biocel.2003.11.001",
    doi = "10.1016/j.biocel.2003.11.001",
    openalex = "W2016931709",
    references = "doi101242jcs11371161"
}

@article{doi101016jtcb200411009,
    author = "McIntosh, Richard y Nicastro, Daniela y Mastronarde, David N.",
    title = "Nuevas perspectivas de las células en 3D: una introducción a la tomografía electrónica",
    year = "2004",
    journal = "Trends in Cell Biology",
    url = "https://doi.org/10.1016/j.tcb.2004.11.009",
    doi = "10.1016/j.tcb.2004.11.009",
    openalex = "W2145778422"
}

@article{doi101016s1534580704000759,
    author = "McBeath, Rowena y Pirone, Dana M. y Nelson, Celeste M. y Bhadriraju, Kiran y Chen, Christopher S.",
    title = "La forma celular, la tensión del citoesqueleto y RhoA regulan el compromiso de la línea celular de las células madre",
    year = "2004",
    journal = "Developmental Cell",
    url = "https://doi.org/10.1016/s1534-5807(04)00075-9",
    doi = "10.1016/s1534-5807(04)00075-9",
    openalex = "W2144023435",
    references = "doi101007bf02406145, doi101016s0142961201000023, doi1015159780691183978018"
}

@article{doi101038nrg1272,
    author = "Barabási, Albert-Ĺaszló y Oltvai, Zoltán N.",
    title = "Network biology: understanding the cell's functional organization",
    year = "2004",
    journal = "Nature Reviews Genetics",
    url = "https://doi.org/10.1038/nrg1272",
    doi = "10.1038/nrg1272",
    openalex = "W2163480486",
    references = "doi101073pnas122653799, doi101103revmodphys7447, doi101126science1073374"
}

Las células madre mesenquimales (MSCs) representan una población de células madre presente en tejidos adultos que pueden aislarse, expandirse en cultivo y caracterizarse in vitro e in vivo. Las MSCs se diferencian fácilmente en condrocitos, adipocitos, osteocitos y pueden apoyar células madre hematopoyéticas o células madre embrionarias en cultivo. La evidencia sugiere que las MSCs también pueden expresar características fenotípicas de células endoteliales, neuronales, músculo liso, mioblastos esqueléticos y miocitos cardíacos. Cuando se introducen en el corazón infartado, las MSCs previenen la remodelación deletérea y mejoran la recuperación, aunque aún se necesita una mayor comprensión de la diferenciación de las MSCs en el tejido cicatricial cardíaco. Las MSCs se han inyectado directamente en el infarto o se han administrado por vía intravenosa y se ha observado que se dirigen al sitio de la lesión. El examen de la interacción de las MSCs alogénicas con células del sistema inmunológico indica un rechazo mínimo por parte de los linfocitos T. La persistencia de las MSCs alogénicas in vivo sugiere su potencial uso terapéutico "listo para usar" para múltiples receptores. El uso clínico de las MSCs humanas cultivadas (hMSCs) ha comenzado para pacientes con cáncer, y los receptores han recibido MSCs autólogas o alogénicas. La investigación continúa apoyando las características deseables de las MSCs para el desarrollo de terapéuticos celulares para muchos tejidos, incluido el sistema cardiovascular. En resumen, las hMSCs aisladas de la médula ósea adulta proporcionan un excelente modelo para el desarrollo de terapéuticos de células madre, y su potencial uso en el sistema cardiovascular está actualmente bajo investigación en entornos de laboratorio y clínicos.

@article{doi10116101res0000135902993836f,
    author = "Pittenger, Mark F. y Martin, Bradley J.",
    title = "Células madre mesenquimales y su potencial como terapéuticos cardíacos",
    year = "2004",
    journal = "Circulation Research",
    abstract = {Las células madre mesenquimales (MSCs) representan una población de células madre presente en tejidos adultos que pueden aislarse, expandirse en cultivo y caracterizarse in vitro e in vivo. Las MSCs se diferencian fácilmente en condrocitos, adipocitos, osteocitos y pueden apoyar células madre hematopoyéticas o células madre embrionarias en cultivo. La evidencia sugiere que las MSCs también pueden expresar características fenotípicas de células endoteliales, neuronales, músculo liso, mioblastos esqueléticos y miocitos cardíacos. Cuando se introducen en el corazón infartado, las MSCs previenen la remodelación deletérea y mejoran la recuperación, aunque aún se necesita una mayor comprensión de la diferenciación de las MSCs en el tejido cicatricial cardíaco. Las MSCs se han inyectado directamente en el infarto o se han administrado por vía intravenosa y se ha observado que se dirigen al sitio de la lesión. El examen de la interacción de las MSCs alogénicas con células del sistema inmunológico indica un rechazo mínimo por parte de los linfocitos T. La persistencia de las MSCs alogénicas in vivo sugiere su potencial uso terapéutico "listo para usar" para múltiples receptores. El uso clínico de las MSCs humanas cultivadas (hMSCs) ha comenzado para pacientes con cáncer, y los receptores han recibido MSCs autólogas o alogénicas. La investigación continúa apoyando las características deseables de las MSCs para el desarrollo de terapéuticos celulares para muchos tejidos, incluido el sistema cardiovascular. En resumen, las hMSCs aisladas de la médula ósea adulta proporcionan un excelente modelo para el desarrollo de terapéuticos de células madre, y su potencial uso en el sistema cardiovascular está actualmente bajo investigación en entornos de laboratorio y clínicos.},
    url = "https://doi.org/10.1161/01.res.0000135902.99383.6f",
    doi = "10.1161/01.res.0000135902.99383.6f",
    openalex = "W2154502936",
    references = "doi101242jcs11371161"
}

Las células madre mesenquimales (MSCs) son células multipotentes encontradas en varios tejidos adultos. Las MSCs alogénicas trasplantadas pueden detectarse en los receptores en puntos de tiempo extendidos, indicando una falta de reconocimiento y eliminación inmunológica. Además, recientemente se ha informado sobre el papel de las MSCs derivadas de la médula ósea en la reducción de la incidencia y severidad de la enfermedad del injerto contra el huésped (GVHD) durante el trasplante alogénico; sin embargo, los mecanismos siguen por investigar. Examinamos las funciones inmunomoduladoras de las MSCs humanas (hMSCs) mediante la co-cultivación con subpoblaciones purificadas de células inmunitarias y reportamos aquí que las hMSCs alteraron el perfil de secreción de citoquinas de las células dendríticas (DCs), linfocitos T vírgenes y efectoras (ayudantes T1 [T(H)1] y T(H)2), y células asesinas naturales (NK) para inducir un fenotipo más antiinflamatorio o tolerante. Específicamente, las hMSCs causaron que las DCs maduras tipo 1 (DC1) disminuyeran la secreción de factor de necrosis tumoral alfa (TNF-alfa) y que las DC2 maduras aumentaran la secreción de interleucina-10 (IL-10); las hMSCs causaron que las células T(H)1 disminuyeran la interferón gamma (IFN-gamma) y que las células T(H)2 aumentaran la secreción de IL-4; las hMSCs causaron un aumento en la proporción de células T reguladoras (T(Regs)) presentes; y las hMSCs disminuyeron la secreción de IFN-gamma de las células NK. Mecánicamente, las hMSCs produjeron prostaglandina E2 (PGE(2)) elevada en co-cultivos, e inhibidores de la producción de PGE(2) mitigaron la modulación inmunológica mediada por hMSCs. Estos datos ofrecen información sobre las interacciones entre las MSCs alogénicas y las células inmunitarias y proporcionan mecanismos probablemente involucrados en la inducción de tolerancia mediada por MSCs in vivo que podría ser terapéutica para la reducción de GVHD, rechazo y modulación de la inflamación.

@article{doi101182blood2004041559,
    author = "Aggarwal, Sudeepta y Pittenger, Mark F.",
    title = "Las células madre mesenquimales humanas modulan las respuestas de células inmunitarias alogénicas",
    year = "2004",
    journal = "Blood",
    abstract = "Las células madre mesenquimales (MSCs) son células multipotentes encontradas en varios tejidos adultos. Las MSCs alogénicas trasplantadas pueden detectarse en los receptores en puntos de tiempo extendidos, indicando una falta de reconocimiento y eliminación inmunológica. Además, recientemente se ha informado sobre el papel de las MSCs derivadas de la médula ósea en la reducción de la incidencia y severidad de la enfermedad del injerto contra el huésped (GVHD) durante el trasplante alogénico; sin embargo, los mecanismos siguen por investigar. Examinamos las funciones inmunomoduladoras de las MSCs humanas (hMSCs) mediante la co-cultivación con subpoblaciones purificadas de células inmunitarias y reportamos aquí que las hMSCs alteraron el perfil de secreción de citoquinas de las células dendríticas (DCs), linfocitos T vírgenes y efectoras (ayudantes T1 [T(H)1] y T(H)2), y células asesinas naturales (NK) para inducir un fenotipo más antiinflamatorio o tolerante. Específicamente, las hMSCs causaron que las DCs maduras tipo 1 (DC1) disminuyeran la secreción de factor de necrosis tumoral alfa (TNF-alfa) y que las DC2 maduras aumentaran la secreción de interleucina-10 (IL-10); las hMSCs causaron que las células T(H)1 disminuyeran la interferón gamma (IFN-gamma) y que las células T(H)2 aumentaran la secreción de IL-4; las hMSCs causaron un aumento en la proporción de células T reguladoras (T(Regs)) presentes; y las hMSCs disminuyeron la secreción de IFN-gamma de las células NK. Mecánicamente, las hMSCs produjeron prostaglandina E2 (PGE(2)) elevada en co-cultivos, e inhibidores de la producción de PGE(2) mitigaron la modulación inmunológica mediada por hMSCs. Estos datos ofrecen información sobre las interacciones entre las MSCs alogénicas y las células inmunitarias y proporcionan mecanismos probablemente involucrados en la inducción de tolerancia mediada por MSCs in vivo que podría ser terapéutica para la reducción de GVHD, rechazo y modulación de la inflamación.",
    url = "https://doi.org/10.1182/blood-2004-04-1559",
    doi = "10.1182/blood-2004-04-1559",
    openalex = "W2095666785",
    references = "doi101242jcs11371161"
}

@article{doi101016jcell200508020,
    author = "Boyer, Laurie A. y Lee, Tong Ihn y Cole, Megan F. y Johnstone, Sarah E. y Levine, Stuart S. y Zucker, Jacob y Guenther, Matthew G. y Kumar, Roshan y Murray, Heather L. y Jenner, Richard G. y Gifford, David K. y Melton, Douglas A. y Jaenisch, Rudolf y Young, Richard A.",
    title = "Circuitría regulatoria transcripcional central en células madre embrionarias humanas",
    year = "2005",
    journal = "Cell",
    url = "https://doi.org/10.1016/j.cell.2005.08.020",
    doi = "10.1016/j.cell.2005.08.020",
    openalex = "W2107575419"
}

@misc{doi101016s1387265605110047,
    author = "Berridge, Michael V. y Herst, Patries M. y Tan, An S.",
    title = "Colorantes de tetrazolio como herramientas en biología celular: Nuevas perspectivas sobre su reducción celular",
    year = "2005",
    booktitle = "Revisión anual de biotecnología",
    url = "https://doi.org/10.1016/s1387-2656(05)11004-7",
    doi = "10.1016/s1387-2656(05)11004-7",
    openalex = "W1849819493",
    references = "doi101001jama195302940280072039, doi101006abbi19931311, doi1010160003269771903708, doi1010160022175983903034, doi101016030636239190478o, doi101038nri1312, doi101046j14714159199769020581x, doi101093jnci82131113, doi103727095535491820873191, openalexw2143811153"
}

Las células madre adultas proporcionan descendientes de reemplazo y reparación para el recambio normal o tejidos lesionados. Estas células han sido aisladas y expandidas en cultivo, y su uso para estrategias terapéuticas requiere tecnologías aún no perfeccionadas. En la década de 1970, el sistema de cultivo de células mesenquimales del brote apendicular embrionario de pollo proporcionó datos sobre la diferenciación de cartílago, hueso y músculo. En la década de 1980, utilizamos este sistema de células del brote apendicular como ensayo para la purificación de factores inductores en el hueso. En la década de 1990, utilizamos la experiencia ganada con células progenitoras mesenquimales embrionarias en cultivo para desarrollar la tecnología para aislar, expandir y preservar la capacidad de células madre mesenquimales derivadas de la médula ósea adulta (MSCs). La década de 1990 nos llevó al nuevo campo de la ingeniería de tejidos, donde utilizamos MSCs con vehículos de entrega específicos del sitio para reparar cartílago, hueso, tendón, estroma de médula, músculo y otros tejidos conectivos. A principios del siglo XXI, hemos realizado avances sustanciales: el más importante es el desarrollo de una tecnología de recubrimiento celular, llamada pintura, que nos permite introducir proteínas informativas en la superficie externa de las células. Estas pinturas pueden servir como direcciones de direccionamiento para acoplar específicamente MSCs u otras células reparadoras a direcciones de tejido únicas. El desafío científico y clínico permanece: perfeccionar los protocolos de ingeniería de tejidos basados en células para utilizar las propias capacidades de rejuvenecimiento del cuerpo mediante la gestión de implantes quirúrgicos de andamios, factores bioactivos y células reparadoras para regenerar tejidos óseos dañados o enfermos.

@article{doi101089ten2005111198,
    author = "Caplan, Arnold I.",
    title = "Revisión: Células madre mesenquimales: Terapia reconstructiva basada en células en ortopedia",
    year = "2005",
    journal = "Ingeniería de tejidos",
    abstract = "Las células madre adultas proporcionan descendientes de reemplazo y reparación para el recambio normal o tejidos lesionados. Estas células han sido aisladas y expandidas en cultivo, y su uso para estrategias terapéuticas requiere tecnologías aún no perfeccionadas. En la década de 1970, el sistema de cultivo de células mesenquimales del brote apendicular embrionario de pollo proporcionó datos sobre la diferenciación de cartílago, hueso y músculo. En la década de 1980, utilizamos este sistema de células del brote apendicular como ensayo para la purificación de factores inductores en el hueso. En la década de 1990, utilizamos la experiencia ganada con células progenitoras mesenquimales embrionarias en cultivo para desarrollar la tecnología para aislar, expandir y preservar la capacidad de células madre mesenquimales derivadas de la médula ósea adulta (MSCs). La década de 1990 nos llevó al nuevo campo de la ingeniería de tejidos, donde utilizamos MSCs con vehículos de entrega específicos del sitio para reparar cartílago, hueso, tendón, estroma de médula, músculo y otros tejidos conectivos. A principios del siglo XXI, hemos realizado avances sustanciales: el más importante es el desarrollo de una tecnología de recubrimiento celular, llamada pintura, que nos permite introducir proteínas informativas en la superficie externa de las células. Estas pinturas pueden servir como direcciones de direccionamiento para acoplar específicamente MSCs u otras células reparadoras a direcciones de tejido únicas. El desafío científico y clínico permanece: perfeccionar los protocolos de ingeniería de tejidos basados en células para utilizar las propias capacidades de rejuvenecimiento del cuerpo mediante la gestión de implantes quirúrgicos de andamios, factores bioactivos y células reparadoras para regenerar tejidos óseos dañados o enfermos.",
    url = "https://doi.org/10.1089/ten.2005.11.1198",
    doi = "10.1089/ten.2005.11.1198",
    openalex = "W2013970253",
    references = "doi101126science6403986"
}

La tomografía electrónica (ET) es única para obtener reconstrucciones tridimensionales de estructuras pleomorfas, como células, orgánulos o ensamblajes supramoleculares. Aunque los principios de la ET se conocen desde hace décadas, su uso ha ganado impulso solo en los últimos años, gracias a los avances tecnológicos y a su combinación con técnicas mejoradas de preparación de muestras. La preparación de congelación rápida/congelación-sustitución es aplicable a células y tejidos enteros, y es el método de elección para las investigaciones de ET sobre la ultraestructura celular. La preparación de congelación-hidratación proporciona la mejor preservación estructural posible y permite la imagen de moléculas, complejos y ensamblajes supramoleculares en su estado nativo y su entorno natural. Libre de artefactos de tinción y fijación química, la criotomografía electrónica proporciona una representación fiel tanto de la superficie como de la estructura interna de las moléculas. En combinación con métodos computacionales avanzados, como la identificación molecular basada en técnicas de reconocimiento de patrones, la criotomografía electrónica es actualmente el enfoque más prometedor para mapear exhaustivamente la arquitectura de macromoléculas dentro de tomogramas celulares.

@article{doi101146annurevbiochem73011303074112,
    author = "Lučić, Vladan and Förster, Friedrich and Baumeister, Wolfgang",
    title = "ESTUDIOS ESTRUCTURALES POR TOMOGRAFÍA ELECTRÓNICA: De Células a Moléculas",
    year = "2005",
    journal = "Annual Review of Biochemistry",
    abstract = "La tomografía electrónica (ET) es única para obtener reconstrucciones tridimensionales de estructuras pleomorfas, como células, orgánulos o ensamblajes supramoleculares. Aunque los principios de la ET se conocen desde hace décadas, su uso ha ganado impulso solo en los últimos años, gracias a los avances tecnológicos y a su combinación con técnicas mejoradas de preparación de muestras. La preparación de congelación rápida/congelación-sustitución es aplicable a células y tejidos enteros, y es el método de elección para las investigaciones de ET sobre la ultraestructura celular. La preparación de congelación-hidratación proporciona la mejor preservación estructural posible y permite la imagen de moléculas, complejos y ensamblajes supramoleculares en su estado nativo y su entorno natural. Libre de artefactos de tinción y fijación química, la criotomografía electrónica proporciona una representación fiel tanto de la superficie como de la estructura interna de las moléculas. En combinación con métodos computacionales avanzados, como la identificación molecular basada en técnicas de reconocimiento de patrones, la criotomografía electrónica es actualmente el enfoque más prometedor para mapear exhaustivamente la arquitectura de macromoléculas dentro de tomogramas celulares.",
    url = "https://doi.org/10.1146/annurev.biochem.73.011303.074112",
    doi = "10.1146/annurev.biochem.73.011303.074112",
    openalex = "W2123176293"
}

La senescencia celular suprime el cáncer al detener las células en riesgo de tumorigénesis maligna. Sin embargo, las células senescentes también secretan moléculas que pueden estimular a las células premalignas para que proliferen y formen tumores, lo que sugiere que la respuesta de senescencia es pleiotrópica antagónica. Mostramos que las células epiteliales mamarias premalignas expuestas a fibroblastos humanos senescentes en ratones pierden irreversiblemente las propiedades diferenciadas, se vuelven invasivas y experimentan una transformación maligna completa. Además, utilizando fibroblastos de ratón o humanos cultivados y células epiteliales mamarias no malignas, mostramos que los fibroblastos senescentes interrumpen la morfogénesis alveolar epitelial, la diferenciación funcional y la morfogénesis de ramificación. Además, identificamos MMP-3 como el factor principal responsable de los efectos de los fibroblastos senescentes sobre la morfogénesis de ramificación. Nuestros hallazgos apoyan la idea de que las células senescentes contribuyen a la patología relacionada con la edad, incluido el cáncer, y describen una nueva propiedad de los fibroblastos senescentes: la capacidad de alterar la diferenciación epitelial, lo que también podría explicar la pérdida de función y organización tisular que es una característica distintiva del envejecimiento.

@article{doi101242jcs01635,
    author = "Parrinello, Simona y Coppé, Jean‐Philippe y Krtolica, Ana y Campisi, Judith",
    title = "Interacciones estroma-epiteliales en el envejecimiento y el cáncer: fibroblastos senescentes alteran la diferenciación de células epiteliales",
    year = "2005",
    journal = "Journal of Cell Science",
    abstract = "La senescencia celular suprime el cáncer al detener las células en riesgo de tumorigénesis maligna. Sin embargo, las células senescentes también secretan moléculas que pueden estimular a las células premalignas para que proliferen y formen tumores, lo que sugiere que la respuesta de senescencia es pleiotrópica antagónica. Mostramos que las células epiteliales mamarias premalignas expuestas a fibroblastos humanos senescentes en ratones pierden irreversiblemente las propiedades diferenciadas, se vuelven invasivas y experimentan una transformación maligna completa. Además, utilizando fibroblastos de ratón o humanos cultivados y células epiteliales mamarias no malignas, mostramos que los fibroblastos senescentes interrumpen la morfogénesis alveolar epitelial, la diferenciación funcional y la morfogénesis de ramificación. Además, identificamos MMP-3 como el factor principal responsable de los efectos de los fibroblastos senescentes sobre la morfogénesis de ramificación. Nuestros hallazgos apoyan la idea de que las células senescentes contribuyen a la patología relacionada con la edad, incluido el cáncer, y describen una nueva propiedad de los fibroblastos senescentes: la capacidad de alterar la diferenciación epitelial, lo que también podría explicar la pérdida de función y organización tisular que es una característica distintiva del envejecimiento.",
    url = "https://doi.org/10.1242/jcs.01635",
    doi = "10.1242/jcs.01635",
    openalex = "W2128668256",
    references = "doi103727095535491820873191"
}

@article{doi101016jcell200607024,
    author = "Takahashi, Kazutoshi y Yamanaka, Shinya",
    title = "Inducción de Células Madre Pluripotentes a partir de Culturas de Fibroblastos de Embrión y Adulto de Ratón Mediante Factores Definidos",
    year = "2006",
    journal = "Cell",
    url = "https://doi.org/10.1016/j.cell.2006.07.024",
    doi = "10.1016/j.cell.2006.07.024",
    openalex = "W2125987139",
    references = "doi101016037811199190434d, doi101016jcell200508020, doi101016s0092867400817699, doi101016s0092867403003921, doi101016s0092867403003933, doi101038292154a0, doi101038385810a0, doi10103874199, doi101073pnas78127634, doi101126science28253911145"
}

Debido a los fuertes campos eléctricos en la superficie, la absorción y dispersión de la radiación electromagnética por nanopartículas de metales nobles se ven fuertemente potenciadas. Estas propiedades únicas ofrecen el potencial de diseñar nuevos reactivos ópticamente activos para la imagen molecular y la terapia fototérmica contra el cáncer simultáneamente. Es deseable utilizar agentes que sean activos en la región del infrarrojo cercano (NIR) del espectro de radiación para minimizar la extinción de la luz por cromóforos intrínsecos en el tejido nativo. Las nanorodas de oro con relaciones de aspecto adecuadas (longitud dividida por ancho) pueden absorber y dispersar fuertemente en la región del NIR (650-900 nm). En el presente trabajo, proporcionamos una demostración in vitro de las nanorodas de oro como nuevos agentes de contraste tanto para la imagen molecular como para la terapia fototérmica contra el cáncer. Las nanorodas se sintetizan y se conjugan con anticuerpos monoclonales anti-receptor de factor de crecimiento epidérmico (anti-EGFR) e incuban en cultivos celulares con una línea celular epitelial no maligna (HaCat) y dos líneas celulares epiteliales orales malignas (HOC 313 clone 8 y HSC 3). Las nanorodas conjugadas con anticuerpos anti-EGFR se unen específicamente a la superficie de las células de tipo maligno con una afinidad mucho mayor debido a la sobreexpresión de EGFR en la membrana citoplasmática de las células malignas. Como resultado de la fuerte dispersión de luz roja de las nanorodas de oro en campo oscuro, observada mediante un microscopio de laboratorio, las células malignas se visualizan y diagnostican claramente a partir de las células no malignas. Se ha encontrado que, después de la exposición a un láser rojo continuo a 800 nm, las células malignas requieren aproximadamente la mitad de la energía del láser para ser destruidas fototérmicamente en comparación con las células no malignas. Por lo tanto, tanto el diagnóstico eficiente de células cancerosas como la terapia fototérmica selectiva se realizan simultáneamente.

@article{doi101021ja057254a,
    author = "Huang, Xiaohua and El‐Sayed, Ivan H. and Qian, Wei and El‐Sayed, Mostafa A.",
    title = "Cancer Cell Imaging and Photothermal Therapy in the Near-Infrared Region by Using Gold Nanorods",
    year = "2006",
    journal = "Journal of the American Chemical Society",
    abstract = "Debido a los fuertes campos eléctricos en la superficie, la absorción y dispersión de la radiación electromagnética por nanopartículas de metales nobles se ven fuertemente potenciadas. Estas propiedades únicas ofrecen el potencial de diseñar nuevos reactivos ópticamente activos para la imagen molecular y la terapia fototérmica contra el cáncer simultáneamente. Es deseable utilizar agentes que sean activos en la región del infrarrojo cercano (NIR) del espectro de radiación para minimizar la extinción de la luz por cromóforos intrínsecos en el tejido nativo. Las nanorodas de oro con relaciones de aspecto adecuadas (longitud dividida por ancho) pueden absorber y dispersar fuertemente en la región del NIR (650-900 nm). En el presente trabajo, proporcionamos una demostración in vitro de las nanorodas de oro como nuevos agentes de contraste tanto para la imagen molecular como para la terapia fototérmica contra el cáncer. Las nanorodas se sintetizan y se conjugan con anticuerpos monoclonales anti-receptor de factor de crecimiento epidérmico (anti-EGFR) e incuban en cultivos celulares con una línea celular epitelial no maligna (HaCat) y dos líneas celulares epiteliales orales malignas (HOC 313 clone 8 y HSC 3). Las nanorodas conjugadas con anticuerpos anti-EGFR se unen específicamente a la superficie de las células de tipo maligno con una afinidad mucho mayor debido a la sobreexpresión de EGFR en la membrana citoplasmática de las células malignas. Como resultado de la fuerte dispersión de luz roja de las nanorodas de oro en campo oscuro, observada mediante un microscopio de laboratorio, las células malignas se visualizan y diagnostican claramente a partir de las células no malignas. Se ha encontrado que, después de la exposición a un láser rojo continuo a 800 nm, las células malignas requieren aproximadamente la mitad de la energía del láser para ser destruidas fototérmicamente en comparación con las células no malignas. Por lo tanto, tanto el diagnóstico eficiente de células cancerosas como la terapia fototérmica selectiva se realizan simultáneamente.",
    url = "https://doi.org/10.1021/ja057254a",
    doi = "10.1021/ja057254a",
    openalex = "W2080376276"
}

Las células madre mesenquimales (MSCs) representan una herramienta prometedora para nuevos conceptos clínicos en el apoyo a la terapia celular. La médula ósea (MO) fue la primera fuente reportada que contiene MSCs. Sin embargo, para el uso clínico, la MO puede ser perjudicial debido al procedimiento de donación altamente invasivo y la disminución en el número de MSCs y su potencial de diferenciación con la edad. Más recientemente, la sangre del cordón umbilical (SCU), accesible mediante un método menos invasivo, se introdujo como una fuente alternativa para las MSCs. Otra fuente prometedora es el tejido adiposo (TA). Comparamos las MSCs derivadas de estas fuentes en cuanto a morfología, la tasa de éxito de aislamiento de MSCs, frecuencia de colonias, potencial de expansión, capacidad de diferenciación múltiple y fenotipo inmune. No se observaron diferencias significativas en cuanto a la morfología y el fenotipo inmune de las MSCs derivadas de estas fuentes. Se pudieron observar diferencias en cuanto a la tasa de éxito de aislamiento de MSCs, que fue del 100% para MO y TA, pero solo del 63% para SCU. La frecuencia de colonias fue más baja en SCU, mientras que fue más alta en TA. Sin embargo, las SCU-MSCs pudieron cultivarse más tiempo y mostraron la mayor capacidad de proliferación, mientras que las MO-MSCs poseían el período de cultivo más corto y la menor capacidad de proliferación. Lo más llamativo es que las SCU-MSCs no mostraron capacidad de diferenciación adipogénica, a diferencia de las MO- y TA-MSCs. Tanto SCU como TA son alternativas atractivas a la MO en el aislamiento de MSC: TA porque contiene MSCs a la frecuencia más alta y SCU porque parece ser expandible a números más altos.

@article{doi101634stemcells20050342,
    author = "Kern, Susanne y Eichler, Hermann y Stoeve, Johannes y Klüter, Harald y Bieback, Karen",
    title = "Análisis comparativo de células madre mesenquimales de médula ósea, sangre del cordón umbilical o tejido adiposo",
    year = "2006",
    journal = "Stem Cells",
    abstract = "Las células madre mesenquimales (MSCs) representan una herramienta prometedora para nuevos conceptos clínicos en el apoyo a la terapia celular. La médula ósea (MO) fue la primera fuente reportada que contiene MSCs. Sin embargo, para el uso clínico, la MO puede ser perjudicial debido al procedimiento de donación altamente invasivo y la disminución en el número de MSCs y su potencial de diferenciación con la edad. Más recientemente, la sangre del cordón umbilical (SCU), accesible mediante un método menos invasivo, se introdujo como una fuente alternativa para las MSCs. Otra fuente prometedora es el tejido adiposo (TA). Comparamos las MSCs derivadas de estas fuentes en cuanto a morfología, la tasa de éxito de aislamiento de MSCs, frecuencia de colonias, potencial de expansión, capacidad de diferenciación múltiple y fenotipo inmune. No se observaron diferencias significativas en cuanto a la morfología y el fenotipo inmune de las MSCs derivadas de estas fuentes. Se pudieron observar diferencias en cuanto a la tasa de éxito de aislamiento de MSCs, que fue del 100% para MO y TA, pero solo del 63% para SCU. La frecuencia de colonias fue más baja en SCU, mientras que fue más alta en TA. Sin embargo, las SCU-MSCs pudieron cultivarse más tiempo y mostraron la mayor capacidad de proliferación, mientras que las MO-MSCs poseían el período de cultivo más corto y la menor capacidad de proliferación. Lo más llamativo es que las SCU-MSCs no mostraron capacidad de diferenciación adipogénica, a diferencia de las MO- y TA-MSCs. Tanto SCU como TA son alternativas atractivas a la MO en el aislamiento de MSC: TA porque contiene MSCs a la frecuencia más alta y SCU porque parece ser expandible a números más altos.",
    url = "https://doi.org/10.1634/stemcells.2005-0342",
    doi = "10.1634/stemcells.2005-0342",
    openalex = "W2036348189",
    references = "doi101242jcs11371161"
}

La biología celular estructural, que definimos como análisis microscópico electrónico de células intactas, sufrió una pérdida de interés y actividad tras los avances en microscopía óptica a partir de la década de 1990. Curiosamente, es la abundancia de observaciones detalladas en el microscopio óptico una de las fuerzas impulsoras del actual renovado interés en la microscopía electrónica (EM). Muchos detalles celulares simplemente están más allá del poder de resolución del microscopio óptico. En este artículo, describimos cómo los microscopistas electrónicos están respondiendo a la demanda de una mejor preservación de las células y de formas de visualizar la ultraestructura celular en tres dimensiones con alta resolución. Discutimos cómo los métodos de baja temperatura, especialmente la congelación a alta presión y la sustitución por congelación, reducen los artefactos de la preparación convencional de muestras para EM. También ofrecemos una breve introducción a la tomografía electrónica celular, un potente método analítico que puede proporcionar una resolución casi atómica de la ultraestructura celular en modelos tridimensionales (3-D).

@article{doi102144000112226,
    author = "McDonald, Kent y Auer, Manfred",
    title = "Congelación a Alta Presión, Tomografía Celular y Biología Celular Estructural",
    year = "2006",
    journal = "BioTechniques",
    abstract = "La biología celular estructural, que definimos como análisis microscópico electrónico de células intactas, sufrió una pérdida de interés y actividad tras los avances en microscopía óptica a partir de la década de 1990. Curiosamente, es la abundancia de observaciones detalladas en el microscopio óptico una de las fuerzas impulsoras del actual renovado interés en la microscopía electrónica (EM). Muchos detalles celulares simplemente están más allá del poder de resolución del microscopio óptico. En este artículo, describimos cómo los microscopistas electrónicos están respondiendo a la demanda de una mejor preservación de las células y de formas de visualizar la ultraestructura celular en tres dimensiones con alta resolución. Discutimos cómo los métodos de baja temperatura, especialmente la congelación a alta presión y la sustitución por congelación, reducen los artefactos de la preparación convencional de muestras para EM. También ofrecemos una breve introducción a la tomografía electrónica celular, un potente método analítico que puede proporcionar una resolución casi atómica de la ultraestructura celular en modelos tridimensionales (3-D).",
    url = "https://doi.org/10.2144/000112226",
    doi = "10.2144/000112226",
    openalex = "W2150218224",
    references = "doi101002jemt1060030206, doi10100797815974529468, doi10100797836427281507, doi10100797836427281508, doi1010160300962988909802, doi101016jtcb200411009, doi101038sjemboj7600366, doi101083jcb913695, doi101146annurevbiochem73011303074112, doi1015159783112366967"
}

@article{doi101016jcell200711019,
    author = "Takahashi, Kazutoshi y Tanabe, Koji y Ohnuki, Mari y Narita, Megumi y Ichisaka, Tomoko y Tomoda, Kiichiro y Yamanaka, Shinya",
    title = "Inducción de Células Madre Pluripotentes a partir de Fibroblastos Humanos Adultos mediante Factores Definidos",
    year = "2007",
    journal = "Cell",
    url = "https://doi.org/10.1016/j.cell.2007.11.019",
    doi = "10.1016/j.cell.2007.11.019",
    openalex = "W2138977668",
    references = "doi101016jcell200607024"
}

El proceso de muerte celular programada, o apoptosis, se caracteriza generalmente por características morfológicas distintivas y mecanismos bioquímicos dependientes de energía. La apoptosis se considera un componente vital de diversos procesos, incluida la renovación celular normal, el desarrollo y funcionamiento adecuados del sistema inmunológico, la atrofia dependiente de hormonas, el desarrollo embrionario y la muerte celular inducida por químicos. La apoptosis inadecuada (ya sea demasiado poca o demasiado mucha) es un factor en muchas condiciones humanas, incluidas las enfermedades neurodegenerativas, el daño isquémico, los trastornos autoinmunes y muchos tipos de cáncer. La capacidad de modular la vida o la muerte de una célula se reconoce por su inmenso potencial terapéutico. Por lo tanto, la investigación continúa centrada en la elucidación y el análisis de la maquinaria del ciclo celular y las vías de señalización que controlan la parada del ciclo celular y la apoptosis. Con ese fin, el campo de la investigación de la apoptosis ha avanzado a un ritmo alarmantemente rápido. Aunque se han identificado muchas de las proteínas apoptóticas clave, los mecanismos moleculares de acción o inacción de estas proteínas aún deben ser elucidados. El objetivo de esta revisión es proporcionar una visión general del conocimiento actual sobre el proceso de apoptosis, incluida la morfología, la bioquímica, el papel de la apoptosis en la salud y la enfermedad, los métodos de detección, así como una discusión sobre posibles formas alternativas de apoptosis.

@article{doi10108001926230701320337,
    author = "Elmore, Susan A.",
    title = "Apoptosis: A Review of Programmed Cell Death",
    year = "2007",
    journal = "Toxicologic Pathology",
    abstract = "El proceso de muerte celular programada, o apoptosis, se caracteriza generalmente por características morfológicas distintivas y mecanismos bioquímicos dependientes de energía. La apoptosis se considera un componente vital de diversos procesos, incluida la renovación celular normal, el desarrollo y funcionamiento adecuados del sistema inmunológico, la atrofia dependiente de hormonas, el desarrollo embrionario y la muerte celular inducida por químicos. La apoptosis inadecuada (ya sea demasiado poca o demasiado mucha) es un factor en muchas condiciones humanas, incluidas las enfermedades neurodegenerativas, el daño isquémico, los trastornos autoinmunes y muchos tipos de cáncer. La capacidad de modular la vida o la muerte de una célula se reconoce por su inmenso potencial terapéutico. Por lo tanto, la investigación continúa centrada en la elucidación y el análisis de la maquinaria del ciclo celular y las vías de señalización que controlan la parada del ciclo celular y la apoptosis. Con ese fin, el campo de la investigación de la apoptosis ha avanzado a un ritmo alarmantemente rápido. Aunque se han identificado muchas de las proteínas apoptóticas clave, los mecanismos moleculares de acción o inacción de estas proteínas aún deben ser elucidados. El objetivo de esta revisión es proporcionar una visión general del conocimiento actual sobre el proceso de apoptosis, incluida la morfología, la bioquímica, el papel de la apoptosis en la salud y la enfermedad, los métodos de detección, así como una discusión sobre posibles formas alternativas de apoptosis.",
    url = "https://doi.org/10.1080/01926230701320337",
    doi = "10.1080/01926230701320337",
    openalex = "W2008757142"
}

La transferencia nuclear de células somáticas permite que los factores de acción trans presentes en el ovocito mamífero reprogramen los núcleos de células somáticas a un estado indiferenciado. Mostramos que cuatro factores (OCT4, SOX2, NANOG y LIN28) son suficientes para reprogramar células somáticas humanas a células madre pluripotentes que exhiben las características esenciales de las células madre embrionarias (CE). Estas células madre pluripotentes humanas inducidas tienen cariotipos normales, expresan actividad de telomerasa, expresan marcadores de superficie celular y genes que caracterizan a las CE humanas, y mantienen el potencial de desarrollo para diferenciarse en derivados avanzados de las tres capas germinales primarias. Dichas líneas celulares pluripotentes humanas inducidas deberían ser útiles en la producción de nuevos modelos de enfermedades y en el desarrollo de fármacos, así como para aplicaciones en medicina de trasplante, una vez que se eliminen las limitaciones técnicas (por ejemplo, mutación mediante integración viral).

@article{doi101126science1151526,
    author = "Yu, Junying y Vodyanik, Maxim A. y Smuga-Otto, Kim y Antosiewicz‐Bourget, Jessica y Frane, Jennifer L. y Tian, Shulan y Nie, Jeff y Jónsdóttir, Guðrún A. y Ruotti, Victor y Stewart, Ron y Slukvin, Igor I. y Thomson, James A.",
    title = "Líneas de células madre pluripotentes inducidas derivadas de células somáticas humanas",
    year = "2007",
    journal = "Science",
    abstract = "La transferencia nuclear de células somáticas permite que los factores de acción trans presentes en el ovocito mamífero reprogramen los núcleos de células somáticas a un estado indiferenciado. Mostramos que cuatro factores (OCT4, SOX2, NANOG y LIN28) son suficientes para reprogramar células somáticas humanas a células madre pluripotentes que exhiben las características esenciales de las células madre embrionarias (CE). Estas células madre pluripotentes humanas inducidas tienen cariotipos normales, expresan actividad de telomerasa, expresan marcadores de superficie celular y genes que caracterizan a las CE humanas, y mantienen el potencial de desarrollo para diferenciarse en derivados avanzados de las tres capas germinales primarias. Dichas líneas celulares pluripotentes humanas inducidas deberían ser útiles en la producción de nuevos modelos de enfermedades y en el desarrollo de fármacos, así como para aplicaciones en medicina de trasplante, una vez que se eliminen las limitaciones técnicas (por ejemplo, mutación mediante integración viral).",
    url = "https://doi.org/10.1126/science.1151526",
    doi = "10.1126/science.1151526",
    openalex = "W2142046859",
    references = "doi101016jcell200607024, doi101016jstem200705014, doi101038385810a0, doi101038nature05874, doi101038nature05934, doi101038nature05944, doi101038nbt1335, doi101038nbt788, doi101126science28253911145, doi101182blood2004041649"
}

Independientemente de las características morfológicas de la muerte celular en etapa final (que pueden ser apoptótica, necrótica, autofágica o mitótica), la permeabilización de la membrana mitocondrial (MMP) es frecuentemente el evento decisivo que delimita la frontera entre la supervivencia y la muerte. Por lo tanto, las membranas mitocondriales constituyen el campo de batalla en el que señales opuestas combaten para sellar el destino de la célula. Los actores locales que determinan la propensión a la MMP incluyen los miembros pro- y antiapoptóticos de la familia Bcl-2, proteínas del complejo de poro de transición de permeabilidad mitocondrial, así como una gran variedad de socios interactivos que incluyen lípidos mitocondriales. Metabolitos intermedios, procesos redox, esfingolípidos, gradientes iónicos, factores de transcripción, así como quinasas y fosfatasas vinculan señales letales y vitales que emanan de distintos compartimentos subcelulares hacia las mitocondrias. Por lo tanto, las mitocondrias integran una variedad de señales proapoptóticas. Una vez inducida la MMP, causa la liberación de hidrolasas catabólicas y activadores de tales enzimas (incluidas las de las caspasas) desde las mitocondrias. Estas enzimas catabólicas, así como la cesación de las funciones bioenergéticas y redox de las mitocondrias, finalmente conducen a la muerte celular, lo que significa que las mitocondrias coordinan la etapa tardía del fallecimiento celular. La muerte celular patológica inducida por isquemia/reperfusión, intoxicación con xenobióticos, enfermedades neurodegenerativas o infección viral también depende de la MMP como un evento crítico. La inhibición de la MMP constituye una estrategia importante para la prevención farmacológica de la muerte celular injustificada. Por el contrario, la inducción de la MMP en células tumorales constituye el objetivo de la quimioterapia anticanncer.

@article{doi101152physrev000132006,
    author = "Kroemer, Guido y Galluzzi, Lorenzo y Brenner, Catherine",
    title = "Permeabilización de la membrana mitocondrial en la muerte celular",
    year = "2007",
    journal = "Physiological Reviews",
    abstract = "Independientemente de las características morfológicas de la muerte celular en etapa final (que pueden ser apoptótica, necrótica, autofágica o mitótica), la permeabilización de la membrana mitocondrial (MMP) es frecuentemente el evento decisivo que delimita la frontera entre la supervivencia y la muerte. Por lo tanto, las membranas mitocondriales constituyen el campo de batalla en el que señales opuestas combaten para sellar el destino de la célula. Los actores locales que determinan la propensión a la MMP incluyen los miembros pro- y antiapoptóticos de la familia Bcl-2, proteínas del complejo de poro de transición de permeabilidad mitocondrial, así como una gran variedad de socios interactivos que incluyen lípidos mitocondriales. Metabolitos intermedios, procesos redox, esfingolípidos, gradientes iónicos, factores de transcripción, así como quinasas y fosfatasas vinculan señales letales y vitales que emanan de distintos compartimentos subcelulares hacia las mitocondrias. Por lo tanto, las mitocondrias integran una variedad de señales proapoptóticas. Una vez inducida la MMP, causa la liberación de hidrolasas catabólicas y activadores de tales enzimas (incluidas las de las caspasas) desde las mitocondrias. Estas enzimas catabólicas, así como la cesación de las funciones bioenergéticas y redox de las mitocondrias, finalmente conducen a la muerte celular, lo que significa que las mitocondrias coordinan la etapa tardía del fallecimiento celular. La muerte celular patológica inducida por isquemia/reperfusión, intoxicación con xenobióticos, enfermedades neurodegenerativas o infección viral también depende de la MMP como un evento crítico. La inhibición de la MMP constituye una estrategia importante para la prevención farmacológica de la muerte celular injustificada. Por el contrario, la inducción de la MMP en células tumorales constituye el objetivo de la quimioterapia anticanncer.",
    url = "https://doi.org/10.1152/physrev.00013.2006",
    doi = "10.1152/physrev.00013.2006",
    openalex = "W1964483580"
}

Las células madre mesenquimales o células estromales multipotentes (MSCs) aisladas de la médula ósea de organismos adultos fueron inicialmente caracterizadas como células plásticas adherentes, fibroblastoides, con la capacidad de generar tejido óseo heterotópico cuando se trasplantan in vivo. En los últimos años, se ha demostrado que las MSCs o células similares a MSCs residen dentro del tejido conectivo de la mayoría de los órganos, y su fenotipo superficial ha sido bien descrito. Un gran número de informes también indica que las células poseen la capacidad de transdiferenciarse en células epiteliales y linajes derivados del neuroectodermo. La amplia plasticidad del desarrollo de las MSCs se pensó originalmente que contribuía a su eficacia demostrada en una amplia variedad de modelos experimentales de enfermedades en animales, así como en ensayos clínicos humanos. Sin embargo, nuevos hallazgos sugieren que la capacidad de las MSCs para alterar el microambiente tisular mediante la secreción de factores solubles puede contribuir de manera más significativa que su capacidad de transdiferenciación en la reparación de tejidos. En este trabajo, evaluamos críticamente la literatura que describe la plasticidad de las MSCs y ofrecemos perspectivas sobre cómo la heterogeneidad molecular y funcional de esta población celular, que refleja la complejidad de la estroma de la médula ósea como un sistema de órganos, puede confundir la interpretación de su potencial de transdiferenciación. Además, argumentamos que esta heterogeneidad también proporciona una base para la amplia eficacia terapéutica de las MSCs.

@article{doi101634stemcells20070637,
    author = "Phinney, Donald G. y Prockop, Darwin J.",
    title = "Concise Review: Células Madre Mesenquimales/Células Estromales Multipotentes: El Estado de la Transdiferenciación y los Modos de Reparación de Tejidos—Vistas Actuales",
    year = "2007",
    journal = "Stem Cells",
    abstract = "Las células madre mesenquimales o células estromales multipotentes (MSCs) aisladas de la médula ósea de organismos adultos fueron inicialmente caracterizadas como células plásticas adherentes, fibroblastoides, con la capacidad de generar tejido óseo heterotópico cuando se trasplantan in vivo. En los últimos años, se ha demostrado que las MSCs o células similares a MSCs residen dentro del tejido conectivo de la mayoría de los órganos, y su fenotipo superficial ha sido bien descrito. Un gran número de informes también indica que las células poseen la capacidad de transdiferenciarse en células epiteliales y linajes derivados del neuroectodermo. La amplia plasticidad del desarrollo de las MSCs se pensó originalmente que contribuía a su eficacia demostrada en una amplia variedad de modelos experimentales de enfermedades en animales, así como en ensayos clínicos humanos. Sin embargo, nuevos hallazgos sugieren que la capacidad de las MSCs para alterar el microambiente tisular mediante la secreción de factores solubles puede contribuir de manera más significativa que su capacidad de transdiferenciación en la reparación de tejidos. En este trabajo, evaluamos críticamente la literatura que describe la plasticidad de las MSCs y ofrecemos perspectivas sobre cómo la heterogeneidad molecular y funcional de esta población celular, que refleja la complejidad de la estroma de la médula ósea como un sistema de órganos, puede confundir la interpretación de su potencial de transdiferenciación. Además, argumentamos que esta heterogeneidad también proporciona una base para la amplia eficacia terapéutica de las MSCs.",
    url = "https://doi.org/10.1634/stemcells.2007-0637",
    doi = "10.1634/stemcells.2007-0637",
    openalex = "W2012549032",
    references = "doi101242jcs11371161"
}

@article{doi101038cdd2008150,
    author = "Kroemer, Guido y Galluzzi, Lorenzo y Vandenabeele, Peter y Abrams, John y Alnemri, E S y Baehrecke, Eric H. y Blagosklonny, Mikhail V. y El‐Deiry, Wafik S. y Golstein, Pierre y Green, Douglas R. y Hengartner, Michael O. y Knight, Richard A. y Kumar, Sharad y Lipton, Stuart A. y Malorni, Walter y Núñez, Gabriel y Peter, Marcus E. y Tschopp, J y Yuan, Junying y Piacentini, Mauro y Zhivotovsky, Boris y Melino, Gerry",
    title = "Clasificación de la muerte celular: recomendaciones del Comité de Nomenclatura sobre la Muerte Celular 2009",
    year = "2008",
    journal = "Cell Death and Differentiation",
    url = "https://doi.org/10.1038/cdd.2008.150",
    doi = "10.1038/cdd.2008.150",
    openalex = "W1976881265",
    references = "doi101016jcub200610053"
}

@article{doi101038nchembio85,
    author = "Winterbourn, Christine C.",
    title = "Reconciling the chemistry and biology of reactive oxygen species",
    year = "2008",
    journal = "Nature Chemical Biology",
    url = "https://doi.org/10.1038/nchembio.85",
    doi = "10.1038/nchembio.85",
    openalex = "W1991952977",
    references = "doi101038nri1312, doi101126science1130481"
}

La senescencia celular suprime el cáncer al detener la proliferación celular, esencialmente de forma permanente, en respuesta a estímulos oncogénicos, incluyendo el estrés genotóxico. Modificamos el uso de arrays de anticuerpos para proporcionar una evaluación cuantitativa de los factores secretados por células senescentes. Mostramos que las células humanas inducidas a la senescencia por estrés genotóxico secretan una multitud de factores asociados con la inflamación y la malignidad. Este fenotipo secretorio asociado a la senescencia (SASP) se desarrolló lentamente durante varios días y solo después del daño al ADN de suficiente magnitud para inducir senescencia. Remarkablemente similares SASPs se desarrollaron en fibroblastos normales, células epiteliales normales y células tumorales epiteliales después del estrés genotóxico en cultivo, y en células tumorales epiteliales in vivo después del tratamiento de pacientes con cáncer de próstata con quimioterapia dañina al ADN. En células epiteliales premalignas en cultivo, los SASPs indujeron una transición epitelial-mesenquimal e invasividad, marcas de malignidad, mediante un mecanismo paracrino que dependía en gran medida de los factores SASP interleucina (IL)-6 e IL-8. Sorprendentemente, dos manipulaciones amplificaron notablemente y aceleraron el desarrollo de los SASPs: la expresión de RAS oncogénico, que causa estrés genotóxico y senescencia en células normales, y la pérdida funcional de la proteína supresora de tumores p53. Tanto la pérdida de p53 como el aumento de RAS oncogénico también exacerbó las actividades paracrinas promalignas de los SASPs. Nuestros hallazgos definen una característica central de la senescencia inducida por estrés genotóxico. Además, sugieren un mecanismo no autónomo de la célula mediante el cual p53 puede restringir, y RAS oncogénico puede promover, el desarrollo del cáncer relacionado con la edad al alterar el microambiente tisular.

@article{doi101371journalpbio0060301,
    author = "Coppé, Jean‐Philippe",
    title = "Fenotipos secretorios asociados a la senescencia revelan funciones no autónomas de la célula de RAS oncogénico y del supresor de tumores p53",
    year = "2008",
    abstract = "La senescencia celular suprime el cáncer al detener la proliferación celular, esencialmente de forma permanente, en respuesta a estímulos oncogénicos, incluyendo el estrés genotóxico. Modificamos el uso de arrays de anticuerpos para proporcionar una evaluación cuantitativa de los factores secretados por células senescentes. Mostramos que las células humanas inducidas a la senescencia por estrés genotóxico secretan una multitud de factores asociados con la inflamación y la malignidad. Este fenotipo secretorio asociado a la senescencia (SASP) se desarrolló lentamente durante varios días y solo después del daño al ADN de suficiente magnitud para inducir senescencia. Remarkablemente similares SASPs se desarrollaron en fibroblastos normales, células epiteliales normales y células tumorales epiteliales después del estrés genotóxico en cultivo, y en células tumorales epiteliales in vivo después del tratamiento de pacientes con cáncer de próstata con quimioterapia dañina al ADN. En células epiteliales premalignas en cultivo, los SASPs indujeron una transición epitelial-mesenquimal e invasividad, marcas de malignidad, mediante un mecanismo paracrino que dependía en gran medida de los factores SASP interleucina (IL)-6 e IL-8. Sorprendentemente, dos manipulaciones amplificaron notablemente y aceleraron el desarrollo de los SASPs: la expresión de RAS oncogénico, que causa estrés genotóxico y senescencia en células normales, y la pérdida funcional de la proteína supresora de tumores p53. Tanto la pérdida de p53 como el aumento de RAS oncogénico también exacerbó las actividades paracrinas promalignas de los SASPs. Nuestros hallazgos definen una característica central de la senescencia inducida por estrés genotóxico. Además, sugieren un mecanismo no autónomo de la célula mediante el cual p53 puede restringir, y RAS oncogénico puede promover, el desarrollo del cáncer relacionado con la edad al alterar el microambiente tisular.",
    url = "https://doi.org/10.1371/journal.pbio.0060301",
    doi = "10.1371/journal.pbio.0060301",
    openalex = "W2010417927",
    references = "doi101111j155856461957tb02911x"
}

@article{doi101038nrm2766,
    author = "MacArthur, Ben D. y Ma’ayan, Avi y Lemischka, Ihor R.",
    title = "Biología de sistemas de la determinación del destino de las células madre y la reprogramación celular",
    year = "2009",
    journal = "Nature Reviews Molecular Cell Biology",
    url = "https://doi.org/10.1038/nrm2766",
    doi = "10.1038/nrm2766",
    openalex = "W1971445167",
    references = "doi1010160020711x94901198, doi101016jcell200508020, doi101016jcell200607024, doi101016jcell200711019, doi10106314823332, doi101073pnas0506580102, doi101126science1151526, doi101126science2845411143, doi101126science28754571433, openalexw2799004609"
}

A diferencia de las células diferenciadas normales, que dependen principalmente de la fosforilación oxidativa mitocondrial para generar la energía necesaria para los procesos celulares, la mayoría de las células cancerosas dependen en su lugar de la glucólisis aeróbica, un fenómeno denominado "efecto Warburg". La glucólisis aeróbica es una manera ineficiente de generar adenosina 5'-trifosfato (ATP), sin embargo, y la ventaja que confiere a las células cancerosas ha sido poco clara. Aquí proponemos que el metabolismo de las células cancerosas, y de hecho de todas las células proliferantes, se adapta para facilitar la captación e incorporación de nutrientes en la biomasa (por ejemplo, nucleótidos, aminoácidos y lípidos) necesaria para producir una nueva célula. Apoyando esta idea son estudios recientes que muestran que (i) varias vías de señalización implicadas en la proliferación celular también regulan vías metabólicas que incorporan nutrientes en la biomasa; y que (ii) ciertas mutaciones asociadas al cáncer permiten a las células cancerosas adquirir y metabolizar nutrientes de una manera propicia para la proliferación en lugar de una producción eficiente de ATP. Una mejor comprensión de los vínculos mecanísticos entre el metabolismo celular y el control del crecimiento podría finalmente conducir a mejores tratamientos para el cáncer humano.

@article{doi101126science1160809,
    author = "Heiden, Matthew G. Vander y Cantley, Lewis C. y Thompson, Craig B.",
    title = "Understanding the Warburg Effect: The Metabolic Requirements of Cell Proliferation",
    year = "2009",
    journal = "Science",
    abstract = {A diferencia de las células diferenciadas normales, que dependen principalmente de la fosforilación oxidativa mitocondrial para generar la energía necesaria para los procesos celulares, la mayoría de las células cancerosas dependen en su lugar de la glucólisis aeróbica, un fenómeno denominado "efecto Warburg". La glucólisis aeróbica es una manera ineficiente de generar adenosina 5'-trifosfato (ATP), sin embargo, y la ventaja que confiere a las células cancerosas ha sido poco clara. Aquí proponemos que el metabolismo de las células cancerosas, y de hecho de todas las células proliferantes, se adapta para facilitar la captación e incorporación de nutrientes en la biomasa (por ejemplo, nucleótidos, aminoácidos y lípidos) necesaria para producir una nueva célula. Apoyando esta idea son estudios recientes que muestran que (i) varias vías de señalización implicadas en la proliferación celular también regulan vías metabólicas que incorporan nutrientes en la biomasa; y que (ii) ciertas mutaciones asociadas al cáncer permiten a las células cancerosas adquirir y metabolizar nutrientes de una manera propicia para la proliferación en lugar de una producción eficiente de ATP. Una mejor comprensión de los vínculos mecanísticos entre el metabolismo celular y el control del crecimiento podría finalmente conducir a mejores tratamientos para el cáncer humano.},
    url = "https://doi.org/10.1126/science.1160809",
    doi = "10.1126/science.1160809",
    openalex = "W2097259163",
    references = "doi1010160307441278900493"
}

@article{ito2010cellular,
    author = "Ito, Yutaka y Selenko, Philipp",
    title = "Biología estructural celular",
    year = "2010",
    journal = "Current Opinion in Structural Biology",
    url = "https://doi.org/10.1016/j.sbi.2010.07.006",
    doi = "10.1016/j.sbi.2010.07.006",
    number = "5",
    pages = "640-648",
    volume = "20"
}

El ensayo MTT (3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5 difenil tetrazolio bromuro) se basa en la conversión de MTT en cristales de formazano por células vivas, lo que determina la actividad mitocondrial. Dado que para la mayoría de las poblaciones celulares la actividad mitocondrial total está relacionada con el número de células viables, este ensayo se utiliza ampliamente para medir los efectos citotóxicos in vitro de los fármacos sobre líneas celulares o células primarias de pacientes. En este capítulo se describe el protocolo del ensayo, incluyendo consideraciones importantes relevantes para cada paso del ensayo, así como sus limitaciones y posibles aplicaciones.

@article{doi101007978161779080520,
    author = "van Meerloo, Johan y Kaspers, Gertjan J.L. y Cloos, Jacqueline",
    title = "Cell Sensitivity Assays: The MTT Assay",
    year = "2011",
    journal = "Methods in molecular biology",
    abstract = "El ensayo MTT (3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5 difenil tetrazolio bromuro) se basa en la conversión de MTT en cristales de formazano por células vivas, lo que determina la actividad mitocondrial. Dado que para la mayoría de las poblaciones celulares la actividad mitocondrial total está relacionada con el número de células viables, este ensayo se utiliza ampliamente para medir los efectos citotóxicos in vitro de los fármacos sobre líneas celulares o células primarias de pacientes. En este capítulo se describe el protocolo del ensayo, incluyendo consideraciones importantes relevantes para cada paso del ensayo, así como sus limitaciones y posibles aplicaciones.",
    url = "https://doi.org/10.1007/978-1-61779-080-5\_20",
    doi = "10.1007/978-1-61779-080-5\_20",
    openalex = "W2341769195"
}

@article{doi101016jcell201101032,
    author = "Young, Richard A.",
    title = "Control of the Embryonic Stem Cell State",
    year = "2011",
    journal = "Cell",
    url = "https://doi.org/10.1016/j.cell.2011.01.032",
    doi = "10.1016/j.cell.2011.01.032",
    openalex = "W2017050785",
    references = "doi101038nrm2766"
}

@article{doi101016jstem201109010,
    author = "Suda, Toshio y Takubo, Keiyo y Semenza, Gregg L.",
    title = "Regulación metabólica de las células madre hematopoyéticas en el nicho hipóxico",
    year = "2011",
    journal = "Cell stem cell",
    url = "https://doi.org/10.1016/j.stem.2011.09.010",
    doi = "10.1016/j.stem.2011.09.010",
    openalex = "W1995091371",
    references = "doi101038nrm2766"
}

@article{doi101038cdd201196,
    author = "Galluzzi, Lorenzo y Vitale, Ilio y Abrams, John y Alnemri, Emad S. y Baehrecke, Eric H. y Blagosklonny, Mikhail V. y Dawson, T M y Dawson, Valina L. y El‐Deiry, Wafik S. y Fulda, Simone y Gottlieb, Eyal y Green, Douglas R. y Hengartner, Michael O. y Kepp, Oliver y Knight, R A y Kumar, Sharad y Lipton, Stuart A. y Lü, Xin y Madeo, Frank y Malorni, Walter y Mehlen, Patrick y Núñez, Gabriel y Peter, Marcus E. y Piacentini, Mauro y Rubinsztein, David C. y Shi, Yufang y Simon, H-U y Vandenabeele, Peter y White, Eileen y Yuan, Jing y Zhivotovsky, Boris y Melino, Gerry y Kroemer, Guido",
    title = "Definiciones moleculares de las subrutinas de muerte celular: recomendaciones del Comité de Nomenclatura sobre Muerte Celular 2012",
    year = "2011",
    journal = "Cell Death and Differentiation",
    url = "https://doi.org/10.1038/cdd.2011.96",
    doi = "10.1038/cdd.2011.96",
    openalex = "W2030864103",
    references = "doi101038nrd3373"
}

La observación de Warburg de que las células cancerosas exhiben una alta tasa de glucólisis incluso en presencia de oxígeno (glucólisis aeróbica) provocó un debate sobre el papel de la glucólisis en células normales y cancerosas. Aunque se ha establecido que las deficiencias en la respiración mitocondrial no son la causa del cáncer o la glucólisis aeróbica, las ventajas de la glucólisis mejorada en el cáncer siguen siendo controvertidas. Muchas células, que van desde microbios hasta linfocitos, utilizan glucólisis aeróbica durante la proliferación rápida, lo que sugiere que puede desempeñar un papel fundamental en el apoyo al crecimiento celular. Aquí, revisamos cómo la glucólisis contribuye a los procesos metabólicos de las células que se dividen. Proporcionamos un detallado balance de los requisitos biosintéticos para construir una nueva célula e ilustramos la importancia de la glucólisis en la provisión de carbonos para generar biomasa. Argumentamos que la función principal de la glucólisis aeróbica es mantener altos niveles de intermediarios glucolíticos para apoyar reacciones anabólicas en las células, proporcionando así una explicación de por qué el metabolismo glucídico aumentado es seleccionado en células proliferantes a lo largo de la naturaleza.

@article{doi101146annurevcellbio092910154237,
    author = "Lunt, Sophia Y. y Heiden, Matthew G. Vander",
    title = "Glucólisis aeróbica: Cumplir los requisitos metabólicos de la proliferación celular",
    year = "2011",
    journal = "Annual Review of Cell and Developmental Biology",
    abstract = "La observación de Warburg de que las células cancerosas exhiben una alta tasa de glucólisis incluso en presencia de oxígeno (glucólisis aeróbica) provocó un debate sobre el papel de la glucólisis en células normales y cancerosas. Aunque se ha establecido que las deficiencias en la respiración mitocondrial no son la causa del cáncer o la glucólisis aeróbica, las ventajas de la glucólisis mejorada en el cáncer siguen siendo controvertidas. Muchas células, que van desde microbios hasta linfocitos, utilizan glucólisis aeróbica durante la proliferación rápida, lo que sugiere que puede desempeñar un papel fundamental en el apoyo al crecimiento celular. Aquí, revisamos cómo la glucólisis contribuye a los procesos metabólicos de las células que se dividen. Proporcionamos un detallado balance de los requisitos biosintéticos para construir una nueva célula e ilustramos la importancia de la glucólisis en la provisión de carbonos para generar biomasa. Argumentamos que la función principal de la glucólisis aeróbica es mantener altos niveles de intermediarios glucolíticos para apoyar reacciones anabólicas en las células, proporcionando así una explicación de por qué el metabolismo glucídico aumentado es seleccionado en células proliferantes a lo largo de la naturaleza.",
    url = "https://doi.org/10.1146/annurev-cellbio-092910-154237",
    doi = "10.1146/annurev-cellbio-092910-154237",
    openalex = "W2095987251",
    references = "doi1010160307441278900493, doi101016s0021925818711794, doi1012019781315735368"
}

Las bases de datos de alto rendimiento y alto contenido son recursos cada vez más importantes en la medicina molecular, la biología de sistemas y la farmacología. Sin embargo, la información suele residir en bases de datos intratables, lo que limita el análisis y la integración de datos rápidos. Un recurso que ofrece un potencial sustancial de mejora en este aspecto es la base de datos de líneas celulares NCI-60 compilada por el Instituto Nacional del Cáncer de los Estados Unidos, que ha sido extensamente caracterizada a través de numerosas plataformas de respuesta genómica y farmacológica. En este informe, presentamos una aplicación web CellMiner (http://discover.nci.nih.gov/cellminer/) diseñada para mejorar el uso de esta extensa base de datos. Las herramientas de CellMiner permitieron la recuperación rápida de datos de transcripciones para 22.379 genes y 360 microARN, junto con informes de actividad para 20.503 compuestos químicos, incluidos 102 fármacos aprobados por la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos. La conversión de estos niveles diferenciales en patrones cuantitativos a través del NCI-60 aclaró la organización de datos y las comparaciones cruzadas utilizando una herramienta de coincidencia de patrones novedosa. Las consultas de datos sobre posibles relaciones entre parámetros pueden realizarse de manera iterativa específica de los intereses y la experiencia del usuario. Se proporcionaron ejemplos del proceso de descubrimiento in silico ofrecido por CellMiner para análisis de resistencia a múltiples fármacos y actividad de doxorrubicina; identificación de genes específicos de colon, microARN y fármacos; microARN relacionados con el clúster miR-17-92; y patrones de identificación de fármacos coincidentes con erlotinib, gefitinib, afatinib y lapatinib. CellMiner amplía enormemente las aplicaciones de la extensa base de datos NCI-60 para el descubrimiento al crear procesos basados en la web que son rápidos, flexibles y fácilmente aplicables por usuarios sin experiencia en bioinformática.

@article{doi10115800085472can121370,
    author = "Reinhold, William C. y Sunshine, Margot y Liu, Hongfang y Varma, Sudhir y Kohn, Kurt W. y Morris, Joel y Doroshow, James H. y Pommier, Yves",
    title = "CellMiner: Un conjunto de herramientas web de genómica y farmacología para explorar patrones de transcripción y fármacos en el conjunto de líneas celulares NCI-60",
    year = "2012",
    journal = "Investigación del Cáncer",
    abstract = "Las bases de datos de alto rendimiento y alto contenido son recursos cada vez más importantes en la medicina molecular, la biología de sistemas y la farmacología. Sin embargo, la información suele residir en bases de datos intratables, lo que limita el análisis y la integración de datos rápidos. Un recurso que ofrece un potencial sustancial de mejora en este aspecto es la base de datos de líneas celulares NCI-60 compilada por el Instituto Nacional del Cáncer de los Estados Unidos, que ha sido extensamente caracterizada a través de numerosas plataformas de respuesta genómica y farmacológica. En este informe, presentamos una aplicación web CellMiner (http://discover.nci.nih.gov/cellminer/) diseñada para mejorar el uso de esta extensa base de datos. Las herramientas de CellMiner permitieron la recuperación rápida de datos de transcripciones para 22.379 genes y 360 microARN, junto con informes de actividad para 20.503 compuestos químicos, incluidos 102 fármacos aprobados por la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos. La conversión de estos niveles diferenciales en patrones cuantitativos a través del NCI-60 aclaró la organización de datos y las comparaciones cruzadas utilizando una herramienta de coincidencia de patrones novedosa. Las consultas de datos sobre posibles relaciones entre parámetros pueden realizarse de manera iterativa específica de los intereses y la experiencia del usuario. Se proporcionaron ejemplos del proceso de descubrimiento in silico ofrecido por CellMiner para análisis de resistencia a múltiples fármacos y actividad de doxorrubicina; identificación de genes específicos de colon, microARN y fármacos; microARN relacionados con el clúster miR-17-92; y patrones de identificación de fármacos coincidentes con erlotinib, gefitinib, afatinib y lapatinib. CellMiner amplía enormemente las aplicaciones de la extensa base de datos NCI-60 para el descubrimiento al crear procesos basados en la web que son rápidos, flexibles y fácilmente aplicables por usuarios sin experiencia en bioinformática.",
    url = "https://doi.org/10.1158/0008-5472.can-12-1370",
    doi = "10.1158/0008-5472.can-12-1370",
    openalex = "W2103196126",
    references = "doi101093jnci82131113"
}

@article{doi101038cdd201375,
    author = "Martins, Isabel y Wang, Yan y Michaud, Michael y Ma, Yuting y Sukkurwala, Abdul Qader y Shen, Shensi y Kepp, Oliver y Métivier, David y Galluzzi, Lorenzo y Perfettini, J-L y Zitvogel, Laurence y Kroemer, Guido",
    title = "Mecanismos moleculares de la secreción de ATP durante la muerte celular inmunogénica",
    year = "2013",
    journal = "Cell Death and Differentiation",
    url = "https://doi.org/10.1038/cdd.2013.75",
    doi = "10.1038/cdd.2013.75",
    openalex = "W1991505853",
    references = "doi101038nrd3373"
}

@article{doi101038cdd2014137,
    author = "Galluzzi, Lorenzo y Pedro, José Manuel Bravo‐San y Vitale, Ilio y Aaronson, Stuart A. y Abrams, John y Adam, Dieter y Alnemri, Emad S. y Altucci, Lucia y Andrews, David W. y Annicchiarico‐Petruzzelli, Margherita y Baehrecke, Eric H. y Bazán, Nicolás G. y Bertrand, Mathieu J.M. y Bianchi, Katiuscia y Blagosklonny, Mikhail V. y Blomgren, Klas y Borner, Christoph y Bredesen, Dale E. y Brenner, Catherine y Campanella, Michelangelo y Candi, Eleonora y Cecconi, Francesco y Chan, Francis Ka-Ming y Chandel, Navdeep S. y Cheng, Emily H. y Chipuk, Jerry E. y Cidlowski, John A. y Ciechanover, Aaron y Dawson, Ted M. y Dawson, Valina L. y Laurenzi, Vincenzo De y Maria, Ruggero De y Debatin, K-M y Daniele, N Di y Dixit, Vishva M. y Dynlacht, Brian David y El‐Deiry, Wafik S. y Fimia, Gian María y Flavell, Richard A. y Fulda, Simone y Garrido, Carmen y Gougeon, M-L y Green, Douglas R. y Gronemeyer, Hinrich y Hajnóczky, György y Hardwick, J. Marie y Hengartner, Michael O. y Ichijo, Hidenori y Joseph, Bertrand y Jost, Philipp J. y Kaufmann, Thomas y Kepp, Oliver y Klionsky, Daniel J. y Knight, Richard A. y Kumar, Sharad y Lemasters, John J. y Levine, Beth y Linkermann, Andreas y Lipton, Stuart A. y Lockshin, Richard A. y López-Otı́n, Carlos y Lugli, Enrico y Madeo, Frank y Malorni, Walter y Marine, J-C y Martin, Séamus J. y Martinou, J-C y Medema, Jan Paul y Meier, Pascal y Melino, Sonia y Mizushima, Noboru y Moll, Ute M. y Muñoz‐Pinedo, Cristina y Núñez, Gabriel y Oberst, Andrew y Panaretakis, Theocharis y Penninger, Josef y Peter, Marcus E. y Piacentini, Mauro y Pinton, Paolo y Prehn, Jochen H.M. y Puthalakath, Hamsa y Rabinovich, Gabriel A. y Ravichandran, Kodi S. y Rizzuto, Rosario y Rodrigues, Cecília M. P. y Rubinsztein, David C. y Rudel, Thomas y Shi, Yufang y Simon, H-U y Stockwell, Brent R. y Szabadkai, György y Tait, Stephen W. G. y Tang, Ho Lam y Tavernarakis, N y Tsujimoto, Yoshihide y Berghe, Tom Vanden y Vandenabeele, Peter y Villunger, Andreas y Wagner, Erwin F.",
    title = "Aspectos esenciales versus accesorios de la muerte celular: recomendaciones del NCCD 2015",
    year = "2014",
    journal = "Cell Death and Differentiation",
    url = "https://doi.org/10.1038/cdd.2014.137",
    doi = "10.1038/cdd.2014.137",
    openalex = "W1997128330",
    references = "doi101038nrd3373, doi101038nri3244"
}

y para cribar grandes bibliotecas químicas en busca de posibles inductores de ICD, basándose en una plataforma de alto contenido y alto rendimiento que hemos desarrollado recientemente. Dicha plataforma permite la detección de múltiples DAMPs, como calreticulina expuesta en la superficie celular, ATP extracelular y high mobility group box 1 (HMGB1), y/o los procesos que subyacen a su emisión, como el estrés del retículo endoplasmático, la autofagia y la permeabilización necrótica de la membrana plasmática. Suponemos que esta tecnología facilitará el desarrollo de regímenes antitumorales de nueva generación, que matan células malignas y, al mismo tiempo, las convierten en una vacuna terapéutica específica contra el cáncer.

@article{doi104161216240112014955691,
    author = "Kepp, Oliver y Senovilla, Laura y Vitale, Ilio y Vacchelli, Erika y Adjemian, Sandy y Agostinis, Patrizia y Apétoh, Lionel y Aranda, Fernando y Barnaba, Vincenzo y Bloy, Norma y Bracci, Laura y Breckpot, Karine y Brough, David y Buqué, Aitziber y Castro, María G. y Cirone, Mara y Colombo, María I. y Cremer, Isabelle y Demaria, Sandra y Dini, Luciana y Eliopoulos, Aristides G. y Faggioni, Alberto y Formenti, Silvia C. y Fučíková, Jitka y Gabriele, Lucia y Gaipl, Udo S. y Galon, Jérôme y Garg, Abhishek D. y Ghiringhelli, François y Giese, Nathalia A. y Guo, Zong Sheng y Hemminki, Akseli y Herrmann, Martin y Hodge, James W. y Holdenrieder, Stefan y Honeychurch, Jamie y Hu, Hong‐Ming y Huang, Xing y Illidge, Tim y Kono, Koji y Korbelik, Mladen y Krysko, Dmitri V. y Loi, Sherene y Löwenstein, Pedro R. y Lugli, Enrico y Ma, Yuting y Madeo, Frank y Manfredi, Angelo A. y Martins, Isabelle y Mavilio, Domenico y Menger, Laurie y Merendino, Nicolò y Michaud, Michael y Mignot, Grégoire y Mossman, Karen y Multhoff, Gabriele y Oehler, Rudolf y Palombo, Fabio y Panaretakis, Theocharis y Pol, Jonathan y Proietti, Enrico y Ricci, Jean‐Ehrland y Riganti, Chiara y Rovere–Querini, Patrizia y Rubartelli, Anna y Sistigu, Antonella y Smyth, Mark J. y Sonnemann, Juergen y Špíšek, Radek y Stagg, John y Sukkurwala, Abdul Qader y Tartour, Éric y Thorburn, Andrew y Thorne, Stephen H. y Vandenabeele, Peter y Velotti, Francesca y Workenhe, Samuel T. y Yang, Haining y Zong, Wei‐Xing y Zitvogel, Laurence y Kroemer, Guido y Galluzzi, Lorenzo",
    title = "Directrices de consenso para la detección de muerte celular inmunogénica",
    year = "2014",
    journal = "OncoImmunology",
    abstract = "y para cribar grandes bibliotecas químicas en busca de posibles inductores de ICD, basándose en una plataforma de alto contenido y alto rendimiento que hemos desarrollado recientemente. Dicha plataforma permite la detección de múltiples DAMPs, como calreticulina expuesta en la superficie celular, ATP extracelular y high mobility group box 1 (HMGB1), y/o los procesos que subyacen a su emisión, como el estrés del retículo endoplasmático, la autofagia y la permeabilización necrótica de la membrana plasmática. Suponemos que esta tecnología facilitará el desarrollo de regímenes antitumorales de nueva generación, que matan células malignas y, al mismo tiempo, las convierten en una vacuna terapéutica específica contra el cáncer.",
    url = "https://doi.org/10.4161/21624011.2014.955691",
    doi = "10.4161/21624011.2014.955691",
    openalex = "W2163252162",
    references = "doi101038nrd3373"
}

@incollection{hendry2014cellular,
    author = "Hendry, J.H.",
    title = "Biología de la radiación celular",
    year = "2014",
    booktitle = "Física biomédica integral",
    url = "https://doi.org/10.1016/b978-0-444-53632-7.00804-2",
    doi = "10.1016/b978-0-444-53632-7.00804-2",
    pages = "63-74"
}

El protocolo descrito en este apéndice permite la cuantificación microscópica de la viabilidad celular. Las células se suspenden en PBS que contiene azul de tripano y luego se examinan para determinar el porcentaje de células que tienen citoplasma claro (células viables) frente a células que tienen citoplasma azul (células no viables).

@article{doi1010020471142735ima03bs111,
    author = "Strober, Warren",
    title = "Prueba de exclusión de azul de tripano de la viabilidad celular",
    year = "2015",
    journal = "Protocolos actuales en inmunología",
    abstract = "El protocolo descrito en este apéndice permite la cuantificación microscópica de la viabilidad celular. Las células se suspenden en PBS que contiene azul de tripano y luego se examinan para determinar el porcentaje de células que tienen citoplasma claro (células viables) frente a células que tienen citoplasma azul (células no viables).",
    url = "https://doi.org/10.1002/0471142735.ima03bs111",
    doi = "10.1002/0471142735.ima03bs111",
    openalex = "W2110378444"
}

@article{doi101016jcell201511018,
    author = "Battich, Nico y Stoeger, Thomas y Pelkmans, Lucas",
    title = "Control de la Variabilidad de Transcritos en Células Mammalianas Individuales",
    year = "2015",
    journal = "Cell",
    url = "https://doi.org/10.1016/j.cell.2015.11.018",
    doi = "10.1016/j.cell.2015.11.018",
    openalex = "W2211016425",
    references = "doi101038nrm2766"
}

La microscopía de super-resolución puede revelar detalles previamente ocultos de las estructuras celulares, pero requiere altas intensidades de irradiación para utilizar el presupuesto limitado de fotones de manera eficiente. Tales altas densidades de fotones probablemente inducirán daño celular en experimentos con células vivas. Aplicamos condiciones de microscopía de localización de moléculas individuales y probamos la influencia de la intensidad de irradiación, el modo de iluminación, la longitud de onda, la dosis de luz, la temperatura y la etiquetado fluorescente en la probabilidad de supervivencia de diferentes líneas celulares 20-24 horas después de la irradiación. Además, medimos la velocidad de crecimiento de los microtúbulos después de la irradiación. La fotosensibilidad aumenta drásticamente a longitudes de onda de irradiación más bajas. Observamos fijación, permeabilización de la membrana plasmática y destrucción del citoesqueleto tras la irradiación con longitudes de onda más cortas. Mientras que las células soportan intensidades de luz de ~1 kW cm(-2) a 640 nm durante varios minutos, la dosis máxima a 405 nm es solo ~50 J cm(-2), lo que enfatiza los fluoróforos rojos para la microscopía de localización en células vivas. También presentamos estrategias para minimizar los factores fototóxicos y maximizar la capacidad de las células para hacer frente a mayores intensidades de irradiación.

@article{doi101038srep15348,
    author = "Wäldchen, Sina y Lehmann, Julian y Klein, Teresa y van de Linde, Sebastian y Sauer, Markus",
    title = "Daño celular inducido por luz en microscopía de super-resolución en células vivas",
    year = "2015",
    journal = "Scientific Reports",
    abstract = "La microscopía de super-resolución puede revelar detalles previamente ocultos de las estructuras celulares, pero requiere altas intensidades de irradiación para utilizar el presupuesto limitado de fotones de manera eficiente. Tales altas densidades de fotones probablemente inducirán daño celular en experimentos con células vivas. Aplicamos condiciones de microscopía de localización de moléculas individuales y probamos la influencia de la intensidad de irradiación, el modo de iluminación, la longitud de onda, la dosis de luz, la temperatura y la etiquetado fluorescente en la probabilidad de supervivencia de diferentes líneas celulares 20-24 horas después de la irradiación. Además, medimos la velocidad de crecimiento de los microtúbulos después de la irradiación. La fotosensibilidad aumenta drásticamente a longitudes de onda de irradiación más bajas. Observamos fijación, permeabilización de la membrana plasmática y destrucción del citoesqueleto tras la irradiación con longitudes de onda más cortas. Mientras que las células soportan intensidades de luz de \textasciitilde 1 kW cm(-2) a 640 nm durante varios minutos, la dosis máxima a 405 nm es solo \textasciitilde 50 J cm(-2), lo que enfatiza los fluoróforos rojos para la microscopía de localización en células vivas. También presentamos estrategias para minimizar los factores fototóxicos y maximizar la capacidad de las células para hacer frente a mayores intensidades de irradiación.",
    url = "https://doi.org/10.1038/srep15348",
    doi = "10.1038/srep15348",
    openalex = "W1782900133",
    references = "doi101006abbi19931311"
}

FONDO: El ensayo MTT basado en tetrazolio ha sido considerado durante mucho tiempo como el estándar de oro de los ensayos de citotoxicidad debido a su alta sensibilidad y a su miniaturización para su uso como ensayo de cribado de alto rendimiento. Sin embargo, diversos informes hacen referencia a interferencias por parte de diferentes compuestos de prueba, incluido el inhibidor de la glucólisis 3-bromopiruvato, con la conversión del tinte en cristales de formazano coloreados. Este estudio evaluó el rango lineal y la reproducibilidad de tres ensayos comúnmente utilizados de enumeración celular; el ensayo de captación de rojo neutro (NRU), reducción de resazurina (RES) y sulforodamina B (SRB), en comparación con el ensayo MTT. Se investigó la interferencia entre el ensayo MTT y tres inhibidores de la glucólisis, 2-desoxiglucosa, 3-bromopiruvato y lonidamina. RESULTADOS: Los datos indican que los ensayos NRU, RES y SRB mostraron la menor variabilidad a lo largo del rango lineal, mientras que la mayor variación se observó para el ensayo MTT. Esto implica que estos ensayos detectarían con mayor precisión pequeños cambios en el número de células que el ensayo MTT. El ensayo SRB proporcionó los resultados más reproducibles, como lo indica el coeficiente de determinación después de un número limitado de experimentos. El ensayo SRB también produjo la menor varianza en la concentración inhibitoria derivada del 50% (IC50), mientras que las concentraciones IC50 del 3-bromopiruvato no pudieron detectarse utilizando ni el ensayo MTT ni el ensayo RES después de 24 horas de incubación. Se observó interferencia en el ensayo MTT para los tres inhibidores de la glucólisis probados en un entorno libre de células. No se observaron interferencias para los ensayos NRU, SRB o RES. CONCLUSIONES: Este estudio demostró que el ensayo MTT no fue el mejor ensayo en varios parámetros que deben considerarse al seleccionar un ensayo de enumeración celular: el ensayo MTT fue menos preciso en la detección de cambios en el número de células, como lo indica la variación observada en el rango lineal, tuvo la mayor variación cuando se determinaron las concentraciones IC50 de los inhibidores de la glucólisis, y se observó interferencia entre el ensayo MTT y todos los inhibidores de la glucólisis probados. El ensayo SRB funcionó mejor en general considerando todos los parámetros, lo que sugiere que es el ensayo más adecuado para su uso en la cribado preclínico de nuevos compuestos terapéuticos con potencial oxido-reductor.

@article{doi101186s1310401510008,
    author = "van Tonder, Alet y Joubert, Annie y Cromarty, Duncan",
    title = "Limitaciones del ensayo 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil-2H-tetrazolio bromuro (MTT) en comparación con tres ensayos comúnmente utilizados de enumeración celular",
    year = "2015",
    journal = "BMC Research Notes",
    abstract = "FONDO: El ensayo MTT basado en tetrazolio ha sido considerado durante mucho tiempo como el estándar de oro de los ensayos de citotoxicidad debido a su alta sensibilidad y a su miniaturización para su uso como ensayo de cribado de alto rendimiento. Sin embargo, diversos informes hacen referencia a interferencias por parte de diferentes compuestos de prueba, incluido el inhibidor de la glucólisis 3-bromopiruvato, con la conversión del tinte en cristales de formazano coloreados. Este estudio evaluó el rango lineal y la reproducibilidad de tres ensayos comúnmente utilizados de enumeración celular; el ensayo de captación de rojo neutro (NRU), reducción de resazurina (RES) y sulforodamina B (SRB), en comparación con el ensayo MTT. Se investigó la interferencia entre el ensayo MTT y tres inhibidores de la glucólisis, 2-desoxiglucosa, 3-bromopiruvato y lonidamina. RESULTADOS: Los datos indican que los ensayos NRU, RES y SRB mostraron la menor variabilidad a lo largo del rango lineal, mientras que la mayor variación se observó para el ensayo MTT. Esto implica que estos ensayos detectarían con mayor precisión pequeños cambios en el número de células que el ensayo MTT. El ensayo SRB proporcionó los resultados más reproducibles, como lo indica el coeficiente de determinación después de un número limitado de experimentos. El ensayo SRB también produjo la menor varianza en la concentración inhibitoria derivada del 50% (IC50), mientras que las concentraciones IC50 del 3-bromopiruvato no pudieron detectarse utilizando ni el ensayo MTT ni el ensayo RES después de 24 horas de incubación. Se observó interferencia en el ensayo MTT para los tres inhibidores de la glucólisis probados en un entorno libre de células. No se observaron interferencias para los ensayos NRU, SRB o RES. CONCLUSIONES: Este estudio demostró que el ensayo MTT no fue el mejor ensayo en varios parámetros que deben considerarse al seleccionar un ensayo de enumeración celular: el ensayo MTT fue menos preciso en la detección de cambios en el número de células, como lo indica la variación observada en el rango lineal, tuvo la mayor variación cuando se determinaron las concentraciones IC50 de los inhibidores de la glucólisis, y se observó interferencia entre el ensayo MTT y todos los inhibidores de la glucólisis probados. El ensayo SRB funcionó mejor en general considerando todos los parámetros, lo que sugiere que es el ensayo más adecuado para su uso en la cribado preclínico de nuevos compuestos terapéuticos con potencial oxido-reductor.",
    url = "https://doi.org/10.1186/s13104-015-1000-8",
    doi = "10.1186/s13104-015-1000-8",
    openalex = "W2117653463",
    references = "doi101016jacthis201201006"
}

La microscopía electrónica de transmisión (EM) es una técnica versátil que puede utilizarse para obtener imágenes de especímenes biológicos que van desde células eucariotas intactas hasta proteínas individuales >150kDa. Existen varias estrategias para preparar muestras para la imagen mediante EM, incluyendo tinción negativa y congelación criogénica. En los últimos años, la criomicroscopía electrónica ha experimentado una 'revolución de resolución', debido tanto a avances en el hardware de imagen, software de procesamiento de imágenes, como mejoras en la preparación de muestras, lo que ha llevado a un creciente número de investigadores que utilizan la criomicroscopía electrónica como herramienta de investigación. Sin embargo, la criomicroscopía electrónica sigue siendo un campo en rápido crecimiento, con desafíos únicos. Aquí, resumimos las consideraciones para la imagen de una gama de especímenes desde complejos macromoleculares hasta células utilizando EM.

@article{doi101016jymeth201602017,
    author = "Thompson, Rebecca F. y Walker, Matt y Siebert, C. Alistair y Muench, Stephen P. y Ranson, Neil A.",
    title = "Introducción a la preparación de muestras y la imagen mediante microscopía electrónica de criogénica para biología estructural",
    year = "2016",
    journal = "Métodos",
    abstract = "La microscopía electrónica de transmisión (EM) es una técnica versátil que puede utilizarse para obtener imágenes de especímenes biológicos que van desde células eucariotas intactas hasta proteínas individuales >150kDa. Existen varias estrategias para preparar muestras para la imagen mediante EM, incluyendo tinción negativa y congelación criogénica. En los últimos años, la criomicroscopía electrónica ha experimentado una 'revolución de resolución', debido tanto a avances en el hardware de imagen, software de procesamiento de imágenes, como mejoras en la preparación de muestras, lo que ha llevado a un creciente número de investigadores que utilizan la criomicroscopía electrónica como herramienta de investigación. Sin embargo, la criomicroscopía electrónica sigue siendo un campo en rápido crecimiento, con desafíos únicos. Aquí, resumimos las consideraciones para la imagen de una gama de especímenes desde complejos macromoleculares hasta células utilizando EM.",
    url = "https://doi.org/10.1016/j.ymeth.2016.02.017",
    doi = "10.1016/j.ymeth.2016.02.017",
    openalex = "W2292743908",
    references = "doi102144000112226"
}

La elección del destino celular y el compromiso de células progenitoras multipotentes hacia una línea diferenciada requieren amplios cambios en su perfil de expresión génica. Pero cómo las células progenitoras superan la estabilidad de su configuración de expresión génica (atractor) para salir del atractor en una dirección sigue siendo un misterio. Aquí mostramos que el compromiso de células progenitoras de sangre hacia la línea eritroide o mieloide está precedido por la desestabilización de su estado atractor de alto dimensional, de tal manera que las células diferenciadas experimentan una transición crítica de estado. El análisis de resolución de célula única de la expresión génica en poblaciones de células diferenciadas proporciona un nuevo índice cuantitativo para predecir transiciones críticas en un espacio de estado de alto dimensional basado en la disminución de la correlación entre células y el concomitante aumento de la correlación entre genes a medida que las células se acercan a un punto de inflexión. La detección de "células rebeldes" que entran en el destino opuesto al previsto corrobora el modelo de desestabilización previa de un atractor progenitor. Por lo tanto, las señales de alerta temprana asociadas con transiciones críticas pueden detectarse en conjuntos estadísticos de sistemas de alto dimensional, ofreciendo un enfoque formal basado en teoría para analizar perfiles moleculares de célula única que va más allá del reconocimiento de patrones computacional actual, no requiere conocimiento de vías específicas y podría utilizarse para predecir cambios mayores inminentes en el desarrollo y la enfermedad.

@article{doi101371journalpbio2000640,
    author = "Mojtahedi, Mitra y Skupin, Alexander y Zhou, Joseph y Castaño, Ivan G. y Leong-Quong, Rebecca Y. Y. y Chang, Hannah y Trachana, Kalliopi y Giuliani, Alessandro y Huang, Sui",
    title = "Decisión del destino celular como transición crítica de alto dimensional",
    year = "2016",
    journal = "PLoS Biology",
    abstract = {La elección del destino celular y el compromiso de células progenitoras multipotentes hacia una línea diferenciada requieren amplios cambios en su perfil de expresión génica. Pero cómo las células progenitoras superan la estabilidad de su configuración de expresión génica (atractor) para salir del atractor en una dirección sigue siendo un misterio. Aquí mostramos que el compromiso de células progenitoras de sangre hacia la línea eritroide o mieloide está precedido por la desestabilización de su estado atractor de alto dimensional, de tal manera que las células diferenciadas experimentan una transición crítica de estado. El análisis de resolución de célula única de la expresión génica en poblaciones de células diferenciadas proporciona un nuevo índice cuantitativo para predecir transiciones críticas en un espacio de estado de alto dimensional basado en la disminución de la correlación entre células y el concomitante aumento de la correlación entre genes a medida que las células se acercan a un punto de inflexión. La detección de "células rebeldes" que entran en el destino opuesto al previsto corrobora el modelo de desestabilización previa de un atractor progenitor. Por lo tanto, las señales de alerta temprana asociadas con transiciones críticas pueden detectarse en conjuntos estadísticos de sistemas de alto dimensional, ofreciendo un enfoque formal basado en teoría para analizar perfiles moleculares de célula única que va más allá del reconocimiento de patrones computacional actual, no requiere conocimiento de vías específicas y podría utilizarse para predecir cambios mayores inminentes en el desarrollo y la enfermedad.},
    url = "https://doi.org/10.1371/journal.pbio.2000640",
    doi = "10.1371/journal.pbio.2000640",
    openalex = "W2952938648",
    references = "doi101038nrm2766, doi101093aibsbulletin6323c"
}

La viabilidad celular se define como el número de células sanas en una muestra y la proliferación celular es un indicador vital para comprender los mecanismos en acción de ciertos genes, proteínas y vías involucradas en la supervivencia o muerte celular después de la exposición a agentes tóxicos. Generalmente, los métodos utilizados para determinar la viabilidad también son comunes para la detección de la proliferación celular. Los ensayos de citotoxicidad y proliferación celular se utilizan generalmente para el cribado de fármacos para detectar si las moléculas de prueba tienen efectos sobre la proliferación celular o muestran efectos citotóxicos directos. Independientemente del tipo de ensayo basado en células que se utilice, es importante saber cuántas células viables quedan al final del experimento. Existen una variedad de métodos de ensayo basados en diversas funciones celulares, como la actividad enzimática, la permeabilidad de la membrana celular, la adhesión celular, la producción de ATP, la producción de coenzimas y la actividad de captación de nucleótidos. Estos métodos pueden clasificarse básicamente en diferentes categorías: (I) métodos de exclusión de tinte, como el ensayo de exclusión de tinte azul de tripano, (II) métodos basados en actividad metabólica, (III) ensayo de ATP, (IV) ensayo de sulforodamina B, (V) ensayo de marcador de viabilidad de proteasa, (VI) ensayo de supervivencia celular clonogénica, (VII) ensayos de proliferación celular de síntesis de ADN y (V) micro-espectroscopía Raman. Para elegir el ensayo de viabilidad óptimo, se deben considerar en detalle el tipo de célula, las condiciones de cultivo aplicadas y las preguntas específicas que se están haciendo. Esta revisión particular tiene como objetivo proporcionar una visión general de los ensayos comunes de proliferación celular y citotoxicidad junto con sus propias ventajas y desventajas, sus metodologías, comparaciones y propósitos previstos.

@article{doi1021741389201017666160808160513,
    author = "Adan, Aysun y Kiraz, Yağmur y Baran, Yusuf",
    title = "Ensayos de proliferación celular y citotoxicidad",
    year = "2016",
    journal = "Biotecnología Farmacéutica Actual",
    abstract = "La viabilidad celular se define como el número de células sanas en una muestra y la proliferación celular es un indicador vital para comprender los mecanismos en acción de ciertos genes, proteínas y vías involucradas en la supervivencia o muerte celular después de la exposición a agentes tóxicos. Generalmente, los métodos utilizados para determinar la viabilidad también son comunes para la detección de la proliferación celular. Los ensayos de citotoxicidad y proliferación celular se utilizan generalmente para el cribado de fármacos para detectar si las moléculas de prueba tienen efectos sobre la proliferación celular o muestran efectos citotóxicos directos. Independientemente del tipo de ensayo basado en células que se utilice, es importante saber cuántas células viables quedan al final del experimento. Existen una variedad de métodos de ensayo basados en diversas funciones celulares, como la actividad enzimática, la permeabilidad de la membrana celular, la adhesión celular, la producción de ATP, la producción de coenzimas y la actividad de captación de nucleótidos. Estos métodos pueden clasificarse básicamente en diferentes categorías: (I) métodos de exclusión de tinte, como el ensayo de exclusión de tinte azul de tripano, (II) métodos basados en actividad metabólica, (III) ensayo de ATP, (IV) ensayo de sulforodamina B, (V) ensayo de marcador de viabilidad de proteasa, (VI) ensayo de supervivencia celular clonogénica, (VII) ensayos de proliferación celular de síntesis de ADN y (V) micro-espectroscopía Raman. Para elegir el ensayo de viabilidad óptimo, se deben considerar en detalle el tipo de célula, las condiciones de cultivo aplicadas y las preguntas específicas que se están haciendo. Esta revisión particular tiene como objetivo proporcionar una visión general de los ensayos comunes de proliferación celular y citotoxicidad junto con sus propias ventajas y desventajas, sus metodologías, comparaciones y propósitos previstos.",
    url = "https://doi.org/10.2174/1389201017666160808160513",
    doi = "10.2174/1389201017666160808160513",
    openalex = "W2518046346",
    references = "doi1010020471142735ima03bs21, doi101002sici109746522000031823311aidjcp130co29, doi101006abbi19931311, doi101007978161779080520, doi1010160022175994903964, doi101016s1387265605110047, doi101038nprot2006179, doi101038nprot2006339, doi103727095535491820873191, openalexw2143811153"
}

Este capítulo es una introducción general de los métodos de ensayo más comúnmente utilizados para estimar el número de células viables en placas de múltiples pocillos. Este capítulo describe ensayos donde los datos se registran utilizando un lector de placas; no cubre métodos de ensayo diseñados para citometría de flujo o imagen de alto contenido. Los métodos de ensayo cubiertos incluyen el uso de diferentes clases de reactivos tetrazolio colorimétricos, reducción de resazurina y sustratos de proteasa que generan una señal fluorescente, el ensayo luminogénico de ATP y un nuevo ensayo en tiempo real para monitorear células vivas durante días en cultivo. Los ensayos descritos se basan en la medición de una actividad de marcador asociada con el número de células viables. Estos ensayos se utilizan para medir los resultados de la proliferación celular, probar los efectos citotóxicos de compuestos y para multiplexar como un control interno para determinar el número de células viables durante otros ensayos basados en células.

@article{openalexw319133514,
    author = "Riss, Terry y Moravec, Richard A y Niles, Andrew L. y Duellman, Sarah y Benink, Hélène A y Worzella, Tracy J y Minor, Lisa",
    title = "Ensayos de viabilidad celular",
    year = "2016",
    journal = "Europe PMC (PubMed Central)",
    abstract = "Este capítulo es una introducción general de los métodos de ensayo más comúnmente utilizados para estimar el número de células viables en placas de múltiples pocillos. Este capítulo describe ensayos donde los datos se registran utilizando un lector de placas; no cubre métodos de ensayo diseñados para citometría de flujo o imagen de alto contenido. Los métodos de ensayo cubiertos incluyen el uso de diferentes clases de reactivos tetrazolio colorimétricos, reducción de resazurina y sustratos de proteasa que generan una señal fluorescente, el ensayo luminogénico de ATP y un nuevo ensayo en tiempo real para monitorear células vivas durante días en cultivo. Los ensayos descritos se basan en la medición de una actividad de marcador asociada con el número de células viables. Estos ensayos se utilizan para medir los resultados de la proliferación celular, probar los efectos citotóxicos de compuestos y para multiplexar como un control interno para determinar el número de células viables durante otros ensayos basados en células.",
    openalex = "W319133514",
    references = "doi101006abbi19931311"
}

, implicando que estas proteínas pueden funcionar aguas arriba en la misma vía. Basándonos en estas interacciones genéticas, exploramos el papel de LEM2 durante la reformación del envoltorio nuclear en células humanas. Descubrimos que CHMP7 y LEM2 se enriquecen en la misma región del borde del disco de cromatina durante esta ventana de división celular y que CHMP7 puede unirse directamente al dominio C-terminal de LEM2 in vitro. Además, descubrimos que, durante la formación del envoltorio nuclear, el reclutamiento de los factores ESCRT CHMP7, CHMP2A e IST1/CHMP8 depende todos de LEM2 en células humanas. Concluimos que Lem2p/LEM2 es un adaptador específico del sitio nuclear conservado que recluta Cmp7p/CHMP7 y factores ESCRT aguas abajo hacia el envoltorio nuclear.

@article{doi101073pnas1613916114,
    author = "Gu, Mingyu y LaJoie, Dollie y Chen, Opal S. y von Appen, Alexander y Ladinsky, Mark S. y Redd, Michael J. y Nikolova, Linda S. y Björkman, Pamela J. y Sundquist, Wesley I. y Ullman, Katharine S. y Frost, Adam",
    title = "LEM2 recluta CHMP7 para el cierre del envoltorio nuclear mediado por ESCRT en levadura fision y células humanas",
    year = "2017",
    journal = "Proceedings of the National Academy of Sciences",
    abstract = ", implicando que estas proteínas pueden funcionar aguas arriba en la misma vía. Basándonos en estas interacciones genéticas, exploramos el papel de LEM2 durante la reformación del envoltorio nuclear en células humanas. Descubrimos que CHMP7 y LEM2 se enriquecen en la misma región del borde del disco de cromatina durante esta ventana de división celular y que CHMP7 puede unirse directamente al dominio C-terminal de LEM2 in vitro. Además, descubrimos que, durante la formación del envoltorio nuclear, el reclutamiento de los factores ESCRT CHMP7, CHMP2A e IST1/CHMP8 depende todos de LEM2 en células humanas. Concluimos que Lem2p/LEM2 es un adaptador específico del sitio nuclear conservado que recluta Cmp7p/CHMP7 y factores ESCRT aguas abajo hacia el envoltorio nuclear.",
    url = "https://doi.org/10.1073/pnas.1613916114",
    doi = "10.1073/pnas.1613916114",
    openalex = "W2592379452",
    references = "doi102144000112226"
}

@article{doi101016jacthis201802005,
    author = "Stockert, Juan C. y Horobin, Richard W. y Colombo, Lucas L. y Blázquez‐Castro, Alfonso",
    title = "Sales de tetrazolio y productos formazanos en Biología Celular: Evaluación de viabilidad, imagen por fluorescencia y perspectivas de etiquetado",
    year = "2018",
    journal = "Acta Histochemica",
    url = "https://doi.org/10.1016/j.acthis.2018.02.005",
    doi = "10.1016/j.acthis.2018.02.005",
    openalex = "W2793210811",
    references = "doi101006abbi19931311, doi101007978161779080520, doi1010160022175983903034, doi101016jacthis201201006, doi101016s1387265605110047, doi101046j14714159199769020581x, doi101093jnci82131107, doi101126science1160809, doi101146annurevcellbio092910154237, doi103727095535491820873191, openalexw1553088832, openalexw2140927361"
}

Los rápidos avances en el desarrollo de tecnologías de secuenciación de nueva generación (NGS) en los últimos años han proporcionado muchas valiosas perspectivas sobre sistemas biológicos complejos, que van desde la genómica del cáncer hasta diversas comunidades microbianas. Las tecnologías basadas en NGS para genómica, transcriptómica y epigenómica se centran cada vez más en la caracterización de células individuales. Estos análisis de célula única permitirán a los investigadores descubrir nuevos y potencialmente inesperados descubrimientos biológicos en relación con los métodos de perfilado tradicionales que evalúan poblaciones masivas. La secuenciación de ARN de célula única (scRNA-seq), por ejemplo, puede revelar poblaciones celulares complejas y raras, descubrir relaciones regulatorias entre genes y rastrear las trayectorias de linajes celulares distintos durante el desarrollo. En esta revisión, nos centraremos en los desafíos técnicos en el aislamiento de célula única y la preparación de bibliotecas, así como en los pipelines de análisis computacional disponibles para analizar datos de scRNA-seq. Mejoras técnicas adicionales a nivel de biología molecular y celular y en las herramientas de bioinformática disponibles facilitarán enormemente tanto la ciencia básica como las aplicaciones médicas de estas tecnologías de secuenciación.

@article{doi101038s1227601800718,
    author = "Hwang, Byungjin y Lee, Ji Hyun y Bang, Duhee",
    title = "Tecnologías de secuenciación de ARN de célula única y pipelines de bioinformática",
    year = "2018",
    journal = "Experimental \& Molecular Medicine",
    abstract = "Los rápidos avances en el desarrollo de tecnologías de secuenciación de nueva generación (NGS) en los últimos años han proporcionado muchas valiosas perspectivas sobre sistemas biológicos complejos, que van desde la genómica del cáncer hasta diversas comunidades microbianas. Las tecnologías basadas en NGS para genómica, transcriptómica y epigenómica se centran cada vez más en la caracterización de células individuales. Estos análisis de célula única permitirán a los investigadores descubrir nuevos y potencialmente inesperados descubrimientos biológicos en relación con los métodos de perfilado tradicionales que evalúan poblaciones masivas. La secuenciación de ARN de célula única (scRNA-seq), por ejemplo, puede revelar poblaciones celulares complejas y raras, descubrir relaciones regulatorias entre genes y rastrear las trayectorias de linajes celulares distintos durante el desarrollo. En esta revisión, nos centraremos en los desafíos técnicos en el aislamiento de célula única y la preparación de bibliotecas, así como en los pipelines de análisis computacional disponibles para analizar datos de scRNA-seq. Mejoras técnicas adicionales a nivel de biología molecular y celular y en las herramientas de bioinformática disponibles facilitarán enormemente tanto la ciencia básica como las aplicaciones médicas de estas tecnologías de secuenciación.",
    url = "https://doi.org/10.1038/s12276-018-0071-8",
    doi = "10.1038/s12276-018-0071-8",
    openalex = "W2886347923",
    references = "doi105694j132653771958tb86500x"
}

El ARN de célula única ha permitido estudiar la expresión génica a una resolución sin precedentes. El potencial de esta tecnología está atrayendo una base de usuarios en crecimiento para los métodos de análisis de célula única. A medida que más herramientas de análisis se vuelven disponibles, resulta cada vez más difícil navegar por este panorama y producir un flujo de trabajo actualizado para analizar sus datos. Aquí, detallamos los pasos de un análisis típico de ARN de célula única, incluyendo el preprocesamiento (control de calidad, normalización, corrección de datos, selección de características y reducción de dimensionalidad) y el análisis posterior a nivel de célula y gen. Formulamos recomendaciones actuales de mejores prácticas para estos pasos basadas en estudios de comparación independientes. Hemos integrado estas recomendaciones de mejores prácticas en un flujo de trabajo, que aplicamos a un conjunto de datos público para ilustrar aún más cómo funcionan estos pasos en la práctica. Nuestro estudio de caso documentado se puede encontrar en https://www.github.com/theislab/single-cell-tutorial Esta revisión servirá como un tutorial de flujo de trabajo para nuevos entrantes en el campo y ayudará a los usuarios establecidos a actualizar sus pipelines de análisis.

@article{doi1015252msb20188746,
    author = "Luecken, Malte D. y Theis, Fabian J.",
    title = "Mejores prácticas actuales en el análisis de ARN de célula única: un tutorial",
    year = "2019",
    journal = "Molecular Systems Biology",
    abstract = "El ARN de célula única ha permitido estudiar la expresión génica a una resolución sin precedentes. El potencial de esta tecnología está atrayendo una base de usuarios en crecimiento para los métodos de análisis de célula única. A medida que más herramientas de análisis se vuelven disponibles, resulta cada vez más difícil navegar por este panorama y producir un flujo de trabajo actualizado para analizar sus datos. Aquí, detallamos los pasos de un análisis típico de ARN de célula única, incluyendo el preprocesamiento (control de calidad, normalización, corrección de datos, selección de características y reducción de dimensionalidad) y el análisis posterior a nivel de célula y gen. Formulamos recomendaciones actuales de mejores prácticas para estos pasos basadas en estudios de comparación independientes. Hemos integrado estas recomendaciones de mejores prácticas en un flujo de trabajo, que aplicamos a un conjunto de datos público para ilustrar aún más cómo funcionan estos pasos en la práctica. Nuestro estudio de caso documentado se puede encontrar en https://www.github.com/theislab/single-cell-tutorial Esta revisión servirá como un tutorial de flujo de trabajo para nuevos entrantes en el campo y ayudará a los usuarios establecidos a actualizar sus pipelines de análisis.",
    url = "https://doi.org/10.15252/msb.20188746",
    doi = "10.15252/msb.20188746",
    openalex = "W2949237386"
}

Resumen Recientemente, el interés en la aplicación de ensayos de viabilidad celular ha ido en aumento en diversos campos. Los ensayos de viabilidad celular pueden clasificarse ampliamente en (a) ensayos de exclusión de tinción, (b) ensayos colorimétricos, (c) ensayos fluorométricos, (d) ensayos luminométricos y (e) ensayos citométricos de flujo. Los ensayos de exclusión de tinción incluyen ensayos de tinción con azul de tripano, eosina, rojo Congo y eritrosina B, mientras que el 3‐[4,5‐dimetiltiliazol‐2‐il]‐2,5 difeniltetrazolio bromuro (MTT), el 3‐(4,5‐dimetiltiliazol‐2‐il)‐5‐(3‐carboximetoxifenilo)‐2‐(4‐sulfofenilo)‐2H‐tetrazolio (MTS), el 2,3‐bis‐(2‐metoxi‐4‐nitro‐5‐sulfofenilo)‐2H‐tetrazolio‐5‐carboxanilida (XTT), el 2‐(4‐iodofenilo)‐3‐(4‐nitrofenilo)‐5‐(2,4‐disulfofenilo)‐2H tetrazolio, sal monosódica (WST‐1), el 2‐(2‐metoxi‐4‐nitrofenilo)‐3‐(4‐nitrofenilo)‐5‐(2,4‐disulfofenilo)‐2H‐tetrazolio, sal monosódica (WST‐8), la lactato deshidrogenasa (LDH), la sulforodamina B (SRB), la captación de rojo neutro (NRU) y los ensayos de tinción con violeta de cristal (CVS) están entre los ensayos colorimétricos. De manera similar, los ensayos de resazurina y 5‐carboxifluoresceína diacetato acetoximetil éster (5‐CFDA‐AM) se basan en mediciones fluorométricas, mientras que los ensayos luminométricos comprenden adenosina trifosfato y ensayos de viabilidad en tiempo real. Los principales ensayos citométricos de flujo incluyen asimetría de membrana, permeabilidad de membrana y ensayos de mitocondrias. En esta directriz, se discuten en detalle los mecanismos y la práctica de evaluación de los ensayos de viabilidad celular más comunes aplicados en laboratorios de investigación. Un ensayo de viabilidad celular ideal debería ser seguro, rápido, fiable, eficiente y rentable en tiempo y costes, y no debería interferir con el compuesto de prueba. En general, se puede concluir que se deben aplicar más de un ensayo de viabilidad celular para obtener resultados fiables.

@article{doi101002fft244,
    author = "Kamiloğlu, Senem y Sarı, Gülce y Özdal, Tuğba y Çapanoğlu, Esra",
    title = "Directrices para ensayos de viabilidad celular",
    year = "2020",
    journal = "Food Frontiers",
    abstract = "Resumen Recientemente, el interés en la aplicación de ensayos de viabilidad celular ha ido en aumento en diversos campos. Los ensayos de viabilidad celular pueden clasificarse ampliamente en (a) ensayos de exclusión de tinción, (b) ensayos colorimétricos, (c) ensayos fluorométricos, (d) ensayos luminométricos y (e) ensayos citométricos de flujo. Los ensayos de exclusión de tinción incluyen ensayos de tinción con azul de tripano, eosina, rojo Congo y eritrosina B, mientras que el 3‐[4,5‐dimetiltiliazol‐2‐il]‐2,5 difeniltetrazolio bromuro (MTT), el 3‐(4,5‐dimetiltiliazol‐2‐il)‐5‐(3‐carboximetoxifenilo)‐2‐(4‐sulfofenilo)‐2H‐tetrazolio (MTS), el 2,3‐bis‐(2‐metoxi‐4‐nitro‐5‐sulfofenilo)‐2H‐tetrazolio‐5‐carboxanilida (XTT), el 2‐(4‐iodofenilo)‐3‐(4‐nitrofenilo)‐5‐(2,4‐disulfofenilo)‐2H tetrazolio, sal monosódica (WST‐1), el 2‐(2‐metoxi‐4‐nitrofenilo)‐3‐(4‐nitrofenilo)‐5‐(2,4‐disulfofenilo)‐2H‐tetrazolio, sal monosódica (WST‐8), la lactato deshidrogenasa (LDH), la sulforodamina B (SRB), la captación de rojo neutro (NRU) y los ensayos de tinción con violeta de cristal (CVS) están entre los ensayos colorimétricos. De manera similar, los ensayos de resazurina y 5‐carboxifluoresceína diacetato acetoximetil éster (5‐CFDA‐AM) se basan en mediciones fluorométricas, mientras que los ensayos luminométricos comprenden adenosina trifosfato y ensayos de viabilidad en tiempo real. Los principales ensayos citométricos de flujo incluyen asimetría de membrana, permeabilidad de membrana y ensayos de mitocondrias. En esta directriz, se discuten en detalle los mecanismos y la práctica de evaluación de los ensayos de viabilidad celular más comunes aplicados en laboratorios de investigación. Un ensayo de viabilidad celular ideal debería ser seguro, rápido, fiable, eficiente y rentable en tiempo y costes, y no debería interferir con el compuesto de prueba. En general, se puede concluir que se deben aplicar más de un ensayo de viabilidad celular para obtener resultados fiables.",
    url = "https://doi.org/10.1002/fft2.44",
    doi = "10.1002/fft2.44",
    openalex = "W3088986342",
    references = "doi1010020471142735ima03bs111, doi101007978161779080520, doi1010160022175983903034, doi101016s1387265605110047, doi101038nprot2006179, doi101038nprot200875, doi101038nrc3064, doi101046j14321327200001606x, doi101093jnci82131107, doi1021741389201017666160808160513, doi103727095535491820873191, openalexw2143811153"
}

@article{doi101016jejcb2020151108,
    author = "Kamal, Nor Shaheera Mohamad y Safuan, Sabreena y Shamsuddin, Shaharum y Foroozandeh, Parisa",
    title = "Envejecimiento de las células: Perspectivas sobre la senescencia celular y métodos de detección",
    year = "2020",
    journal = "European Journal of Cell Biology",
    url = "https://doi.org/10.1016/j.ejcb.2020.151108",
    doi = "10.1016/j.ejcb.2020.151108",
    openalex = "W3042119537",
    references = "doi1021741389201017666160808160513"
}

Comprender la heterogeneidad celular es la góndola sagrada de la biología y la medicina. Las células que albergan genomas idénticos muestran una amplia variedad de comportamientos en organismos multicelulares. Los circuitos genéticos subyacentes a las identidades de tipos celulares facilitarán la comprensión de los programas regulatorios para la diferenciación y el mantenimiento de estados celulares distintos. Tal red génica específica de tipo celular puede inferirse a partir de patrones de coregulación a través de células individuales. Los métodos convencionales de perfilado del transcriptoma utilizando muestras de tejido proporcionan solo señales promedio de diversos tipos celulares. Por lo tanto, reconstruir redes reguladoras génicas para un tipo celular particular no es factible con datos de transcriptoma basados en tejido. Recientemente, la tecnología de ómicas de células individuales ha emergido y ha permitido capturar el paisaje transcriptómico de cada célula individual. Aunque los estudios de expresión génica de células individuales ya han abierto nuevas vías, la biología de redes utilizando datos de transcriptoma de células individuales acelerará aún más nuestra comprensión de la heterogeneidad celular. En esta revisión, proporcionamos una visión general de la biología de redes de células individuales y resumimos los recientes avances en el desarrollo de métodos para la inferencia de redes a partir de datos de secuenciación de ARN de células individuales (scRNA-seq). Luego, describimos cómo las redes génicas específicas de tipo celular pueden utilizarse para estudiar programas regulatorios específicos de tipos celulares asociados a enfermedades y estados celulares. Además, con datos de scRNA, es factible modelar redes génicas personales o específicas del paciente. Por lo tanto, también introducimos aplicaciones potenciales de la biología de redes de células individuales para la medicina de precisión. Envisionamos un rápido cambio de paradigma hacia el análisis de redes de células individuales para la biología de sistemas en un futuro cercano.

@article{doi101038s12276020005280,
    author = "Cha, Junha y Lee, Insuk",
    title = "Biología de redes de células individuales para resolver la heterogeneidad celular en enfermedades humanas",
    year = "2020",
    journal = "Experimental \& Molecular Medicine",
    abstract = "Comprender la heterogeneidad celular es la góndola sagrada de la biología y la medicina. Las células que albergan genomas idénticos muestran una amplia variedad de comportamientos en organismos multicelulares. Los circuitos genéticos subyacentes a las identidades de tipos celulares facilitarán la comprensión de los programas regulatorios para la diferenciación y el mantenimiento de estados celulares distintos. Tal red génica específica de tipo celular puede inferirse a partir de patrones de coregulación a través de células individuales. Los métodos convencionales de perfilado del transcriptoma utilizando muestras de tejido proporcionan solo señales promedio de diversos tipos celulares. Por lo tanto, reconstruir redes reguladoras génicas para un tipo celular particular no es factible con datos de transcriptoma basados en tejido. Recientemente, la tecnología de ómicas de células individuales ha emergido y ha permitido capturar el paisaje transcriptómico de cada célula individual. Aunque los estudios de expresión génica de células individuales ya han abierto nuevas vías, la biología de redes utilizando datos de transcriptoma de células individuales acelerará aún más nuestra comprensión de la heterogeneidad celular. En esta revisión, proporcionamos una visión general de la biología de redes de células individuales y resumimos los recientes avances en el desarrollo de métodos para la inferencia de redes a partir de datos de secuenciación de ARN de células individuales (scRNA-seq). Luego, describimos cómo las redes génicas específicas de tipo celular pueden utilizarse para estudiar programas regulatorios específicos de tipos celulares asociados a enfermedades y estados celulares. Además, con datos de scRNA, es factible modelar redes génicas personales o específicas del paciente. Por lo tanto, también introducimos aplicaciones potenciales de la biología de redes de células individuales para la medicina de precisión. Envisionamos un rápido cambio de paradigma hacia el análisis de redes de células individuales para la biología de sistemas en un futuro cercano.",
    url = "https://doi.org/10.1038/s12276-020-00528-0",
    doi = "10.1038/s12276-020-00528-0",
    openalex = "W3108451992",
    references = "doi101038nmeth2016, doi101038nmeth4463, doi101038nrg1272, doi101038nri201776, doi101038s1227601800718, doi101093nargku1003, doi101126science1087447, doi101186147121059559, doi101371journalpone0012776, doi1015252msb20188746"
}

Las células que sucumben al estrés mediante muerte celular regulada (MCR) pueden iniciar una respuesta inmune adaptativa asociada con la memoria inmunológica, siempre que presenten suficiente antigenicidad y adyuvanticidad. Además, múltiples características intracelulares y del microambiente determinan la propensión de la MCR para impulsar la inmunidad adaptativa. Aquí, proporcionamos una definición operativa actualizada de la muerte celular inmunogénica (MCI), discutimos los factores clave que dictan la capacidad de las células moribundas para impulsar una respuesta inmune adaptativa, resumimos los ensayos experimentales actualmente disponibles para la evaluación de la MCI in vitro e in vivo, y formulamos directrices para su interpretación.

@article{doi101136jitc2019000337,
    author = "Galluzzi, Lorenzo y Vitale, Ilio y Warren, Sarah H. y Adjemian, Sandy y Agostinis, Patrizia y Martinez, Aitziber Buqué y Chan, Timothy A. y Coukos, George y Demaria, Sandra y Deutsch, Éric y Draganov, Dobrin y Edelson, Richard L. y Formenti, Silvia C. y Fučíková, Jitka y Gabriele, Lucia y Gaipl, Udo S. y Gameiro, Sofia R. y Garg, Abhishek D. y Golden, Encouse B. y Han, Jian y Harrington, Kevin J. y Hemminki, Akseli y Hodge, James W. y Hossain, Dewan Md Sakib y Illidge, Tim y Karin, Michael y Kaufman, Howard L. y Kepp, Oliver y Kroemer, Guido y Lasarte, Juan José y Loi, Sherene y Lotze, Michael T. y Manic, Gwenola y Merghoub, Taha y Melcher, Alan y Mossman, Karen y Prósper, Felipe y Rekdal, Øystein y Rescigno, María y Riganti, Chiara y Sistigu, Antonella y Smyth, Mark J. y Špíšek, Radek y Stagg, John y Strauss, Bryan E. y Tang, Daolin y Tatsuno, Kazuki y Gool, Stefaan Van y Vandenabeele, Peter y Yamazaki, Takahiro y Zamarin, Dmitriy y Zitvogel, Laurence y Cesano, Alessandra y Marincola, Francesco M.",
    title = "Directrices de consenso para la definición, detección e interpretación de la muerte celular inmunogénica",
    year = "2020",
    journal = "Journal for ImmunoTherapy of Cancer",
    abstract = "Las células que sucumben al estrés mediante muerte celular regulada (MCR) pueden iniciar una respuesta inmune adaptativa asociada con la memoria inmunológica, siempre que presenten suficiente antigenicidad y adyuvanticidad. Además, múltiples características intracelulares y del microambiente determinan la propensión de la MCR para impulsar la inmunidad adaptativa. Aquí, proporcionamos una definición operativa actualizada de la muerte celular inmunogénica (MCI), discutimos los factores clave que dictan la capacidad de las células moribundas para impulsar una respuesta inmune adaptativa, resumimos los ensayos experimentales actualmente disponibles para la evaluación de la MCI in vitro e in vivo, y formulamos directrices para su interpretación.",
    url = "https://doi.org/10.1136/jitc-2019-000337",
    doi = "10.1136/jitc-2019-000337",
    openalex = "W3011642937",
    references = "doi101038nrd3373"
}

extracción y evaluación del mecanismo celular y molecular de la apoptosis.

@article{doi10115520201215395,
    author = "Ullah, Ikram y Khalil, Ali Talha y Ali, Muhammad e Iqbal, Javed y Ali, Waqar y Alarifi, Saud y Shinwari, Zabta Khan",
    title = "Nanopartículas de plata sintetizadas en verde inducen muerte celular apoptótica en células de cáncer de mama MCF-7 mediante la generación de especies reactivas de oxígeno y la activación de las actividades enzimáticas de Caspasa 3 y 9",
    year = "2020",
    journal = "Medicina Oxidativa y Longevidad Celular",
    abstract = "extracción y evaluación del mecanismo celular y molecular de la apoptosis.",
    url = "https://doi.org/10.1155/2020/1215395",
    doi = "10.1155/2020/1215395",
    openalex = "W3092593061",
    references = "doi101016jacthis201201006"
}

Las culturas celulares durante muchos años. Con el aumento de los sistemas 3D en la investigación de biología celular para determinar la eficacia terapéutica, los ensayos bidimensionales que miden la viabilidad celular se están utilizando fuera de su uso previsto en construcciones 3D. En este estudio, evaluamos la precisión de utilizar diversos ensayos de viabilidad celular comercialmente disponibles en diferentes construcciones de hidrogeles 3D para ayudar a los investigadores a comprender la variabilidad esperada en sus experimentaciones junto con la validación mediante imágenes microscópicas.

@article{doi101089tentec20210060,
    author = "Dominijanni, Anthony y Devarasetty, Mahesh y Forsythe, Steven D. y Votanopoulos, Konstantinos I. y Söker, Shay",
    title = "Ensayos de viabilidad celular en hidrogeles tridimensionales: Un estudio comparativo de la precisión",
    year = "2021",
    journal = "Ingeniería de Tejidos Parte C Métodos",
    abstract = "Las culturas celulares durante muchos años. Con el aumento de los sistemas 3D en la investigación de biología celular para determinar la eficacia terapéutica, los ensayos bidimensionales que miden la viabilidad celular se están utilizando fuera de su uso previsto en construcciones 3D. En este estudio, evaluamos la precisión de utilizar diversos ensayos de viabilidad celular comercialmente disponibles en diferentes construcciones de hidrogeles 3D para ayudar a los investigadores a comprender la variabilidad esperada en sus experimentaciones junto con la validación mediante imágenes microscópicas.",
    url = "https://doi.org/10.1089/ten.tec.2021.0060",
    doi = "10.1089/ten.tec.2021.0060",
    openalex = "W3165104736",
    references = "doi101002fft244"
}

Las vías supresoras de tumores pRB desempeñan un papel central en la regulación de la senescencia. Varios otros mecanismos han sido implicados recientemente en la mediación de la senescencia y el fenotipo senescente. En este trabajo revisamos los mecanismos moleculares que subyacen a la senescencia celular y al arresto del crecimiento asociado a la senescencia, con un enfoque particular en por qué las células dejan de dividirse, la estabilidad del arresto del crecimiento, el fenotipo hipersecretor y cómo se integran todos los diferentes mecanismos.

@article{doi103389fcell2021645593,
    author = "Kumari, Ruchi y Jat, Parmjit",
    title = "Mecanismos de la senescencia celular: Arresto del ciclo celular y Fenotipo Secretor Asociado a la Senescencia",
    year = "2021",
    journal = "Frontiers in Cell and Developmental Biology",
    abstract = "Las vías supresoras de tumores pRB desempeñan un papel central en la regulación de la senescencia. Varios otros mecanismos han sido implicados recientemente en la mediación de la senescencia y el fenotipo senescente. En este trabajo revisamos los mecanismos moleculares que subyacen a la senescencia celular y al arresto del crecimiento asociado a la senescencia, con un enfoque particular en por qué las células dejan de dividirse, la estabilidad del arresto del crecimiento, el fenotipo hipersecretor y cómo se integran todos los diferentes mecanismos.",
    url = "https://doi.org/10.3389/fcell.2021.645593",
    doi = "10.3389/fcell.2021.645593",
    openalex = "W3146579363",
    references = "doi1021741389201017666160808160513"
}

El rápido desarrollo de las tecnologías de células individuales permite diseccionar la heterogeneidad celular en diferentes capas ómicas con una resolución sin precedentes. El análisis independiente de la heterogeneidad celular impulsará nuestra comprensión de sistemas biológicos complejos o procesos, incluyendo el cáncer, el sistema inmunológico y enfermedades crónicas, proporcionando así valiosas perspectivas para la investigación clínica y traslacional. En esta revisión, nos centraremos en la aplicación de métodos de aprendizaje automático en el análisis de datos multiómicos de células individuales. Comenzaremos con el preprocesamiento de datos de secuenciación de ARN de células individuales (scRNA-seq), incluyendo imputación de datos, eliminación de efectos de lote entre plataformas y identificación del ciclo celular y tipos celulares. A continuación, presentaremos herramientas y métodos avanzados de análisis de datos utilizados para la estimación de variación en el número de copias, análisis de trayectoria de tiempo pseudo en células individuales, inferencia de árboles filogenéticos, interacción célula-célula, inferencia de redes regulatorias y análisis integrado de datos de scRNA-seq y transcriptoma espacial. Finalmente, presentaremos los últimos desafíos de análisis, como la integración multiómica y el análisis integrado de datos de scRNA-seq.

@article{doi103389fgene2021655536,
    author = "Liu, Jiajia y Fan, Zhiwei y Zhao, Weiling y Zhou, Xiaobo",
    title = "Inteligencia Artificial en el Análisis de Datos de Células Individuales: Avances y Nuevos Desafíos",
    year = "2021",
    journal = "Frontiers in Genetics",
    abstract = "El rápido desarrollo de las tecnologías de células individuales permite diseccionar la heterogeneidad celular en diferentes capas ómicas con una resolución sin precedentes. El análisis independiente de la heterogeneidad celular impulsará nuestra comprensión de sistemas biológicos complejos o procesos, incluyendo el cáncer, el sistema inmunológico y enfermedades crónicas, proporcionando así valiosas perspectivas para la investigación clínica y traslacional. En esta revisión, nos centraremos en la aplicación de métodos de aprendizaje automático en el análisis de datos multiómicos de células individuales. Comenzaremos con el preprocesamiento de datos de secuenciación de ARN de células individuales (scRNA-seq), incluyendo imputación de datos, eliminación de efectos de lote entre plataformas y identificación del ciclo celular y tipos celulares. A continuación, presentaremos herramientas y métodos avanzados de análisis de datos utilizados para la estimación de variación en el número de copias, análisis de trayectoria de tiempo pseudo en células individuales, inferencia de árboles filogenéticos, interacción célula-célula, inferencia de redes regulatorias y análisis integrado de datos de scRNA-seq y transcriptoma espacial. Finalmente, presentaremos los últimos desafíos de análisis, como la integración multiómica y el análisis integrado de datos de scRNA-seq.",
    url = "https://doi.org/10.3389/fgene.2021.655536",
    doi = "10.3389/fgene.2021.655536",
    openalex = "W3169674085",
    references = "doi101038s12276020005280"
}

El ensayo MTT para la actividad metabólica celular es casi omnipresente en los estudios de toxicidad celular; sin embargo, se aplica e interpreta erróneamente con frecuencia. Investigamos la aplicabilidad y las limitaciones del ensayo MTT para representar la toxicidad del tratamiento, la viabilidad celular y la actividad metabólica. Evaluamos el efecto de variables potencialmente confusas en las mediciones del ensayo MTT en una línea celular de cáncer de próstata (PC-3), incluyendo el número de siembra celular, la concentración de MTT, el tiempo de incubación de MTT, la privación de suero, la composición del medio de cultivo celular, los contenidos intracelulares liberados (lisado celular y secretoma) y la extrusión de formazano al espacio extracelular. También evaluamos el efecto confuso de las nanopartículas de oro recubiertas de polietilenglicol (Au-NPs) como tratamiento probado en células PC-3 sobre las mediciones del ensayo. Además, evaluamos la aplicabilidad de la citometría de imágenes microscópicas como herramienta para medir la reducción intracelular de MTT a nivel de célula individual. Nuestros hallazgos muestran que las mediciones del ensayo son el resultado de un proceso complicado dependiente de muchos de los factores mencionados anteriormente, y por lo tanto, es necesaria la optimización del ensayo y la interpretación racional de los datos para evitar conclusiones engañosas sobre variables como la viabilidad celular, la toxicidad del tratamiento y/o el metabolismo celular. Concluimos, con recomendaciones sobre cómo aplicar el ensayo y una perspectiva sobre dónde la utilidad del ensayo es una herramienta poderosa, pero también dónde tiene limitaciones.

@article{doi103390ijms222312827,
    author = "Ghasemi, Mahshid y Turnbull, Tyron y Sebastian, Sonia y Kempson, Ivan M.",
    title = "The MTT Assay: Utility, Limitations, Pitfalls, and Interpretation in Bulk and Single-Cell Analysis",
    year = "2021",
    journal = "International Journal of Molecular Sciences",
    abstract = "El ensayo MTT para la actividad metabólica celular es casi omnipresente en los estudios de toxicidad celular; sin embargo, se aplica e interpreta erróneamente con frecuencia. Investigamos la aplicabilidad y las limitaciones del ensayo MTT para representar la toxicidad del tratamiento, la viabilidad celular y la actividad metabólica. Evaluamos el efecto de variables potencialmente confusas en las mediciones del ensayo MTT en una línea celular de cáncer de próstata (PC-3), incluyendo el número de siembra celular, la concentración de MTT, el tiempo de incubación de MTT, la privación de suero, la composición del medio de cultivo celular, los contenidos intracelulares liberados (lisado celular y secretoma) y la extrusión de formazano al espacio extracelular. También evaluamos el efecto confuso de las nanopartículas de oro recubiertas de polietilenglicol (Au-NPs) como tratamiento probado en células PC-3 sobre las mediciones del ensayo. Además, evaluamos la aplicabilidad de la citometría de imágenes microscópicas como herramienta para medir la reducción intracelular de MTT a nivel de célula individual. Nuestros hallazgos muestran que las mediciones del ensayo son el resultado de un proceso complicado dependiente de muchos de los factores mencionados anteriormente, y por lo tanto, es necesaria la optimización del ensayo y la interpretación racional de los datos para evitar conclusiones engañosas sobre variables como la viabilidad celular, la toxicidad del tratamiento y/o el metabolismo celular. Concluimos, con recomendaciones sobre cómo aplicar el ensayo y una perspectiva sobre dónde la utilidad del ensayo es una herramienta poderosa, pero también dónde tiene limitaciones.",
    url = "https://doi.org/10.3390/ijms222312827",
    doi = "10.3390/ijms222312827",
    openalex = "W3216591159",
    references = "doi1010160022175983903034, doi1010160022175989903979, doi101016jacthis201201006, doi101016jacthis201802005, doi101016s1387265605110047, doi101038bjc1987190, doi101038cdd2008150, doi101039df9511100055, doi101046j14714159199769020581x, doi10108001926230701320337, doi101146annurevpathol121808102144, doi101371journalpbio0060301"
}

Fondo. Entre los pacientes con cáncer que reciben radioterapia, aproximadamente el 5–15 % pueden presentar reacciones adversas en tejidos y órganos normales que limitan su tratamiento a un régimen completo y originalmente programado. El desarrollo de biomarcadores y ensayos para oncología radiológica que permitan predecir la toxicidad en tejidos normales de los pacientes requiere muchos recursos; por lo tanto, su estado actual y las direcciones potenciales para la investigación futura deben analizarse y reevaluarse periódicamente. Propósito – esta revisión resume los enfoques metodológicos y los avances en el área de ensayos de laboratorio funcionales basados en la supervivencia celular ex vivo para predecir la radiosensibilidad clínica individual. Materiales y métodos. Los datos para el análisis y sistematización se obtuvieron de artículos completos publicados en revistas científicas internacionales revisadas por pares (en inglés) entre 1990–2020, seleccionados mediante una búsqueda exhaustiva en la base de datos de información PubMed y referencias cruzadas sobre el tema "Pruebas celulares funcionales para la radiosensibilidad intrínseca para predecir efectos adversos de la radiación y complicaciones de la radioterapia". Resultados. En teoría, podría esperarse que la supervivencia de células clonogénicas después de la irradiación ex vivo pueda servir como el mejor predictor individual de toxicidad por radiación, ya que es un indicador integral del daño celular y la disminución de su potencial regenerativo. Tendencialmente, los fibroblastos, como sistema de prueba para tales estudios, no mostraron ventajas significativas sobre los linfocitos ni en la detección de variaciones interindividuales en la radiosensibilidad celular intrínseca ni en la predicción de toxicidad clínica por radiación, incluso para la de la piel. Se encontró que el ensayo de supervivencia de células clonogénicas, siendo muy laborioso y técnicamente exigente, también sufre de falta de sensibilidad y especificidad, incertidumbre esencial y baja reproducibilidad de los resultados, y por lo tanto no es adecuado para la detección de la radiosensibilidad intrínseca anormal. Sin embargo, este tipo de ensayos es aplicable para la experiencia radiobiológica post factum en casos individuales con lesiones radiológicas inesperadas y extremas. El ensayo de apoptosis linfocítica inducida por radiación parece ser más prometedor, aunque aún requiere investigación fundamental adicional para una mejor comprensión de su fondo y más estudios de validación con el fin de evaluar los grupos de pacientes óptimos, regímenes de radioterapia y efectos adversos para su uso confiado en la práctica clínica. Los cambios en la regulación de los puntos de control del ciclo celular (retraso inducido por radiación) ex vivo pueden tener una asociación positiva o invertida, o ninguna correlación con las respuestas clínicas a la radiación en los tejidos; por lo tanto, hasta ahora no pueden incluirse en la caja de herramientas de pruebas radiobiológicas aplicadas. Conclusiones. Hasta la fecha, en la práctica de la radiobiología clínica, no existen pruebas funcionales completamente validadas y estandarizadas basadas en la supervivencia celular después de la irradiación ex vivo, que permitan una predicción suficientemente precisa de los efectos adversos de la radiación en los tejidos normales de los pacientes de radioterapia. En general, las pruebas ex vivo basadas en la evaluación de solo una forma de muerte celular en un tipo celular no son completamente confiables como un ensayo "stand alone", porque diferentes vías de muerte celular probablemente desempeñan roles diferentes y muestran diferentes respuestas a la dosis dentro de la reacción general del tejido irradiado u órgano crítico. Tales pruebas deberían convertirse en parte de plataformas predictivas multiparamétricas.

@article{doi1046879ukroj1202189118,
    author = "Vinnikov, Volodymyr and Rublova, T.V.",
    title = "Predictores de complicaciones inducidas por radiación en oncología radioterápica basados en pruebas de supervivencia celular después de exposición ex vivo: revisión de la literatura",
    year = "2021",
    journal = "Український радіологічний та онкологічний журнал",
    abstract = "Antecedentes. Entre los pacientes con cáncer que reciben radioterapia, aproximadamente el 5–15 % puede presentar reacciones adversas en tejidos y órganos normales que limitan su tratamiento en un régimen completo y originalmente programado. El desarrollo de biomarcadores y ensayos para la oncología radioterápica que permitan predecir la toxicidad de los tejidos normales de los pacientes requiere muchos recursos; por lo tanto, su estado actual y las posibles direcciones para futuras investigaciones deben analizarse y reevaluarse periódicamente. Objetivo – esta revisión resume los enfoques metodológicos y los avances en el área de ensayos de laboratorio funcionales basados en la supervivencia celular ex vivo para la predicción de la radiosensibilidad clínica individual. Materiales y métodos. Los datos para el análisis y sistematización se obtuvieron de artículos completos publicados en revistas científicas internacionales revisadas por pares (en inglés) entre 1990–2020, que fueron seleccionados mediante una búsqueda exhaustiva en la base de datos de información PubMed y referencias cruzadas sobre el tema "Pruebas celulares funcionales para la radiosensibilidad intrínseca para predecir efectos adversos de la radiación y complicaciones de la radioterapia". Resultados. En teoría, podría esperarse que la supervivencia celular clonogénica después de la irradiación ex vivo pueda servir como el mejor predictor individual de la toxicidad por radiación, ya que es un indicador integral del daño celular y la disminución de su potencial regenerativo. Tendencialmente, los fibroblastos, como sistema de prueba para tales estudios, no mostraron ventajas significativas sobre los linfocitos ni en la detección de variaciones interindividuales en la radiosensibilidad celular intrínseca ni en la predicción de la toxicidad clínica por radiación, incluso para la piel. Se encontró que el ensayo de supervivencia celular clonogénica, siendo muy laborioso y técnicamente exigente, también sufre de falta de sensibilidad y especificidad, incertidumbre esencial y baja reproducibilidad de los resultados, y por lo tanto no es adecuado para la detección de la radiosensibilidad intrínseca anormal. Sin embargo, este tipo de ensayos es aplicable para la pericia radiobiológica post factum en casos individuales con lesiones radiactivas inesperadas y extremas. El ensayo de apoptosis linfocitaria inducida por radiación parece ser más prometedor, aunque aún requiere más investigación fundamental para una mejor comprensión de su base y más estudios de validación con el fin de evaluar los grupos de pacientes óptimos, los regímenes de radioterapia y los efectos adversos para su uso confiado en la práctica clínica. Los cambios en la regulación de los puntos de control del ciclo celular (retraso inducido por radiación) ex vivo pueden tener una asociación positiva o invertida, o ninguna correlación con las respuestas clínicas a la radiación en los tejidos; por lo tanto, hasta ahora no pueden incluirse en la caja de herramientas de pruebas radiobiológicas aplicadas. Conclusiones. Hasta la fecha, en la práctica de la radiobiología clínica, no existen pruebas funcionales completamente validadas y estandarizadas basadas en la supervivencia celular después de la irradiación ex vivo, que permitan una predicción suficientemente precisa de los efectos adversos de la radiación en los tejidos normales de los pacientes de radioterapia. En general, las pruebas ex vivo basadas en la evaluación de solo una forma de muerte celular en un tipo celular no son completamente confiables como un ensayo "stand alone", porque diferentes vías de muerte celular probablemente desempeñan diferentes roles y muestran diferentes respuestas a la dosis dentro de la reacción general del tejido irradiado u órgano crítico. Tales pruebas deberían convertirse en parte de plataformas predictivas multiparamétricas.",
    url = "https://doi.org/10.46879/ukroj.1.2021.89-118",
    doi = "10.46879/ukroj.1.2021.89-118",
    openalex = "W3156546532",
    references = "doi101016jacthis201802005"
}

El análisis de la toxicidad de los fármacos quimioterapéuticos es una de las principales tareas de la farmacología clínica. La viabilidad disminuida de las células tumorales puede reflejar dos procesos fisiológicos importantes, a saber, la parada de la proliferación asociada a alteraciones del metabolismo celular o la muerte celular real. La elucidación de los procesos exactos que median la reducción en el número de células es fundamentalmente importante para establecer los mecanismos de acción de los fármacos. Solo el uso de una combinación de enfoques biológicos celulares y bioquímicos hace posible comprender estos mecanismos. Aquí, utilizando diversas líneas de células tumorales y un conjunto de enfoques metodológicos, realizamos un análisis comparativo detallado y demostramos las posibles vías para superar las incertidumbres en el establecimiento de los mecanismos de respuesta celular a la acción de los fármacos quimioterapéuticos y su toxicidad.

@article{doi101038s4142002201207x,
    author = "Sazonova, Elena V. y Chesnokov, Mikhail S. y Zhivotovsky, Boris y Kopeina, Gelina S.",
    title = "Evaluación de la toxicidad de fármacos: proliferación celular versus muerte celular",
    year = "2022",
    journal = "Cell Death Discovery",
    abstract = "El análisis de la toxicidad de los fármacos quimioterapéuticos es una de las principales tareas de la farmacología clínica. La viabilidad disminuida de las células tumorales puede reflejar dos procesos fisiológicos importantes, a saber, la parada de la proliferación asociada a alteraciones del metabolismo celular o la muerte celular real. La elucidación de los procesos exactos que median la reducción en el número de células es fundamentalmente importante para establecer los mecanismos de acción de los fármacos. Solo el uso de una combinación de enfoques biológicos celulares y bioquímicos hace posible comprender estos mecanismos. Aquí, utilizando diversas líneas de células tumorales y un conjunto de enfoques metodológicos, realizamos un análisis comparativo detallado y demostramos las posibles vías para superar las incertidumbres en el establecimiento de los mecanismos de respuesta celular a la acción de los fármacos quimioterapéuticos y su toxicidad.",
    url = "https://doi.org/10.1038/s41420-022-01207-x",
    doi = "10.1038/s41420-022-01207-x",
    openalex = "W4306164209",
    references = "doi101002fft244, doi101016jacthis201802005, doi103390ijms222312827"
}

La enfermedad de Alzheimer (EA) es la forma más común de demencia, caracterizada por deterioro cognitivo progresivo y neurodegeneración. Extensos estudios clínicos y genómicos han revelado biomarcadores, factores de riesgo, vías y objetivos de la EA en la última década. Sin embargo, la base molecular exacta del desarrollo y la progresión de la EA sigue siendo elusiva. La emergente tecnología de secuenciación de células individuales puede potencialmente proporcionar conocimientos a nivel celular sobre la enfermedad. Aquí revisamos sistemáticamente los enfoques bioinformáticos de última generación para analizar datos de secuenciación de células individuales y sus aplicaciones a la EA en 14 direcciones principales, incluyendo 1) control de calidad y normalización, 2) reducción de dimensionalidad y extracción de características, 3) análisis de agrupación celular, 4) inferencia de tipos celulares y anotación, 5) expresión diferencial, 6) inferencia de trayectorias, 7) análisis de variación del número de copias, 8) integración de multi-ómica de células individuales, 9) análisis epigenómico, 10) inferencia de redes génicas, 11) priorización de subpoblaciones celulares, 12) análisis integrativo de datos de sc-RNA-seq de humanos y ratones, 13) transcriptómica espacial, y 14) comparación de estudios de modelos de ratón de EA de célula única y estudios de EA humana de célula única. También abordamos los desafíos en el uso de tejidos humanos postmortem y de ratón y delineamos desarrollos futuros en el análisis de datos de secuenciación de células individuales. Importantly, hemos implementado nuestro flujo de trabajo recomendado para cada dirección analítica principal y lo aplicamos a un conjunto de datos grande de secuenciación de ARN de núcleo único (snRNA-seq) en EA. Se reportan resultados analíticos clave mientras que los scripts y los datos se comparten con la comunidad de investigación a través de GitHub. En resumen, esta revisión exhaustiva proporciona conocimientos sobre diversos enfoques para analizar datos de secuenciación de células individuales y ofrece directrices específicas para el diseño de estudios y una variedad de direcciones analíticas. La revisión y las herramientas de software acompañantes servirán como un recurso valioso para estudiar mecanismos celulares y moleculares de EA, otras enfermedades o sistemas biológicos a nivel de célula única.

@article{doi101186s1302402200517z,
    author = "Wang, Minghui y Song, Won‐Min y Chen, Ming y Wang, Qian y Zhou, Xianxiao y Xu, Peng y Krek, Azra y Yoon, Yonejung y Ho, Lap y Orr, Miranda E. y Yuan, Guo‐Cheng y Zhang, Bin",
    title = "Directrices para bioinformática del análisis de datos de secuenciación de células individuales en la enfermedad de Alzheimer: revisión, recomendación, implementación y aplicación",
    year = "2022",
    journal = "Molecular Neurodegeneration",
    abstract = "La enfermedad de Alzheimer (EA) es la forma más común de demencia, caracterizada por deterioro cognitivo progresivo y neurodegeneración. Extensos estudios clínicos y genómicos han revelado biomarcadores, factores de riesgo, vías y objetivos de la EA en la última década. Sin embargo, la base molecular exacta del desarrollo y la progresión de la EA sigue siendo elusiva. La emergente tecnología de secuenciación de células individuales puede potencialmente proporcionar conocimientos a nivel celular sobre la enfermedad. Aquí revisamos sistemáticamente los enfoques bioinformáticos de última generación para analizar datos de secuenciación de células individuales y sus aplicaciones a la EA en 14 direcciones principales, incluyendo 1) control de calidad y normalización, 2) reducción de dimensionalidad y extracción de características, 3) análisis de agrupación celular, 4) inferencia de tipos celulares y anotación, 5) expresión diferencial, 6) inferencia de trayectorias, 7) análisis de variación del número de copias, 8) integración de multi-ómica de células individuales, 9) análisis epigenómico, 10) inferencia de redes génicas, 11) priorización de subpoblaciones celulares, 12) análisis integrativo de datos de sc-RNA-seq de humanos y ratones, 13) transcriptómica espacial, y 14) comparación de estudios de modelos de ratón de EA de célula única y estudios de EA humana de célula única. También abordamos los desafíos en el uso de tejidos humanos postmortem y de ratón y delineamos desarrollos futuros en el análisis de datos de secuenciación de células individuales. Importantly, hemos implementado nuestro flujo de trabajo recomendado para cada dirección analítica principal y lo aplicamos a un conjunto de datos grande de secuenciación de ARN de núcleo único (snRNA-seq) en EA. Se reportan resultados analíticos clave mientras que los scripts y los datos se comparten con la comunidad de investigación a través de GitHub. En resumen, esta revisión exhaustiva proporciona conocimientos sobre diversos enfoques para analizar datos de secuenciación de células individuales y ofrece directrices específicas para el diseño de estudios y una variedad de direcciones analíticas. La revisión y las herramientas de software acompañantes servirán como un recurso valioso para estudiar mecanismos celulares y moleculares de EA, otras enfermedades o sistemas biológicos a nivel de célula única.",
    url = "https://doi.org/10.1186/s13024-022-00517-z",
    doi = "10.1186/s13024-022-00517-z",
    openalex = "W4214892207",
    references = "doi101038s12276020005280"
}

@article{doi10100797810716305252,
    author = "Ghasemi, Mahshid y Liang, Sisi y Luu, Quang Minh y Kempson, Ivan M.",
    title = "The MTT Assay: A Method for Error Minimization and Interpretation in Measuring Cytotoxicity and Estimating Cell Viability",
    year = "2023",
    journal = "Methods in molecular biology",
    url = "https://doi.org/10.1007/978-1-0716-3052-5\_2",
    doi = "10.1007/978-1-0716-3052-5\_2",
    openalex = "W4371783751",
    references = "doi103390ijms222312827"
}

La producción de carne cultivada requiere un medio de cultivo celular libre de suero eficiente, robusto y altamente optimizado para el necesario aumento de escala de la expansión de células musculares. Las formulaciones existentes de medios libres de suero son complejas, costosas y no se han optimizado para células musculares. Por lo tanto, nos embarcamos en este trabajo para desarrollar un medio libre de suero simple y robusto para la proliferación de células satélite bovinas (SCs) mediante Diseño de Experimentos (DOE) y Metodología de Superficie de Respuesta (RSM) utilizando citometría basada en imágenes precisa y de alto rendimiento. Se investigaron los atributos proliferativos mediante transcriptómica y el rendimiento a largo plazo se validó utilizando múltiples ensayos en vivo. Aquí formulamos un medio basado en tres componentes altamente optimizados: FGF2 (2 ng/mL), fetuina (600 µg/mL) y BSA (75 µg/mL), que junto con un suplemento de insulina-transferrina-selenio (1x), mantuvieron la proliferación de células satélite bovinas, células satélite porcinas y células musculares murinas C2C12. Sorprendentemente, las células cultivadas en nuestro medio denominado Tri-basal 2.0+ rindieron mejor que las células cultivadas en 10% FBS, con respecto a la proliferación. Por lo tanto, el Tri-basal 2.0+ optimizado mejoró la adhesión celular libre de suero y la proliferación a largo plazo, proporcionando una solución alternativa al uso de FBS en la producción de carne cultivada.

@article{doi101016jfoodres2023113194,
    author = "Skrivergaard, Stig y Young, J.F. y Sahebekhtiari, Navid y Semper, Cameron y Venkatesan, Meenakshi y Savchenko, Alexei y Stogios, P.J. y Therkildsen, Margrethe y Rasmussen, Martin Krøyer",
    title = "Un medio libre de suero simple y robusto para la proliferación de células musculares",
    year = "2023",
    journal = "Food Research International",
    abstract = "La producción de carne cultivada requiere un medio de cultivo celular libre de suero eficiente, robusto y altamente optimizado para el necesario aumento de escala de la expansión de células musculares. Las formulaciones existentes de medios libres de suero son complejas, costosas y no se han optimizado para células musculares. Por lo tanto, nos embarcamos en este trabajo para desarrollar un medio libre de suero simple y robusto para la proliferación de células satélite bovinas (SCs) mediante Diseño de Experimentos (DOE) y Metodología de Superficie de Respuesta (RSM) utilizando citometría basada en imágenes precisa y de alto rendimiento. Se investigaron los atributos proliferativos mediante transcriptómica y el rendimiento a largo plazo se validó utilizando múltiples ensayos en vivo. Aquí formulamos un medio basado en tres componentes altamente optimizados: FGF2 (2 ng/mL), fetuina (600 µg/mL) y BSA (75 µg/mL), que junto con un suplemento de insulina-transferrina-selenio (1x), mantuvieron la proliferación de células satélite bovinas, células satélite porcinas y células musculares murinas C2C12. Sorprendentemente, las células cultivadas en nuestro medio denominado Tri-basal 2.0+ rindieron mejor que las células cultivadas en 10\% FBS, con respecto a la proliferación. Por lo tanto, el Tri-basal 2.0+ optimizado mejoró la adhesión celular libre de suero y la proliferación a largo plazo, proporcionando una solución alternativa al uso de FBS en la producción de carne cultivada.",
    url = "https://doi.org/10.1016/j.foodres.2023.113194",
    doi = "10.1016/j.foodres.2023.113194",
    openalex = "W4382559755",
    references = "doi103390ijms222312827"
}

Inferir redes de regulación génica (NRG) es un desafío fundamental en biología que busca desentrañar las relaciones complejas entre genes y sus reguladores. Descifrar estas redes desempeña un papel crítico en la comprensión del crosstalk regulatorio subyacente que impulsa muchos procesos celulares y enfermedades. Los avances recientes en tecnología de secuenciación han llevado al desarrollo de métodos de inferencia de NRG de vanguardia que aprovechan datos multi-ómicos de células individuales emparejados. Al emplear diversas metodologías matemáticas y estadísticas, estos métodos buscan reconstruir redes de regulación génica más completas y precisas. En esta revisión, ofrecemos una breve descripción general de los fundamentos estadísticos y metodológicos comúnmente utilizados en los métodos de inferencia de NRG. Luego comparamos y contrastamos los últimos métodos de inferencia de NRG de vanguardia para datos multi-ómicos emparejados de células individuales, y discutimos sus supuestos, limitaciones y oportunidades. Finalmente, discutimos los desafíos y direcciones futuras que prometen avances adicionales en este campo en rápido desarrollo.

@article{doi101038s41540023003126,
    author = "Kim, Daniel y Tran, Andy y Kim, Hani Jieun y Lin, Yingxin y Yang, Jean y Yang, Pengyi",
    title = "Reconstrucción de redes de regulación génica: aprovechando el poder de los datos multi-ómicos de células individuales",
    year = "2023",
    journal = "npj Systems Biology and Applications",
    abstract = "Inferir redes de regulación génica (NRG) es un desafío fundamental en biología que busca desentrañar las relaciones complejas entre genes y sus reguladores. Descifrar estas redes desempeña un papel crítico en la comprensión del crosstalk regulatorio subyacente que impulsa muchos procesos celulares y enfermedades. Los avances recientes en tecnología de secuenciación han llevado al desarrollo de métodos de inferencia de NRG de vanguardia que aprovechan datos multi-ómicos de células individuales emparejados. Al emplear diversas metodologías matemáticas y estadísticas, estos métodos buscan reconstruir redes de regulación génica más completas y precisas. En esta revisión, ofrecemos una breve descripción general de los fundamentos estadísticos y metodológicos comúnmente utilizados en los métodos de inferencia de NRG. Luego comparamos y contrastamos los últimos métodos de inferencia de NRG de vanguardia para datos multi-ómicos emparejados de células individuales, y discutimos sus supuestos, limitaciones y oportunidades. Finalmente, discutimos los desafíos y direcciones futuras que prometen avances adicionales en este campo en rápido desarrollo.",
    url = "https://doi.org/10.1038/s41540-023-00312-6",
    doi = "10.1038/s41540-023-00312-6",
    openalex = "W4387774515",
    references = "doi101038s12276020005280"
}

FONDO: La embriogénesis somática es un proceso principal para la regeneración de plantas. Sin embargo, la comunicación celular y la red de regulación génica responsable de la reprogramación celular durante la embriogénesis somática siguen siendo en gran parte desconocidas. Los avances recientes en tecnologías de célula única nos permiten explorar el mecanismo de la regeneración de plantas a resolución de célula única. RESULTADOS: Generamos un paisaje transcriptómico de alta resolución de tejido hipocotilar del genotipo de algodón altamente regenerable Jin668 y el recalcitrante TM-1. Identificamos nueve clústeres celulares putativos y 23 genes marcadores específicos de clúster para ambas variedades. Encontramos que la célula vascular primaria es el tipo celular principal que experimenta transición de destino celular en respuesta a estimulación externa. Un análisis adicional de trayectoria de desarrollo y red de regulación génica de estos clústeres celulares revela que un total de 41 genes relacionados con respuesta hormonal, incluyendo LAX2, LAX1 y LOX3, exhiben patrones de expresión diferentes en la región de xilema primario y cámbium de Jin668 y TM-1. También identificamos genes novedosos, incluyendo CSEF, PIS1, AFB2, ATHB2, PLC2 y PLT3, que están involucrados en la regeneración. Demostramos que LAX2, LAX1 y LOX3 juegan roles importantes en la proliferación de callo y la regeneración de plantas mediante edición CRISPR/Cas9 y ensayo de sobreexpresión. CONCLUSIONES: Este estudio proporciona nuevas perspectivas sobre el papel de la red de regulación en la transición de destino celular y la reprogramación durante la regeneración de plantas impulsada por embriogénesis somática.

@article{doi101186s13059023030326,
    author = "Zhu, Xiangqian and Xu, Zhongping and Wang, Guanying and Cong, Yulong and Lu, Yu and Jia, Ruoyu and Qin, Yuan and Zhang, Guangyu and Li, Bo and Yuan, Daojun and Tu, Lili and Yang, Xiyan and Lindsey, Keith and Zhang, Xianlong and Jin, Shuangxia",
    title = "Single-cell resolution analysis reveals the preparation for reprogramming the fate of stem cell niche in cotton lateral meristem",
    year = "2023",
    journal = "Genome biology",
    abstract = "FONDO: La embriogénesis somática es un proceso principal para la regeneración de plantas. Sin embargo, la comunicación celular y la red de regulación génica responsable de la reprogramación celular durante la embriogénesis somática siguen siendo en gran parte desconocidas. Los avances recientes en tecnologías de célula única nos permiten explorar el mecanismo de la regeneración de plantas a resolución de célula única. RESULTADOS: Generamos un paisaje transcriptómico de alta resolución de tejido hipocotilar del genotipo de algodón altamente regenerable Jin668 y el recalcitrante TM-1. Identificamos nueve clústeres celulares putativos y 23 genes marcadores específicos de clúster para ambas variedades. Encontramos que la célula vascular primaria es el tipo celular principal que experimenta transición de destino celular en respuesta a estimulación externa. Un análisis adicional de trayectoria de desarrollo y red de regulación génica de estos clústeres celulares revela que un total de 41 genes relacionados con respuesta hormonal, incluyendo LAX2, LAX1 y LOX3, exhiben patrones de expresión diferentes en la región de xilema primario y cámbium de Jin668 y TM-1. También identificamos genes novedosos, incluyendo CSEF, PIS1, AFB2, ATHB2, PLC2 y PLT3, que están involucrados en la regeneración. Demostramos que LAX2, LAX1 y LOX3 juegan roles importantes en la proliferación de callo y la regeneración de plantas mediante edición CRISPR/Cas9 y ensayo de sobreexpresión. CONCLUSIONES: Este estudio proporciona nuevas perspectivas sobre el papel de la red de regulación en la transición de destino celular y la reprogramación durante la regeneración de plantas impulsada por embriogénesis somática.",
    url = "https://doi.org/10.1186/s13059-023-03032-6",
    doi = "10.1186/s13059-023-03032-6",
    openalex = "W4386167342",
    references = "doi101038s12276020005280"
}

Los ensayos de viabilidad celular y citotoxicidad desempeñan un papel crucial en el cribado de fármacos y en la evaluación de los efectos citotóxicos de diversos productos químicos. La cuantificación de la viabilidad celular y la proliferación sirve como piedra angular para numerosos ensayos in vitro que evalúan las respuestas celulares a factores externos. En la última década, varios estudios han desarrollado directrices para definir e interpretar la viabilidad celular y la citotoxicidad desde perspectivas morfológicas, bioquímicas y funcionales. A medida que este dominio continúa experimentando un crecimiento continuo, revelando nuevos mecanismos que orquestan diversas vías de citotoxicidad celular, sugerimos una clasificación revisada para múltiples ensayos empleados en la evaluación de la viabilidad celular y la muerte celular. Esta clasificación se basa en el compartimento celular y/o el elemento bioquímico involucrado, con un enfoque específico en los aspectos mecanísticos y esenciales del proceso. Los ensayos se basan en diversas funciones celulares, que abarcan la actividad metabólica, la actividad enzimática, la permeabilidad e integridad de la membrana celular, el contenido de adenosina 5'-trifosfato, la adhesión celular, los equivalentes reductores, la inclusión o exclusión de tinción, la actividad constitutiva de proteasas, la formación de colonias, la fragmentación del ADN y la división nuclear. Estos ensayos presentan enfoques sencillos, confiables, sensibles, reproducibles, rentables y de alto rendimiento para evaluar los efectos de las nuevas biomoléculas quimioterapéuticas formuladas sobre la supervivencia celular durante el proceso de desarrollo de fármacos.

@article{doi101002cbf4007,
    author = "Lefsih, Khalef and Lydia, Radja and Filicia, Khettar and Moussa, Berkoud",
    title = "Cell viability and cytotoxicity assays: Biochemical elements and cellular compartments",
    year = "2024",
    journal = "Cell Biochemistry and Function",
    abstract = "Cell viability and cytotoxicity assays play a crucial role in drug screening and evaluating the cytotoxic effects of various chemicals. The quantification of cell viability and proliferation serves as the cornerstone for numerous in vitro assays that assess cellular responses to external factors. In the last decade, several studies have developed guidelines for defining and interpreting cell viability and cytotoxicity based on morphological, biochemical, and functional perspectives. As this domain continues to experience ongoing growth, revealing new mechanisms orchestrating diverse cell cytotoxicity pathways, we suggest a revised classification for multiple assays employed in evaluating cell viability and cell death. This classification is rooted in the cellular compartment and/or biochemical element involved, with a specific focus on mechanistic and essential aspects of the process. The assays are founded on diverse cell functions, encompassing metabolic activity, enzyme activity, cell membrane permeability and integrity, adenosine 5'-triphosphate content, cell adherence, reduction equivalents, dye inclusion or exclusion, constitutive protease activity, colony formation, DNA fragmentation and nuclear splitting. These assays present straightforward, reliable, sensitive, reproducible, cost-effective, and high-throughput approaches for appraising the effects of newly formulated chemotherapeutic biomolecules on the cell survival during the drug development process.",
    url = "https://doi.org/10.1002/cbf.4007",
    doi = "10.1002/cbf.4007",
    openalex = "W4394595909",
    references = "doi101002fft244, doi103390ijms222312827"
}

El crecimiento exponencial de los big data en biología de ARN (RB) ha llevado al desarrollo de modelos de aprendizaje profundo (DL) que han impulsado descubrimientos cruciales. Como se evidencia constantemente en estudios de DL en otros campos, la implementación exitosa de DL en RB depende en gran medida de la utilización efectiva de conjuntos de datos a gran escala de bases de datos públicas. En el logro de este objetivo, los métodos de codificación de datos, los algoritmos de aprendizaje y las técnicas que se alinean bien con el conocimiento del dominio biológico han desempeñado roles fundamentales. En esta revisión, proporcionamos principios orientadores para aplicar estos conceptos de DL a diversos problemas en RB demostrando ejemplos exitosos y metodologías asociadas. También discutimos los desafíos restantes en el desarrollo de modelos de DL para RB y sugerimos estrategias para superar estos desafíos. En general, esta revisión tiene como objetivo iluminar el potencial convincente de DL para RB y las formas de aplicar esta poderosa tecnología para investigar la biología intrigante del ARN de manera más efectiva.

@article{doi101038s1227602401243w,
    author = "Hwang, Hyeonseo y Jeon, Hyeonseong y Yeo, Nagyeong y Baek, Daehyun",
    title = "Big data y aprendizaje profundo para biología de ARN",
    year = "2024",
    journal = "Experimental & Molecular Medicine",
    abstract = "El crecimiento exponencial de los big data en biología de ARN (RB) ha llevado al desarrollo de modelos de aprendizaje profundo (DL) que han impulsado descubrimientos cruciales. Como se evidencia constantemente en estudios de DL en otros campos, la implementación exitosa de DL en RB depende en gran medida de la utilización efectiva de conjuntos de datos a gran escala de bases de datos públicas. En el logro de este objetivo, los métodos de codificación de datos, los algoritmos de aprendizaje y las técnicas que se alinean bien con el conocimiento del dominio biológico han desempeñado roles fundamentales. En esta revisión, proporcionamos principios orientadores para aplicar estos conceptos de DL a diversos problemas en RB demostrando ejemplos exitosos y metodologías asociadas. También discutimos los desafíos restantes en el desarrollo de modelos de DL para RB y sugerimos estrategias para superar estos desafíos. En general, esta revisión tiene como objetivo iluminar el potencial convincente de DL para RB y las formas de aplicar esta poderosa tecnología para investigar la biología intrigante del ARN de manera más efectiva.",
    url = "https://doi.org/10.1038/s12276-024-01243-w",
    doi = "10.1038/s12276-024-01243-w",
    openalex = "W4399691497",
    references = "doi101038s12276020005280"
}

En los últimos años, los avances significativos en bioquímica, ciencia de materiales, ingeniería y pruebas asistidas por computadora han impulsado el desarrollo de herramientas de alto rendimiento para el perfilado de información genética. Las tecnologías de secuenciación de ARN de célula única (scRNA-seq) se han consolidado como herramientas clave para analizar secuencias genéticas a nivel de células individuales. Estas tecnologías revelan la diversidad celular y permiten explorar los estados y transformaciones celulares con una resolución excepcional. A diferencia de la secuenciación masiva, que proporciona datos promediados de la población, la scRNA-seq puede detectar subtipos celulares o variaciones en la expresión génica que de otro modo pasarían desapercibidas. Sin embargo, una limitación clave de la scRNA-seq es su incapacidad para preservar la información espacial sobre el transcriptoma de ARN, ya que el proceso requiere la disociación de tejidos y el aislamiento celular. La transcriptómica espacial es un avance pivotal en la biotecnología médica, facilitando la identificación de moléculas como el ARN en su contexto espacial original dentro de secciones de tejido a nivel de célula única. Esta capacidad ofrece una ventaja sustancial sobre las técnicas tradicionales de secuenciación de célula única. La transcriptómica espacial ofrece valiosas perspectivas en una amplia gama de campos biomédicos, incluyendo neurología, embriología, investigación del cáncer, inmunología e histología. Esta revisión destaca los enfoques de secuenciación de célula única, los desarrollos tecnológicos recientes, los desafíos asociados, las diversas técnicas para el análisis de datos de expresión y sus aplicaciones en disciplinas como la investigación del cáncer, microbiología, neurociencia, biología reproductiva e inmunología. Destaca el papel crítico de las herramientas de secuenciación de célula única en caracterizar la naturaleza dinámica de las células individuales.

@article{doi103389abp202513922,
    author = "Desta, Getnet Molla and Birhanu, Alemayehu Godana",
    title = "Avances en secuenciación de ARN de célula única y transcriptómica espacial: transformando la investigación biomédica",
    year = "2025",
    journal = "Acta Biochimica Polonica",
    abstract = "En los últimos años, los avances significativos en bioquímica, ciencia de materiales, ingeniería y pruebas asistidas por computadora han impulsado el desarrollo de herramientas de alto rendimiento para el perfilado de información genética. Las tecnologías de secuenciación de ARN de célula única (scRNA-seq) se han consolidado como herramientas clave para analizar secuencias genéticas a nivel de células individuales. Estas tecnologías revelan la diversidad celular y permiten explorar los estados y transformaciones celulares con una resolución excepcional. A diferencia de la secuenciación masiva, que proporciona datos promediados de la población, la scRNA-seq puede detectar subtipos celulares o variaciones en la expresión génica que de otro modo pasarían desapercibidas. Sin embargo, una limitación clave de la scRNA-seq es su incapacidad para preservar la información espacial sobre el transcriptoma de ARN, ya que el proceso requiere la disociación de tejidos y el aislamiento celular. La transcriptómica espacial es un avance pivotal en la biotecnología médica, facilitando la identificación de moléculas como el ARN en su contexto espacial original dentro de secciones de tejido a nivel de célula única. Esta capacidad ofrece una ventaja sustancial sobre las técnicas tradicionales de secuenciación de célula única. La transcriptómica espacial ofrece valiosas perspectivas en una amplia gama de campos biomédicos, incluyendo neurología, embriología, investigación del cáncer, inmunología e histología. Esta revisión destaca los enfoques de secuenciación de célula única, los desarrollos tecnológicos recientes, los desafíos asociados, las diversas técnicas para el análisis de datos de expresión y sus aplicaciones en disciplinas como la investigación del cáncer, microbiología, neurociencia, biología reproductiva e inmunología. Destaca el papel crítico de las herramientas de secuenciación de célula única en caracterizar la naturaleza dinámica de las células individuales.",
    url = "https://doi.org/10.3389/abp.2025.13922",
    doi = "10.3389/abp.2025.13922",
    openalex = "W4407184228",
    references = "doi101038s12276020005280"
}

Las células madre óseas (SSCs) están bien caracterizadas en humanos y ratones, proporcionando valiosas perspectivas sobre el desarrollo y la regeneración ósea. Sin embargo, su identificación en aves, particularmente en embriones de pollo, sigue siendo limitada. En el presente estudio, utilizamos perfilado transcriptómico de células individuales para comparar la composición celular y la funcionalidad de las yemas de extremidades embrionarias humanas y de pollo. Nuestro análisis inter-especies reveló una alta conservación de tipos celulares clave, como progenitores mesenquimales y osteocondrales, junto con una notable heterogeneidad en los perfiles de expresión génica individuales. Identificamos patrones de expresión génica conservados y específicos de la especie en las SSCs de pollo. El análisis de expresión diferencial combinado con la Ontología de Genes (GO), las vías de la Enciclopedia de Genes y Genomas de Kyoto (KEGG) y las redes de interacción proteína-proteína (PPI) sugirió que COL5A2, COL1A2, PRRX1 y TGFβ2 podrían servir como reguladores clave de las SSCs de pollo. Los ensayos de inmunofluorescencia confirmaron la localización predominante de estos genes en la región periostal, con una expresión menor en los centros de osificación primaria. Este estudio mejora nuestra comprensión de la diversidad celular en las yemas de extremidades embrionarias de pollo y destaca mecanismos conservados y divergentes entre especies, ofreciendo perspectivas para futuras investigaciones sobre SSCs y la selección de modelos animales en biología ósea.

@article{doi101371journalpone0346514,
    author = "Zhao, Ruohan y Jian, Zonghui y Yang, Fangxiao y Wang, Kun y Liu, Lixian y Xu, Zhiqiang y Jia, Junjing y Dou, Tengfei y He, Xiaoming",
    title = "Perfilado de células individuales revela reguladores clave de células madre óseas en el desarrollo de extremidades embrionarias de pollo y humano.",
    year = "2026",
    journal = "PloS one",
    abstract = "Las células madre óseas (SSCs) están bien caracterizadas en humanos y ratones, proporcionando valiosas perspectivas sobre el desarrollo y la regeneración ósea. Sin embargo, su identificación en aves, particularmente en embriones de pollo, sigue siendo limitada. En el presente estudio, utilizamos perfilado transcriptómico de células individuales para comparar la composición celular y la funcionalidad de las yemas de extremidades embrionarias humanas y de pollo. Nuestro análisis inter-especies reveló una alta conservación de tipos celulares clave, como progenitores mesenquimales y osteocondrales, junto con una notable heterogeneidad en los perfiles de expresión génica individuales. Identificamos patrones de expresión génica conservados y específicos de la especie en las SSCs de pollo. El análisis de expresión diferencial combinado con la Ontología de Genes (GO), las vías de la Enciclopedia de Genes y Genomas de Kyoto (KEGG) y las redes de interacción proteína-proteína (PPI) sugirió que COL5A2, COL1A2, PRRX1 y TGFβ2 podrían servir como reguladores clave de las SSCs de pollo. Los ensayos de inmunofluorescencia confirmaron la localización predominante de estos genes en la región periostal, con una expresión menor en los centros de osificación primaria. Este estudio mejora nuestra comprensión de la diversidad celular en las yemas de extremidades embrionarias de pollo y destaca mecanismos conservados y divergentes entre especies, ofreciendo perspectivas para futuras investigaciones sobre SSCs y la selección de modelos animales en biología ósea.",
    url = "https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/42048409/",
    doi = "10.1371/journal.pone.0346514",
    pmid = "42048409"
}

@misc{sadguna2026cellular,
    author = "Sadguna, V.",
    title = "Biología celular",
    year = "2026",
    url = "https://doi.org/10.70593/978-93-7185-293-7",
    doi = "10.70593/978-93-7185-293-7"
}

@misc{crossrefNoneinternational,
    title = "International Journal of Cell Biology and Cellular Functions",
    year = "None",
    url = "https://doi.org/10.37591/ijcbcf",
    doi = "10.37591/ijcbcf",
    openalex = "W4379209419"
}

@misc{crossrefNonejournal,
    title = "Journal of Cellular Toxicology and Cell Biology",
    year = "None",
    url = "https://doi.org/10.29199/ctcb",
    doi = "10.29199/ctcb",
    openalex = "W4252752144"
}